杨树茎木质素rnai调控及糖化特性分析

《杨树茎木质素rnai调控及糖化特性分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号S722密级公开UDC学位论文杨树茎木质素的RNAi调控及糖化特性分析SaccharificationpropertyofpoplarstemswithmodifiedligninbyRNAitechnique杨少宗指导教师姓名卢孟柱研究员申请学位级别博士专业名称林木遗传育种研究方向树木性状的分子基础论文提交日期2010年6月论文答辩日期2010年7月学位授予日期2010年7月答辩委员会主席评阅人北京·中国林业科学研究院万方数据学位论文杨树茎木质素的RNAi调控及糖化特性分析学位论文作者杨少

2、宗指导教师姓名卢孟柱研究员申请学位级别博士专业名称林木遗传育种研究方向树木性状的分子基础论文答辩日期2010年7月5日中国·北京万方数据DissertationfortheDegreeSaccharificationpropertyofpoplarstemswithmodifiedligninbyRNAitechniqueCandidate:Shao-zongYangSupervisor:Dr.Meng-ZhuLuAcademicDegreeAppliedfor:Ph.DForestTreeGen

3、eticsandSpeciality:BreedingDateofDefence:2010-07Degree-Conferring-Institution:ChineseAcademyofForestry万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献

4、均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定，中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名：年月日年月日学位论文作者毕业联系方式工作单位：联

5、系电话：电子邮件：通讯地址、邮编：万方数据摘要随着人们对环境质量和生活品质的重视以及保障能源安全的需求，生物质能源越来越受到公众和科学界的关注。考虑到生物柴油生产的高成本，生物乙醇成为全球最广泛利用的生物燃料。但由于目前生产生物乙醇的原料主要来自于谷物等粮食作物，由此牵涉到到全球粮价上涨和粮食恐慌，加之其有限的能源产量，使得通过粮食发酵生产燃料乙醇的规模化发展受到限制。在保证粮食安全的前提下解决能源危机问题，必然聚焦于林木生物质能源。木质纤维素是地球上数量最大的一种可再生资源，发展经济有效而环境友

6、好的木质纤维素燃料乙醇技术，已成为世界生物能源科技发展的趋势。针对我国国情，发展以木质纤维生物转化乙醇为重点的生物能源技术，建立以能源林业为依托的原料保障模式，可以实现“不与人争粮”、“不与粮争地”的目的，兼得经济、生态、环保、社会多重效益。作为木本模式植物的杨树是全球广泛栽培的重要造林树种之一，我国杨树资源丰富，是世界上人工林面积最大的国家。杨树分布广、实用性强、无性繁殖能力强，加之其速生丰产、遗传背景清楚等优势，无可争议地成为林木生物质能源研究的首选。林木生物质能源发展面临的最大技术难题是木质

7、纤维素的水解。由于木质素与纤维素的紧密结合和对其保护作用是导致纤维素资源利用的主要障碍。降低木质素含量或改变其结构，将有利于纤维素的解聚和糖转化效率的提高。本研究根据前人研究成果，选定毛白杨香豆酰莽草酸/奎宁酸羟化酶C3H、肉桂酸-4-羟基化酶C4H和羟基肉桂酰辅酶A：莽草酸/奎尼酸羟基肉桂酰转移酶HCT基因为调控目标，通过RT-PCR的方法得到毛白杨C3H1、C4H1、HCT1和HCQ3基因的cDNA全长序列，C3H1基因的cDNA完整的开放读码框（ORF）共编码508个氨基酸，HCT1编码43

8、2个氨基酸，HCQ3编码431个氨基酸，C4H1基因编码505个氨基酸。依此为基础构建了毛白杨C3H1、C4H1、HCT1和HCQ3基因的RNAi抑制表达载体pBIRNAi-C3H1R-i-C3H1L、pBIRNAi-C4H1R-i-C4H1L、pBIRNAi-HCT1R-i-HCT1L和pBIRNAi-HCQ3R-i-HCQ3L。进一步利用Gateway技术和已构建的RNAi抑制表达载体，构建了含有毛白杨C3H1、C4H1、HCT1和HCQ3基因多基因不同组合发夹结构的共15个R