解淀粉芽孢杆菌b15的有效抑菌成分的研究

《解淀粉芽孢杆菌b15的有效抑菌成分的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、硕士研究生学位论文新疆大学论文题目(中文):解淀粉芽孢杆菌B15的有效抑菌成分的研究论文题目(英文):ResearchOfActiveIngredientProducedByBacillusamyloliquefaciensB15研究生姓名:朱弘元学科、专业:食品科学研究方向:食品加工技术导师姓名职称:康健副教授王德良教授郭聃洋博士论文答辩日期2015年5月20日学位授予日期2015年月日MagisterialThesisMasterDegreeCandidate:ZHU-HongyuanSupervisor:Prof.KANGJianPr

2、of.WANG-DeliangProf.GUO-DanyangCollegeofLifeScienceandTechnology,XinjiangUniversityMay,2015I新疆大学硕士研究生学位论文解淀粉芽孢杆菌B15的有效抑菌成分的研究摘要葡萄病害是影响我国葡萄种植业的主要难题之一，每年都会带来不同的损失。根据统计,我国葡萄生产每年因葡萄病害造成的损失约在30%以上。解淀粉芽孢杆菌其产抑菌脂肽分子量较小，结构稳定。研究表明其具有良好的抑制细菌、真菌性能和表面活性，是一种不可多得的新型抗生素。在医药、食品、日用品等行业有很大的潜

3、力。解淀粉芽孢杆菌是第一批通过美国食品和药物管理局（FDA）安全认证的菌种，在国内农业部发行的微生物肥料生物安全技术通用准则（NY-1009-2006）也是免检菌种。本课题组从葡萄表皮分离获得的一株具有明显抑制霉菌作用的细菌，命名为菌株B15，通过平板观察，16SrDNA，常规生理生化试验，gyrB基因测序鉴定菌种为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens），初步判断其抑菌成分为脂肽类物质。本课题对脂肽的提取方法、脂肽物质的类型结构进行研究，并进行定量分析，最后对各组分的抑菌效果进行研究，为开发生物农药奠定良好的基

4、础。主要研究内容如下：1通过排油圈实验和原位酸水解—薄层层析，基本确定解淀粉芽孢杆菌B15的产物为脂肽类物质。通过分光光度计法比较解淀粉芽孢杆菌B15产脂肽三种不同提取方式发现酸沉淀法和硫酸铵沉淀法提取率均高于直接用甲醇提取，而硫酸铵沉淀法耗时较长，后续纯化处理需要增加脱盐步骤，增加了成本，因此酸沉法是最适合提取脂肽的方法。2通过基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)对发酵产物和脂肽粗提物进行鉴定，发现[M+H]+的m/z在1065.5、1079.6、1489.5、1534.6和1682.5。经酸沉淀后得到的脂肽粗提液过

5、SephadexLH-20层析柱所得层析图共有3个峰，经活性检测发现其中一个峰peak1具有抑制葡萄灰霉活性。peak1进一步通过制备液相的分离得到了12种组分，其中6种有抑菌效果。三种组分II新疆大学硕士研究生学位论文是C14-16iturinA，另外三种组分为C15-18fengycin。对三种iturinA和fengycin混合物抑菌性进行研究，发现iturinA具有抑制酵母的能力，且其抑菌性与其脂肪链长度有关，其长度越长，抑制葡萄灰菌和酵母生长的能力就越强。3建立三种脂肽iturinA、surfactin和fengycin的液相色谱

6、检测方法。在此基础上研究了发酵过程中发酵液脂肽浓度与抑菌性，发现surfactin和fengycin浓度变化与抑菌性趋势基本一致，主要原因有两个，一是Fengycin是主要的霉菌抑菌物质，二是surfactin能增强fengycin的抑菌性能。4最后研究了解淀粉芽孢杆菌B15产脂肽生物特性，其最小抑菌浓度(MIC)是17mg/L。温度、酶和pH2-10处理对脂肽抑菌没有太大影响，pH大于12时，脂肽抑菌活性有较大损失。用荧光显微镜观察脂肽对葡萄灰霉菌丝体的影响，脂肽处理过的葡萄灰霉菌丝体膨胀，数量减少，并且顶端出现明显膨大。关键词：脂肽;i

7、turinA;fengycin;surfactin;抑菌性III新疆大学硕士研究生学位论文AbstractGrapediseaseisoneofthemostimportantproblemsinwineindustryinChina,causingdifferentdegreesoflosseveryyear.Accordingtostatistics，thelossofwineindustryinChinaeachyearcausedbygrapediseasesisabout30%above.Thelipopeptideisofsma

8、llmolecularweight,stablestructure.Researchshowsthatlipopeptidehassurfaceactivity,antibact