腐熟用枯草芽孢杆菌菌剂的研制

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1、中图分类号：Ｑ８巧密级：公开ＵＤ。６０６学校倾：１００８２＂…ｔ１．Ｉ誦，Ｐ心皆Ｗ＃净ＨＥＢ巨ＩＵＮＩＶＥＲＳｒｒｙＯＦＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤ下ＥＣＨＮＯＬＯＧ丫革硕±学位论文、却．重腐熱用枯草牙抱杆园园剂的研制胃＃＇＇；ｃ：ｍ．１＆、？Ｋ．＇论文作者：王玉丽＇—指导教师：赵国群教授企业指导教师：关军锋研究员—工程硕￣±申请学位类别Ｓ—学科、领撤生物工程巧在单位：生物科学与王程学院答辩日期：２０１５年５月河化科技大学学位论文原创性声明

2、本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品或成果。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：ｉ主ｗ指导教师签名：ｊ如ａ年ｆ月作曰年於月／曰ｊ河北科技大学学位论女版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权

3、河北科技大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。□保密，在解密后适用本授权书。＿＿年本学位论文属于保密。＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者签名；指导教师签名：４令呵？２ＷＪ年呼月＾曰心＇Ｊ年峡月曰ClassifiedIndex：Q819SecrecyRate：PublicizedUDC：606UniversityCode：10082HebeiUniversityofScienceandTechnologyDissertationfortheMas

4、terDegreeStudyonMicrobialAgentofBacillussubtilisforAnimalManurecompostingCandidate：WangYuliSupervisor:Prof.ZhaoGuoqunEnterpriseSupervisor：Prof.GuanJunfengAcademicDegreeApppliedfor：MasterofEngineeringSpeciality：BiologyEngineeringEmployer：SchoolofBiologicalScienceandEngineeringDateof

5、OralExamination:May,2015摘要腐熟菌剂主要是指针对畜禽粪便，植物残体以及一些生活废弃物等难分解的有机物进行处理而研究生产出的一类微生物菌剂，广泛应用农作物秸秆、畜禽粪便的资源化和无害化处理。枯草芽孢杆菌是在自然界广泛存在的一种好氧的产芽孢杆菌。它可以产生蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和半纤维素酶等酶，是农作物秸秆、畜禽粪便等有机物料腐熟菌剂的主要菌种之一。芽孢数和有效活菌数是腐熟菌剂质量的重要指标。生产成本也是微生物菌剂生产企业所关心的重要问题。本课题研究了枯草芽孢杆菌DK36的产芽孢条件，优化了发酵工艺。在此基础上，研究了菌剂的制备工艺。为

6、了降低生产成本，进行了以脱酚棉籽蛋白为氮源培养枯草芽孢杆菌DK36的研究。其主要研究结果如下：1）枯草芽孢杆菌DK36的产芽孢条件研究。当葡萄糖、蔗糖、果糖、可溶性淀粉、玉米粉、麸皮为碳源时，菌体生长良好。葡萄糖和蔗糖作碳源时均不产生芽孢。当麸皮作为碳源时，形成的芽孢最多。其次为玉米粉、可溶性淀粉。蛋白胨、酵母浸粉、大豆蛋白胨、豆饼粉、硝酸钾、硝酸钠、硝酸铵均可使菌体大量形成芽孢，2+2+其中大豆蛋白胨的效果最好。尿素抑制菌体生长和芽孢形成。添加Ca、Mg、+2+2+2+Na、Fe、Mn均可促进芽孢的形成，其中效果最明显的是硫酸锰。Cu对生长和形成芽孢均有很

7、大抑制作用。产芽孢最佳培养基：麸皮15.0g/L、大豆蛋白胨5.0g/L、硫酸锰0.1g/L、碳酸钙3.0g/L。最佳产芽孢发酵条件：培养温度30℃、转速9200r/min、接种为2%、培养基初始pH为7.0，芽孢数达3.6×10cfu/mL。2）脱酚棉籽蛋白培养枯草芽孢杆菌DK36的研究。棉籽蛋白作为氮源时，菌体生长良好。碳源的种类对产芽孢有显著影响。葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮均使菌体生长良好。但葡萄糖和蔗糖为碳源，菌体不形成芽孢，而玉米粉和麸皮可使菌2+2+2++体产生大量芽孢。添加Ca、Mn、Mg和K对芽孢形成有明显的促进作用，并且发现钾盐与镁盐、锰盐

8、、钙盐复合效果更佳。研究还发现，脱酚棉籽蛋白作为氮源