大叶补血草活性成分的研究

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1、分类号密级UDC编号硕士学位论文大叶补血草活性成分的研究池晓会（1218003）指导教师姓名谭成玉专业名称环境科学论文答辩日期2015年6月1日学位授予日期2015年6月ThesisfortheDegreeofMasterStudiesonBioactiveComponentsfromLimoniumgmeliniiSupervisor:ChengyuTanMasterCandidate:XiaohuiChiEnvironmentalScienceDalianOceanUniversityDalian,LiaoningProvince,PR

2、.ChinaJUNE2015摘要摘要本论文以新疆特色盐生植物——大叶补血草（Limoniumgmelinii）为研究对象，通过多种色谱分离纯化方法相结合，对其石油醚、乙酸乙酯和正丁醇浸膏进行了系统分离纯化，共分离得到10种化合物，通过理化性质分析、光谱数据分析等，鉴定了其中8种化合物，分别为杨梅素（C-1）、β-谷甾醇（C-2）、二氢杨梅素（C-3）、没食子酸（C-4）、杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷（C-5）、槲皮素（C-6）、胡萝卜苷（C-7）和芦丁（C-8），其中化合物C-3、C-6、C-7和C-8为首次从该植物中分离得到。考察了闪

3、式辅助萃取-热回流法提取制备大叶补血草总黄酮的工艺条件。热回流提取中以50%乙醇作为溶剂，料液比为1:70，闪式辅助萃取时间15min，热回流温度为90C。利用大孔吸附树脂进一步纯化总黄酮，筛选到AB-8型大孔吸附树脂对补血草总黄酮具有较好的吸附率和解吸率,其吸附率为62.6%，解析率为79.3%。考察了AB-8大孔吸附树脂对总黄酮的静态吸附曲线，并对溶剂浓度和溶剂用量进行了优化。建立了RP-HPLC同时测定大叶补血草中的四种黄酮醇类化合物——杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷、杨梅素、芦丁和槲皮素的方法。采用色谱柱KromasilC18柱

4、，甲醇-水-磷酸（40:60:0.4）作为流动相，265nm下进行检测，结果表明，该方法在检测条件下对四种化合物的分离具有精密度好、重现性高、稳定性好、平均加样回收率高等优点，可用于大叶补血草中四种黄酮醇的含量分析。对大叶补血草的提取物及总黄酮进行了体外清除自由基、抑制ACE活性以及对急性酒精性肝损伤活性肝脏保护作用实验。结果表明，大叶补血草总黄酮在浓度分别为50，100，200μg/mL时对DPPH具有一定的清除活性，其活性大小与浓度成剂量依赖关系，对OH的清除活性不强。乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水层萃取物在浓度为10

5、0mg/mL时具有相对较高的抑制ACE活性。对制备的总黄酮进行了急性酒精性肝损伤模型小鼠的肝脏影响实验，结果表明，总黄酮具有降低肝脏指数，降低肝组织中ALT、AST活力，提升SOD活力，减少MDA、LDH、TC和TG的含量，从而起到肝脏保护作用。其作用机制可能与总黄酮的抗氧化活性有关。关键词：大叶补血草；化学成分；含量分析；总黄酮工艺；活性研究IAbstractAbstractInthispaper,tenchemicalconstituteswereisolatedbyvariouschromatographicandrecrystall

6、izedmethodsfromLimoniumgmeliniiinXinjiang.OnthebasicofanalysisofNMRdataandmeasurementofphysico-chemicalcharacters,thestructuresof8compoundswereidentifiedasMyricetin(C-1),β-sitosterol(C-2),dihydromyricetin(C-3),gallicacid(C-4),myricetin-3-O-α-L-rhamnoside(C-5),quercetin(C-6

7、),daucosterol(C-7)andrutin(C-8).Amongthem,compundsC-3、C-6、C-7andC-8wereisolatedfromthisplantforthefirsttime.TogetthetotalflavonoidsfromLimoniumgmelinii,itwasextractedwith50%ethanolbyusingheatrefluxextractioncombinedwithflashextraction.Thebestconditionswereasfollows:materia

8、ltoliquidwas1:70g/mL,flashextractiontimewas15minutesandthetemperatureofheatrefluxextracti