垃圾渗滤液内分泌干扰效应检测方法的建立与应用研究

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1、＾寸尚ｉ各义考ＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ博击学位论文ＤＯＣＴＯ民ＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ垃圾渗滤液内分泌干扰效应检测方法论文题目：的建立与应用研究Ａｎｉｎｔｅｇｒａｔｅｄａｐｐｒｏａｃｈｃｏｍｂｉｎｅｄｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｉｎｖｉｖｏｂｉｏａｓｓａｙｔｏａｓｓｅｓｓｔｈｅ央又题目：ｅｎｄｏｃｒｉｎｅｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇｅｆｅｃｔｓｏｆｒｅｆｉｉｓｅｌｅａｃｈａｔｅ作者：宫玉峰指导教师：汝少国教授田华副教授学位类别；全日制学术学位专业名称：

2、生态学研究方向：生态霉理学谨レ乂此文献给所有奋斗在理想么路的人。宫玉峰垃圾渗滤液内分泌干扰效应检测方法的建立与应用研究．＞〇／立互学位论文答辩日期：＾指导教师签字：答辩委员会成员签字：—餐成－％技尽ｙ斗ｊ独倒声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的，研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得｛１或其一他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我同１：作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说

3、明并表示谢意。／玄学位论文作者签名：签字日期；年立月曰—Ｌ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并￣，允许论文被查阅和借阅向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁蟲。本人授权学校可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印。同时授权中国科学技术信息、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）；学位论文作者签名：导师签字呵／签

4、字日期：五月曰：日签字日期ＪＳ年：年Ｓ月）＾Ｊ、＞．圾樓滤液内分泌干扰效应检测片法的述立与应用硏究垃圾渗滤液内分泌干扰效应检测方法的建立与应用研究摘要近年来，随着垃圾滲滤液污染水体事件的不断发生，垃圾渗滤液的生物毒性，特别是内分泌干扰作用受到了学术界的广泛关注。其中，研究较多的是垃圾渗滤液对生物体性腺轴ＨＰＧ轴的干扰化用，主要包括雌激素效应及雄激素效应（）。然而，目前已建立的垃圾渗滤液雌／雄激素效应检测方法主要利用的是化学分析或是体外生物实验方法，这些方法都不能有效评估渗滤液对生物体所产生的综合效－，并且容易产生假阴性的检测结果应，存

5、在定的缺陷与不足。因此，为了对垃圾渗滤液雌／雄激素效应检测方法进斤优化改进，本研究联合化学分析及体内生物实验构建了垃圾渗滤液雌／雄激素效应的检测方法，并在青岛市某生活垃圾综合处理厂中进行了应用研究－－。利用气象色谱质谱技术ＧＣＭＳ对渗滤液及其不（）同处理阶段出水中的环境雌激素巧Ｅｓ）进行了定量分析，并采用半静态毒性试验－方法，金鱼化句血浆卵黄原蛋白７（Ｖｔｇ）、血浆１９雌二醇巧２）及睾ｙ爾Ｔ、血浆卵泡雌激素巧ＳＨ及促黄体激素ＬＨ、性腺芳香化酶Ｐ４５０ａｒｏｍ基因（））（）（）表达水平为指标，辅金鱼生殖相关指标如性腺指数ＧＳ（Ｉ、精巢谷氨醜胺转移

6、酶ｙ－ＧＴＰ及精巢组织学结构，从分子水平、生化水平及组织水平构建了垃圾渗）滤液雌／雄激素效应检测的技术方法，探讨了垃圾渗滤液可能存在的雌／雄激素活性，虽。此外然在垃圾渗滤液中检测到了多种类型的甲状腺干扰物ＴＤＣｓ，但垃（）圾渗滤液暴露是否会对活体生物产生甲状腺干扰效应尚不清楚，缺乏相应的甲状腺干扰效应检测方法。因此，本研究在对垃圾渗滤液中常见ＴＤＣｓ进行定量检测的基础上，Ｗ血浆甲状腺激素（甲状腺素Ｔ４、兰贿甲腺原氨酸Ｔ３）为主要指标，从中央调控水平（血浆促甲状腺激素ＴＳＨ）、外周调控水平（肝脏及性腺兰种类型脱贿酶＾／八妃、姑基因表达、受－）体调控水

7、平性腺甲状腺激素受体从《１、／（嗦基因表达三个层次构建了垃圾滲滤液甲状腺干扰效应的）检测方法并进行了应用研究。本文主要研巧结果如下：１在２０１１年９月的研究中，化５％渗滤液暴露能够显（）著诱导雄性金鱼产生Ｖ－，并且降低雄性金鱼ＧＳＩ及性腺ＧＴＰ酶活力巧ｙ，表现出明显的帷激素活性。－ＭＳ利用ＧＣ技术在渗滤液及其不同处理阶段出水中共检测到４－／－４－辛基龄ＭＤ、（巧双酷Ａ巧ＰＡ）、邻苯二甲酸二己醋（ＤＥＰ）、邻苯：：：甲酸二正下醋（ＤｎＢ巧及邻苯二甲Ｉ＇巧圾凌化巧内分泌干扰效