堆肥中新菌的分离鉴定及其铬还原特性研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M120250574上海海洋大学硕士学位论文题目：堆肥中新菌的分离鉴定及其铬还原特性研究IsolationandIdentificationofNovelBacteriafromCompost英文题目：andTheirCr(VI)ReducingCharacteristics专业：食品工程研究方向：微生物姓名：崔晓文赵勇教授指导教师：周顺桂研究员二O一五年四月十七日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包

2、含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大

3、学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注王恒樑军事医学研究所教授主席王永杰上海海洋大学教授委员孙晓红上海海洋大学教授委员阎俊上海海洋大学助教秘书答辩地点图书馆608答辩日期2015.06.09上海海洋大学硕士学位论文堆肥中新菌的分离鉴定及其铬还原特性研究摘要微生物是地球上分布最为广泛的生命形式，其物种多样性非常丰富。据估计，目前人类发现的微生物物种仅占微生物物种总数的10%左右，大量的微生物物种还没有被发现。微生物广泛存在于人类的生活环境中，通过发现微生物新物种及其功能，为人类探究大自然奥秘和利用微生物造福人类提供更多的机会。铬作为工业生产中广泛应用的一种重金属，其六价

4、离子对细胞具有很高的毒性。传统治理铬污染的方式成本高、效果差，而微生物法治理铬污染作为一种新兴的方法，克服了上述缺点，提供了新的解决办法。目前人类已经发现了一些具有铬还原功能的微生物，但是大量尚未被发现的微生物物种资源吸引着人类去进行更多更深入的研究。本研究从两个不同采样来源的堆肥土壤中分离出两个疑似新菌，运用多相分T类学方法，对菌株进行了系统鉴定，并对得到的新菌GSS04进行了铬还原特性的研究。主要结论如下：TT（1）从大宝山矿区堆肥中分离得到了菌株GSS04。GSS04能形成直径为T1-2mm的浅黄色、圆形、表面光滑、微微向上隆起的不透明菌落。GSS04为兼性厌氧的革兰氏阳性菌

5、，在无氧条件下生长相对缓慢。菌体细胞宽度为0.8μm，T长度为2.6-3.0μm，有鞭毛，能产生椭圆的内生孢子。在LB液体培养基中，GSS04的生长温度范围为15-50℃，最适生长温度为30-37℃；生长pH范围为5.5-10.0，最适生长pH为7.0；可以在0-3%NaCl浓度范围内生长，在1.0%的盐浓度下生T长最好。GSS04的呼吸醌主要为甲基萘醌7（MK-7），主要脂肪酸为C15:0（42.9%）T和anteiso-C15:0（24.1%）。GSS04主要极性脂包括双磷脂酰甘油(DPG)、磷脂酰甲基乙醇胺(PME)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰乙醇胺(PE)以及三种未识别出的

6、磷TT脂和两种未知脂质。GSS04的DNAG+C含量为41.1mol%。GSS04在进化树中的位置支持其属于芽孢杆菌属的结论。在形态特征、生理生化特征和分子生物I上海海洋大学硕士学位论文T学特征数据的基础上，GSS04被认定为芽孢杆菌属的一个新种，命名为BacillusTdabaoshanensis。典型菌株GSS04保藏于中国典型培养物保藏中心（保藏号为TTCCTCCAB2013260）和韩国典型培养物保藏中心（保藏号为KCTC33191）。TT（2）从广东省东莞市堆肥中分离得到了菌株GSS05。GSS05能形成直径T为0.5-1mm的浅黄色、圆形、表面光滑、无隆起的不透明菌落。

7、GSS05为革兰氏阳性菌，菌体细胞宽度为0.3-0.8μm，长度为1.1-2.6μm，具有运动性，有周T生鞭毛，能产生椭圆的内生孢子。在LB液体培养基中，GSS05生长温度为15-50℃，最适生长温度为30-37℃，该菌能够在5.5-10.0的pH条件下生长，pH=7.5为其最佳生长Ph，可以在0-3%NaCl浓度范围内生长，在1.0%的盐浓度T下生长最好。生理鉴定结果表明，GSS05氧化酶实验呈现阳性，过氧化氢酶实T验为阴性。该菌可以将酪蛋白进行水解，可以产生D-岩