大团囊虫草及其近缘种生物学研究

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1、分类号密级公开编号碩士蚵究嗲依儉式题目：大团蠹虫草及其近缘种生物学研究学院（所、中心）生命轴学学院专业名称植柏学研究生姓名张晓莹举号导师姓名职称教授年月论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不存在剽窃或抄袭行为。与作者一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文（含电子版），也可以釆用影印、缩印或其他复制手段保存论文，学校

2、有权公布论文的全部或部分内容，可以将论文用于查阅或借阅服务；学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查、社会监督或评奖；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务。内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）研究生签名：导师签名：攀日大团囊虫草及其近缘种生物学研究摘要大团囊虫草是线虫草科、弯颈霄属的真菌，是我国传统的药用真菌。由于野生资源稀缺，近年来国内外对其研究相对较少，缺少系统的生物学研究，其中无性阶段形态、人工培养基及菌株筛选、抗衰老和抗氧化方面的研究还未见报道，严重限制了它的深度开发与应

3、用。针对上述问题，本论文对大团囊虫草及其近缘种进行了较系统的生物学研究，包括大团囊虫草及其近缘种系统学研究，大团囊虫草菌丝体及其近缘种的化学成分测定，大团囊虫草菌丝体抗衰老和抗氧化作用研究。大团囊虫草及其近缘种系统学研究。在云南省大理州永平县金光寺自然保护区采集到寄生于大团囊菌的种新鲜野生虫草。根据它们的宏观和显微结构特征，将其分别鉴定为大团囊虫草、头状虫草和多头霉一种。从大团囊虫草子座和多头霉种菌核外壳分离得到了株纯菌株、将这个纯菌株与近缘种奇异虫草菌株编号：和膨大弯颈霉菌株编号：菌株的形态进行比较，发现与奇

4、异虫草菌株形态较为相似，而与膨大弯颈霉菌株则有明显区别，尤其是瓶梗形态，分离得到菌株的瓶梗为基部向顶部逐渐变细的形态，而膨大弯颈霉的瓶梗基部则明显膨大。通过分别测定野生虫草及菌株的序列，构建弯颈霉属个种、条序列的系统树，结果显示，所采集的大团囊虫草及分离得到的个菌株与上的大团囊虫草紧密聚为一枝，且遗传距离均为所采集的头状虫草则与上的头状虫草紧密聚为一枝，且遗传距离也为。基于序列的系统发育分析与形态学观察结果一致，确认采集到的种虫草分别为大团囊虫草和头状虫草，分离得到个菌株均为大团囊虫草菌。对株大团囊虫草菌株和来

5、自日本的菌株进行形态观察测量，并利用软件进行统计分析，结果发现，大团囊虫草菌在宏观和微观形态上均表现出一定的差异，其中色素的产生、分生孢子和瓶梗形态的差异都较为明显。、和在宏观形态上较为相似，且都会产生色素，通过微观形态观察后发现，和的形态更为相似，二者的瓶梗为基部向顶部逐渐变细的形态，的瓶梗基部则较二者而言有大团囊虫草及其近缘种生物学研究明显膨大现象，并且偶尔还会出现分隔。和在宏观形态上与其余个菌株有明显区别，且二者都不会产生色素，微观形态上，和的瓶梗均为柱形，另外，的各类型孢子大于其余菌株，而的各类型孢子的

6、大小变异大于其余菌株。总之，大团囊虫草菌株的形态变异较大。大团囊虫草及其近缘种的化学成分测定。对大团囊虫草及其近缘种奇异虫草、膨大弯颈霉、头状虫草的化学成分进行测定，其中大团囊虫草菌株的培养采用种培养基，即、大米、蚕蛹培养基。利用硫酸苯酚法测定虫草多糖，利用紫外分光光度计测定甘露醇、总皂苷、总黄酮、总三萜，利用法测定虫草核苷类。分析表明，大团囊虫草在不同培养基培养下的化学成分含量有一定差异，其中大米培养基培养菌丝体的生物量（瓶）、多糖（及多数核苷类成分（除肌苷和胸苷外）的含量最高。蚕蛹培养基培养菌丝体的黄酮类（

7、、皂苷类（、三萜类（物质的含量最高。培养基培养菌丝体的虫草酸（含量最高。另外，个大团囊虫草菌的化学成分含量也有一定差异，其中菌株的生物量瓶及虫草酸含量最高菌株的多糖（及总三蔽含量最高，且多数核苷类成分含量也较高；菌株的生物量（瓶）、总黄酮（、总三萜（及多数核苷类成分含量较高；菌株的总黄酮及总皂苷（含量均为最高；菌株的多糖（、总皂苷（、总三萜（〉及多数核苷类成分含量较高。大团囊虫草及其近缘种的化学成分含量也存在一定差异，头状虫草的虫草酸及总阜苷（含量最高；膨大弯颈霉的总黄酮（及总三萜（含量最高；奇艺虫草的多糖（含

8、量最高，且其多数核苷类成分含量较高；大团囊虫草菌株的脱氧尿苷含量（最高，而总皂苷、总三萜、脱氧腺苷最低。大团囊虫草菌丝体抗衰老与抗氧化研究。利用果蝇为模型动物，对菌株进行延长寿命实验，以清除自由基能力、羟自由基清除能力、总抗氧大团囊虫草及其近缘种生物学研究化能力为指标，测定菌株的体外抗氧化活性。结果表明，大团囊虫草菌株对果姆寿命具有很好的延长效果，并且随着样品浓度的增加而增加，浓度为时