湖南省柑橘黄龙病调查及病菌遗传多样性分析

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2、诗教师Ｖ．＇＇；＇、？’－．；校外指诗教师周，涛…、＇，，ｔ；片ｒ：＾纪扣ｆＨｒ释＾喷弘扣知／巧姑却讀苗［’－＇－．，．学位类型全日制专业学位，／、／ｉ、－悚掉Ｃ；，；巧試這舞記：軒，＇＇’学科领域植物保护’＇研究方向；Ｖ；植物病理■．—為吉——’：機巧接．．．‘，．，．三：－了－‘＇、；＇Ｖ’．；．＇中：一、—誦＇心分类号密级公开ＬＪＤＣ单位代码１０５：３７巧月斋寮也夫缘全日制硕±专业学位论文湖南省巧橋黄龙病调查及

3、病菌遗传多样性分析ＳｕｒｖｅｙｏｆｉｎｆｅｃｔｅｄｒｅｉｏｎａｌａｎｄｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｇｇｙｏｆＣｉｔｒｕｓＨｕａｎｌｏｎｂｉｎｉｎＨｕｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅｇｇｇ研究生姓名董俊指导教胃易图永校外指导教师周涛学位类Ｍ全日制专化学位学科领域植物保护研究方向植物病理学．，，？论文答辩日期２０１５年６月９日答胃员会ｍ谭小平论义评阅人梁满中、肖启明、肖放化二０—五年六月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在指导教师指导下进行的研究工作及取得的研究．成

4、果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证一书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年（月日关于论文使用授权的说明：本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阀，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、、汇编学位论文。同意湖南农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表传播学位论文的全部

5、或部分内容，并同意将由此产生的收益捐赠给学校教育基金会用于发展研究生教育。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）＾／研究生签名：时间：＞／主年６月日马億．／校内指导教师签名：时间；年４月日＾：时间；１校外指导教师签名、＞Ｓ年ｔ月户日＼术．摘要摘要Ｃ一橄橘黄龙病（ｉｔｒｕｓＨｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ）能对批橘产业造成毁灭性的影响，其病原菌是种细菌，属于薄壁菌口、初皮部杆菌属。随着抽橘种植技术的大力推广和政府的扶持Ｗ及全球气候变暖，橄橘黄龙病的发生区域也在増多。为了了解巧橘黄龙病在我省的分布情况、传播特点、

6、种群差异，更好地建立批橘黄龙病防治示范区，本文对湖南省的零陵区、江华是、江永县、道县、宜章县、资兴市等２０多个县（市），［＾及江西省的大余县、福建省的泉州市的巧橘叶片疑似发病样品及巧橘木風进行检测，主要实验结果如下：１、对采集和送样的２２个县（市）２１６份样品进行检测、，结果显示祁州市北湖区邢州市汝城县、術州市永兴县等为相橘黄龙病新的疫区，确定湖南省岳阳市岳阳县和华容县的巧橘黄龙病是由于苗木的随意调运而引起的。了解了湖南地区巧橘黄龙病的蔓延趋势及湖南、江西、福建兰省的巧橘黄龙病发病情况。２、通过１６ＳｒＤＮＡ和Ｍ９４３巧序列

7、引物Ｏｌｉ／Ｏｂ和ＴＬ／ＴＲ进行ＰＣＲ扩増并测序，用系统发生软件ＭＥＧＡ５．０进行聚类分析。结果发现湖南省内的巧橘黄龙病病原菌的遗一传分化距离技小，江西議州市两个县的样品基本属于同个小种，福建泉州市的样品一单独为个小种。其遗传分化的规律主要取决于地域的分布，寄主植物品种的差异也一是造成遗传分化的个重要因素。由于Ｍ９４３１９为黄龙病病原菌亚洲种的特有基因片段。，因此能快速鉴定出病原菌是否为亚洲种３、通过改进的ＳＤＳ法提取单头巧橘木甄总ＤＮＡ，通过ＯＩ１／ＯＩ２和ＴＬ／ＴＲ两种引物对提取的总ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增一，与阳性对照保持致的样

8、品送样测序，可队陕速一鉴定其是否带有病原菌。这种