‘凤丹’牡丹种子内源抑制物质的初步研究

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1、分类号：S685.11单位代码：10193密级：公开学号：2012052硕士学位论文‘凤丹’牡丹种子内源抑制物质的初步研究PreliminaryStudyontheEndogensisInhibitorySubstanceofPaeoniaostii‘Fengdan’.作者姓名：丁言学位类别：农学硕士专业名称：园林植物与观赏园艺研究方向：园林植物种质资源与栽培生理生态指导教师：郭太君教授所在学院：园艺学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注

2、和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交

3、论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日导师签名：签字日期：年月日摘要‘凤丹’（Paeoniaostii‘Fengdan’）产于安徽铜陵凤凰山一带，是药用牡丹中的稀有珍品，为

4、四大名药之首。‘凤丹’主要采用种子繁殖,结籽周期长达6年，种子又具有很长的休眠期，下种至幼苗出土，一般需8个月，多者达20几个月，严重限制了这一传统中药的扩种生产。因此，对生活周期中关键阶段的种子萌发行为的认识，是‘凤丹’生物学特性研究中的重要内容。本文以‘凤丹’种子为材料，通过种子种皮透性、种子不同部位的浸提液生物测定、种子内源抑制物质生物测定、种子中内源抑制物质的分离与鉴别及几种单体物质抑制活性测定的研究，得到了以下结论：1.‘凤丹’牡丹种子的休眠特性。利用当年采摘种子经MS组织培养未发现有萌发现象；解剖观察显示种胚结构完整，

5、但种胚体积小，多包埋于胚乳之中；需要生理后熟才能萌发；种子生活力较强，浸泡54h后的完整种子和刺破种皮种子均可达到吸水饱和状态；种子浸提液显著抑制白菜种子萌发。表明‘凤丹’牡丹种子休眠与生理后熟和含有萌发抑制物质有关，与种皮障碍无关。2.利用乙醚、乙酸乙酯、甲醇、石油醚和水为浸提剂得到种皮、胚乳和种胚的相应浸提物，对白菜种子发芽率和幼苗生长等均有不同程度的抑制作用。抑制作用由大到小的表现为：根长＞苗高和发芽率。种子不同部位浸提液抑制程度为胚乳＞种皮＞种胚。不同浸提剂浸提物的抑制作用为乙醚浸提物最大，石油醚最小；乙酸乙酯、甲醇和水浸

6、提物的抑制程度因浸提部位和测定项目的不同而不尽相同。3.采用系统溶剂分离法，利用乙醚、乙酸乙酯、甲醇和石油醚为浸提剂得到种皮、胚乳和种胚的相应浸提物，经气谱-质谱联用仪分析（GC-MS），定性定量检测到43种有机化合物，按化学结构可分为12类。其中，不同浸提剂中甲醇浸提液最多为10类32种有机化合物，分别占类别和有机化合物数量的83.33%和74.42%；种子不同部位中胚乳浸提液最多为11类37种有机化合物分别占类别和有机化合物数量的91.67%和86.05%；有机化合物的数量以酯类最多为11种占总数的25.81%、酮类和有机酸类

7、各8种，各占18.60%。单体有机化合物相对含量以有机酸类最高23.19%（种胚甲醇相）～95.19%（种胚甲醇相），其次是酮类和醛类。4.采用模拟研究方法，根据种子浸提液相对含量较高的有机化合物分布特点，选择1,3-二羟基丙酮、羟基丙酮、糠醛、苯酚、乙酸和甲酸6种标准有机化合物，进行抑制活性测定研究结果表明，这些有机化合物在浓度为1～10μl/L时，对白菜种子发芽既有极显著的抑制效果，抑制效果由弱到强的顺序是：羟基丙酮、苯酚、1,3-二羟基丙酮、糠醛、乙酸和甲酸作用均随着抑制物浓度的增大而逐渐增强。对根长生长的影响与发芽的抑制作

8、用表现有所不同，1,3-二羟基丙酮（1～10μl/L）、羟基丙酮和糠醛（1μl/L）处理在较低浓度时有促进作用，高浓度处理表现极显著的抑制作用；其他有机化合物在1μl/L处理极显著地抑制根长生长，但较高浓度处理之间差异多不明显。关键词：‘凤丹’种子