黄河裸裂尻鱼肌肉生长抑制素基因克隆及其表达特征研究

《黄河裸裂尻鱼肌肉生长抑制素基因克隆及其表达特征研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：密级：UDC：编号：201310090502105硕士学位论文黄河裸裂尻鱼肌肉生长抑制素基因克隆及其表达特征研究cDNACloningandExpressionPatternofMyostatinGenefromSchizopygopsispylzovi指导教师：祁得林教授张辉教授申请人姓名：晁燕学科专业名称：动物营养与饲料科学研究方向：单胃动物营养培养单位：青海大学农牧学院二〇一三年五月QinghaiUniversityMasterDissertationcDNACloningandExp

2、ressionPatternofMyostatinGenefromSchizopygopsispylzoviSupervisor:Prof.De-linQiandHuiZhangCandidate:YanChaoAcademicMajorApplidedfor:AnimalNutritionandFeedScienceSpecificMajor:College(Department):AgricultureandAnimalHusbandryCollegeJune,2013独创性声明本人声明所呈交的

3、学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权青海大学大学可以将本学位论文的全部或部分内容

4、编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于：保密□不保密□（请在相应方框内打―√‖），在_____年解密后适用本授权书。学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日I主要符号对照表MSTN肌肉生长抑制素(myostatin)GDF-8生长分化因子8（growthdifferentiationfactor8）TGF-β转化生长因子β（transforminggrowthfactorbeta）INH抑制素（inhibin）ACT活化素（acti

5、vin）BMP骨成形蛋白（bonemorphogeneticprotein）MIS米勒抑制物（mullerianinhibitingsubstance）AMH抗米勒激素（antimullerianhormone）GDNF胶质细胞系来源的神经营养因子（glialcellline-derivedneurotrophicfactor）MyoD成肌分化抗原（MyogenicDifferentiationAntigen）Mck肌肉肌酸激酶RNAiRNA干扰LRH促黄体素释放激素类似物PG脑垂体HCG鱼用绒毛膜

6、促性腺激素DOM马来酸地欧酮DEPC焦碳酸二乙酯GAPDH甘油醛-3-磷酸脱氢酶ORF开放阅读框IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳I青海大学硕士学位论文摘要摘要肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是转化生长因子β(TGF-β)超家族中的一个新成员，对骨骼肌的发育和生长具有负调控作用。MSTN基因的敲除、沉默或抑制表达将引起动物肌细胞增生和肌纤维的肥大，从而增加动物肌肉产量。黄河裸裂尻鱼是裂腹鱼亚科鱼类的代表种，在青藏高原淡水生态系统的食物链中具有重要的地

7、位。但是，同裂腹鱼亚科鱼类一样，黄河裸裂尻鱼固有的生物学特性，如生长期短、生长缓慢、性成熟迟、繁殖力低等，极大地限制了该种群的发展。本研究采用RT-PCR、5'-RACE和3'-RACE法获得黄河裸裂尻鱼MSTN基因全长cDNA序列，并分析了其序列特征；采用半定量RT-PCR和Real-TimePCR检测了MSTN基因的组织表达特异性和胚胎发育阶段的表达特征；同时，构建了肌肉生长抑制素成熟肽序列的原核表达载体并进行表达。主要研究结果如下：1、黄河裸裂尻鱼受精卵在水温8.6～14.5℃，经11天孵化破

8、膜，孵化积温为158.2℃·d。与裂腹鱼亚科的其他鱼类相比较，黄河裸裂尻鱼的胚胎发育相对较慢。2、黄河裸裂尻鱼MSTN基因全长cDNA序列为2180bp，其开放阅读框长1128bp，编码375个氨基酸。5'-端非翻译区长76bp，3'-端非翻译区长976bp，包括3'-端polyA尾和上游加尾信号序列(ATAAA)。在其N末端含有一个22个氨基酸组成的信号肽序列。3、黄河裸裂尻鱼MSTN基因与其他脊椎动物具有相似的基因结构，包括2个内含子和3个外显子。4、黄河裸裂尻鱼