不同产地栽培黄芪药材的质量评价研究

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1、分类号：单位代码：１０４４１密级：学号：２０１２０２１巧：！：；；？立系中舊爲文章、！Ｊ＾、统招颐±猴义＾：；＾最中支题目：不同产地栽培黄麟材的质量评麵究Ｓ：ＱｕａｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎＳｔｕｄｙｏｎＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎ＾＾ＥｋＣｕｌｔｉｖａｔｅｄＡｓｔｒａａｌｉＲａｄ＇；，＊ｉｘｆｈ）ｍ耐，ｇ１＾－議１＾１；７Ｓｉ申请人姓名刘德丽入学年月２０１２年９月学科专业中药学指导教师李峰学位类型医学科学学位．、、２０巧年３月１５曰Ｉ？，

2、Ｊ原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立完成的，文中除注明引用的内容外，不包含任何其他已经发表的科研成果。对本文研究做出重要贡献者１，均已在文中＾明确方式表明。本声明的法律责：任完全由自己承担。论文作者签名如德而导师答名日＿＾关于学位论文使用授权的声巧本人完全了解山东中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权山东中医药大学可［＾将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印

3、或其他复印手段保存。学位论文和汇编本（密应遵定）保密论文在解后守此规论义作者篇名刮德兩导师豁名刖滅瓜／文提要目的：比较评价不同产地栽培黄芪药材的质量，初步筛选适合当地栽培的优良品种；建立用于黄芪药材质量评价的化学指纹图谱和生物指纹图谱，为黄芪药材质量评价提供科学依据。方法：将采自全国9个不同产地的12种栽培黄芪药材，种植在同一块试验田中，在相同的土壤、气候、水肥、田间管理等种植条件下进行栽培和实验研究。按照2010年版《中国药典》方法对收获的不同产地栽培黄芪药材进行鉴别、检查及化学成分含量测定；采用单因素考察法和正交实验法，优化水提醇沉

4、制备黄芪多糖的工艺条件，并测定供试药材中粗多糖的含量；采用灰色关联度分析法对不同产地栽培黄芪药材的化学质量进行综合评价；运用高效液相色谱法、紫外谱线组法、蛋白质聚丙酰胺凝胶电泳技术（PAGE）建立黄芪药材的化学指纹图谱和生物指纹图谱；运用随机扩增的多态性DNA技术（RAPD）考察黄芪药材的遗传多样性。结果：优选出黄芪多糖的最佳提取工艺条件：料液比1:20；回流提取3次，每次50min；醇沉浓度70%。经灰色关联度分析法评价得到的黄芪药材化学质量优劣顺序为：内蒙赤峰＞安徽亳州＞河北保定＞陕西商洛＞安国A＞安国B＞河北唐山＞辽宁义县＞安国C＞安国D＞陕西洛

5、南＞河南卢氏，其中前三者的关联度均大于0.50。建立了黄芪药材四种提取溶剂的紫外光谱图，结果显示不栽培品种黄芪药材的紫外谱线组图非常相似，共有特征峰明显，表明其主要物质群是相同或类似的。建立了黄芪药材HPLC-UV指纹图谱，标定了17个共有峰，且共有峰面积均占总峰面积的90%以上。建立了黄芪药材PAGE指纹图谱，获得12条清晰度高、重现性好的共有带。利用PCR-RAPD技术从18对随机引物中筛选出3对用于多态性分析，3对引物共扩增获得27条谱带，多态性条带26条，多态条带百分率为96.3%，一定程度上说明12批供试药材具有较丰富的遗传多样性。结论：12

6、批药材的各项指标均符合药典规定，不同产地栽培黄芪药材的化学成分（毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷、黄芪多糖）含量差异较大。来自内蒙赤峰、安徽亳州、河北保定的栽培黄芪药材化学质量较好，应对其进行更加全面的品种比较试验。12批药材具有较丰富的遗传多样性；建立的HPLC-UV指纹图谱、紫外谱线组图、PAGE指纹图谱可为黄芪药材的鉴别和质量控制提供科学依据。关键词黄芪；质量评价；指纹图谱。QualityEvaluationStudyonCultivatedAstragaliRadixfromdifferentareasSpeciality:traditionalC

7、hinesepharmacologyAuthor:LiuDeliTutor:Prof.LiFengAbstractObjective:TocomparethechemicalqualityofdifferentcultivarsAstragalusherbs;ToestablishthechemicalfingerprintsandbiologicalfingerprintsonASTRAGALIRADIX.Methods:12kindsofcultivatedRadixAstragalicollectedfrom9differentareas,pla

8、ntedinthesameblocktestTanaka,soil,climate,water