牛血清白蛋白在两水相体系中分配特性的研究

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1、南昌大学硕士学位论文牛血清白蛋白在两水相体系中分配特性的研究姓名：郑楠申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：朱建航20070613摘要本文介绍了两水相的性质特点及其萃取原理，归纳了物质在两水相体系中分配的影响因素，同时对两水相萃取技术的国内外研究现状以及所存在的问题进行了总结。本文以应用广泛，研究成熟，获取容易以及具有优良热稳定性的牛血清白蛋白为研究材料，考察了PEG／dextraa、PEG-C2H50H一(NH4hS04组合有机溶剂、PEG／Dex-OLL-Ac两水相体系对其分配特性的影响。在PEG／dextran两水相体系中，研究了由四种不同分子量的PEG与d

2、extran所构成体系的相图，同时考察PEG的分子量，聚合物浓度以及所加入中性盐的种类与浓度、体系pH值、有机溶剂、表面活性剂诸因素对BSA分配特性的影响。实验结果表明，在PEG60009％-dextran10％的双水相体系中，当NaCl浓度为O．2mol／L，异丙醇含量为5％，且体系pH=7．0(其中磷酸盐浓度为0．01real／L)时，BSA(pI=7．O)可获得较小的分配系数，其值为K=0．0116，该条件即为最佳操作条件。在PEG．C2H50H-(NH4)2S04组合有机溶剂两水相体系中，研究了c2H50H浓度、PEG分子量、NaCl浓度以及pH值对BSA分配

3、特性的影响。实验结果表明，与PEG／(NH4)2S04体系相比，BSA在该体系中的分配系数显著降低，同时分配也比较稳定。由两种寡聚L一乳酸(OLL)接枝葡聚糖的工艺路线得到Dcx-OLL-Ac、Dex-OLL-MEE两种寡聚乳酸改性葡聚糖产物。选用Dex．OLL．Ac与PEG-6000构造两水相体系，绘制了该体系的相图。发现PEG／Dex-OLL-Ac体系的相图符合一般聚合物／聚合物两水相的成相规律且与PEG／Dcx体系的相图相比，前者分相临界点组成浓度较后者低。实验结果表明，随着PEG分子量和浓度的增大，BSA的分配系数减小。在pH值的影响下，等电点处(pI=7．O

4、)分配系数最小。在对各相同影响因素的考察中，BSA在该体系中的分配系数均较PEG／Dex体系有较大降低。关键词：两水相体系：牛血清白蛋白；分配系数；寡聚乳酸；接枝改性ABSTRACTCharacteristicsoftheaqueoustwo-phaseanditsextractionprinciplew哪introduced．Areviewwaggivenoninfluencefactorofmolecules’partition,especiallyondomesticandinternationalresearch．Bovme∞lallnalbuminwhich

5、haswideapplication,matureresoarch,excelentheatstabilityandacquireeasilywasstudiedasresearchmaterialbyreviewingitspartitionpropertiesinPEG／dextransystem,PEG-C2HsOH-(NI-h)2S04combinedorganicsolventsystemandPEG，D甑一OLL-Acsystem．ThephasediagramwhichformedbyfourmolecularweightofPEGanddextrana

6、r；estudied,atthesanletime,neinfluenceofmolecularweightofPEGphasecompositionsconcentration,neutralsaltspeciesandconcentration,pHvalues，organicsolvemandsurfactantonthepartitionpropertiesofBSAwasinvestigatedinPEG／dextranaqueoustwo-phasesystem．ItwasshownthatthepartitioncoefficientofBSAwasth

7、eleastwhenthesystemisPEG60009％-dextran10％、ⅣithpHvaluesandNaClconcentrationwere7．0andO．2mol／L(phosphateconcentrationWaSO．01mol／L)．andthevaluewasO．0116．Thisconditionwasthebestoperationcondition．neinfluenceofCzHsOHconcentration,molecularweightofPEGNaCIconcentrationandpHvaluesonthe