布洛芬降解菌生长特性研究及降解基因筛选

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1、分类号：0939学校代码：10712UDC：579研宄生学号：2012050980密级：公开S灶衣林科长大学2015届攻读硕士学位研究生学位（毕业）论文布洛芬降解菌生长特性研究及降解基因筛选学科专业微生物学研究方向环境微生物研究生程珂珂指导教师卫亚红副教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌研宄生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切

2、后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：系卻功时间：年6月2日导师指导研宄生学位（毕业）论文的承诺指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于

3、规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研宄生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，必

4、须以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人）未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名：兹哥巧时间：X)丨S年g月2•日导师签名:时间：年g月I曰Classificationcode:Q

5、939Universitycode:10712UDC:579Postgraduatenumber:2012050980Confidentialitylevel:PublicityThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015THEGROWTHCHARACTERISTICSANDDEGRADATIONGENESCREENINGOFIBUPROFENDEGRADABLEBACTERIAMajor:MicrobiologyResearchfield:Environmentalm

6、icrobiologyNameofPostgraduate:ChengKekeAdviser:AssociateProf.WeiYahongDateofsubmission:May2015YanglingShaanxiChina布洛芬降解菌生长特性研究及降解基因筛选摘要布洛芬在为人类减轻疼痛的同时也带来一定的环境污染，为了缓解此环境问题，以筛选到的3株布洛芬降解菌为研究对象，进行布洛芬的微生物降解研究，以期为布洛芬污染的微生物修复提供理论与实践依据。将从西安污水处理厂水样分离到的3株以布洛芬为唯一碳源的降解细菌进行菌株鉴定与生

7、长特性研究，分别构建基因文库以筛选布洛芬降解基因，成功构建3株细菌的福斯质粒文库后筛选得到1株可以产生褐色邻苯二酚代谢物的阳性克隆菌株，再次构建该克隆菌株的突变体文库，筛选得到7株不再积累褐色代谢物的突变体菌株，分别对功能缺失克隆进行测序分析，初步确定布洛芬降解菌的降解相关基因。主要研究结果如下：（1）分别通过对3株布洛芬降解菌的显微形态学观察，生理生化特性实验，16SrDNA鉴定及构建系统发育树对其进行种属的鉴定，最终确定I-2为克雷伯氏菌属（Klebsiellasp），I-4为假单胞菌属（Pseudomonassp），I-

8、14为不动杆菌属(Acinetobacterbeijerinckii)。（2）分别通过生长特性实验对3株布洛芬降解菌进行最适生长条件的探索，结果显示3株菌的最适培养温度均为30℃，I-2，I-14最适pH为7，而I-4最佳pH是6，对于布洛芬底物浓度的耐受I-2最高，为100