学习经历对川硬皮肿腿蜂气味结合蛋白表达的影响

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1、分类号Ｓ７１８．７学号Ｓ２０１２３９０９四川巧业大学硕ｄｂ：学位论文学习经历对川硬皮肿腿蜂气味结合蛋白表达的影响■＼、陈春燕Ｖ．１．■’？．、、？．．－■’Ｉ１，：指导教师场伟教授．＇－■，＇．专业方向巧林保护研巧方向昆虫分子生伤学２０１５年６月ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇＬｅａｒｎｉｎｇｅｘｅｒｉｅｎｃｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｈｅ

2、ｅｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｏｄｏｒａｎｔｂｉｎｄｉｎｐｐｇｐｒｏｔｅｉｎｉｎ旅／ｍ？庇／Ｔｗａ沉ｅ片ｗａｎｅ＂地ＸｉａｏＢＣｈｅｎｃｈｕｎａｎｙｙＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＹａｎｇＷｅｉＭａｏｒｏｆＦｏｒｅｓｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｊＣｏｌｌｅｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙｇＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｈｅｎｇｄｕ，６１１１３０，Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｐ．民．ＣｈｉｎａＪｕｎｅ２０１５，ｉ论文独御性寅明本人郑重声明

3、：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何责献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：叛年如曰橡急关于论文使用授披的声明、本人完全了解四川农业大学有关保留使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被査阅和借

4、阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。□本论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。研究生签名：巧義知Ｖ片年ｆ月曰导师签名：月缸斗如户户摘要’川硬皮肿腿蜂（筑麻ｒｏ流／Ｔｗａ５７ｃ／ｚＭａｎｅｎ地！Ｘｉａｏ），属肿腿蜂科（Ｂｅｔｈｙｌｉｄａｅ）天牛况一／ｍ？旅ｍｏ）肿腿蜂属（，是种能寄生多种钻赃性害虫的天敌昆虫，具有重要的生物防治价值。昆虫通过感知空气中的挥发性气味物质指导其行为反应

5、，这包括两个重一二要方面：是寄主植物挥发出的多种气味物质组成的化学图谱，是昆虫具有与之相适应的结构和识别机制，只有对这两方面都进行了深入研究，才能更好地应用到害虫防治的实践中。近年来，国内对昆虫感受气味物质的行为化学模式的研究较多，但是昆虫气味结合蛋白及其与气味识别的关系研究较少，对寄生蜂的相关研究则更少。因此，我们利用Ｙ型行为仪测试不同日龄的川硬皮肿腿蜂经云斑天牛虫粪木屑混合物处理后的行为反应，研究川硬皮肿腿蜂对云斑天牛虫粪木屑挥发性气味的学习效应；根据已报道的管氏肿腿蜂（况ｋｍｉｅｍｗ巧Ｘｉａｏ

6、ｅｔＷｕ）气味结合蛋白的ｃＤＮＡ序ＲＴ－ＰＣ民法获ｃＤＮＡ列设计引物，利用得编码川硬皮肿腿蜂两种气味结合蛋白的片段，－并对其进行基因克隆，ＴｉｍｅＰＣＲ比较：利用ＳＹＢ民ＧｒｅｅｎＩ巧光染料法采用ＲｅａｌＣｔ值的相对定量法获得川硬皮肿腿蜂不同部位、不同日龄经历及未经历云斑天牛虫粪木屑的气味结合蛋白基因的转录表达谱，研究其基因表法规律，巧步探索川硬皮肿腿蜂学习效应对气味结合蛋白表达的影响，主要研究结果如下：１．不同日龄川硬皮肿腿蜂对云斑天牛虫粪木屑海合物的学习效应经历５斑天牛虫粪木屑絕合物气味处理

7、后的肿腿蜂与未经历气味处理的肿腿蜂相比，前者对该气味的选择率均得到提髙。川硬皮肿腿蜂在羽化和成虫初期（１、２日龄）对云斑天牛虫粪木屑混合物气味学习效应逐渐增强，在羽化后第２日学习效应￣最强，而在羽化后第４１０日学习效应减弱１２。，在羽化后第日学习效应又显著増强２．川硬皮肿腿蜂ＯＢＰ基因克隆及序列分析－ＯＢＰ－根据已经报道的管氏肿腿蜂Ｓｇｕａｌ和ＳｇｕａＯＢＰ２基因设计引物，克隆分析－ＯＢＰ－了编码川硬皮肿腿蜂气味结合蛋白Ｓｓｉｃｌ和ＳｓｉｃＯＢＰ２的ｃＤＮＡ（ＧｅｎＢａｎｋ序列号分别为：ＫＭ９２４４

8、３８和ＫＭ９２４４３９）。根据测序结果和结构分析表明，川硬皮脾腿－ＳｓｉｃＯＢＰｌ基因包含１个长为４０１ｂ的开放阁读框３３－ＯＢＰ２ｐ，编码１个氨基酸残基；Ｓｓｉｃｂ－基因包含１个长为４２０ｐ的开放阅读框，编码１３９个氨基酸残基。ＳｓｉｃＯＢＰｌ与