金龟子绿僵菌的胞外酶与毒力相关性及应用技术研究

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1、AGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI硕士学位（毕业）论文金龟子绿僵菌的胞外酶与毒力相关性及应用技术研究学位申请人：李保国指导教师：李瑞军副教授学科专业：农业昆虫与害虫防治学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月二曰独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得河北农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本

2、研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：ws年/月<日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名导师签名签字日期：年签字曰期：么0/5年(月<曰学位论文作者毕业后去向:：匸作单位由

3、K-t«:通讯地址:分类号：S435单位代码：10086密级：公开学号：2012306金龟子绿僵菌的胞外酶与毒力相关性及应用技术研究CorrelationbetweenExtracellularEnzymeActivityofMetarhiziumanisopliaeandVirulenceandthestudyofapplicationTechnology学位申请人：李保国指导教师：李瑞军副教授学科专业：农业昆虫与害虫防治学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月二日摘要对实验室筛选保存的金龟子绿

4、僵菌菌株M11-8-7、M7-5-7、M7-10、M6-448、M8-5-83和M8-6-291，利用Folin-酚试剂法测定了蛋白酶活性、利用DNS法测定了几丁质酶活性、利用酸碱滴定的方法测定了脂肪酶活性；以黄粉虫作为标准试虫对其进行了毒力的测定。通过对毒力和胞外酶的活性之间的相关性，发现胞外蛋白酶活性和毒力之间存在较高线性关系其方程为y=47.79-12.19x，R²=0.8978，但是几丁质酶和脂肪酶的活性和毒力之间并没有线性关系。研究筛选出M11-8-7和M7-10为酶活性高且毒力强的菌株。通过调整发酵中蒸馏水的

5、比例，选择出致病性高、发酵效果好，且不易污染的金龟子绿僵菌M11-8-7菌株，并进行了田间应用试验。试验结果显示4500亿孢子/亩金龟子绿僵菌对桃小食心虫有着良好的致死效果。5万亿孢子/亩和10万亿孢子/亩防治花生蛴螬相对于空白对照的增产效果分别为32.98%和36.8%，防虫效果分别为56.25%和87.5%，防治效果分别为52.08%和76.77%。在田间施用动物粪肥后对金龟子绿僵菌有着一定的影响，加鸡粪和羊粪的处理使得绿僵菌防治效果不明显，但是加牛粪和清水对照处理中绿僵菌防治效果分别为66.08%和74.69%。关

6、键词：金龟子绿僵菌；胞外酶；毒力；防效CorrelationbetweenExtracellularEnzymeActivityofMetarhiziumanisopliaeandVirulenceandthestudyofapplicationTechnologyAuthor:LiBaoguoSupervisor:LiRuijunMajor:AgricultureinsectandpestcontrolAbstractTheextracellularproteaseactivity,chitinaseactivity,

7、lipaseactivityof6MetarhiziumanisopliaeandM11-8-7、M7-5-7、M7-10、M6-448、M8-5-83andM8-6-291，itscorrelationwiththetoxicityofTenebriomolitorL.theFolin-phenolReagentmethod，DNSmethodandAcid-BaseTitrationmethodwereanalyzed.Theresultsshowedthattherewasanobviousdifferencein

8、productionofextracellarproteaseamongdifferentstrainsandtherewasanobviouslinercorrelationbetweenextracellularproteaseactivityandvirulence.Theequationisy=47.79-1