组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白的影响及可能机制

《组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白的影响及可能机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、上海交通大学硕士学位论文组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白的影响及可能机制硕士研究生：王飞学号：1107219264导师：李焰生教授申请学位：医学硕士学科：神经病学所在单位：仁济医院答辩日期：2013年4月授予学位单位：上海交通大学资助基金：国家自然科学基金青年项目（编号：81000538）研究方向：神经变性疾病的基础与临床研究万方数据DissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityfortheDegreeofMasterTHE

2、EFFECTSOFHISTONEDEACETYLASE6ONα-SYNUCLEINANDTHEPOSSIBLEMECHANISMSINCELLMODELOFPARKINSON'SDISEASECandidate：FeiWangStudentID:1107219264Supervisor：Prof.YanshengLiAcademicDegreeAppliedfor：MasterofMedicineSpeciality：NeurologyAffiliation：RenjiHospitalDateo

3、fDefence：April,2013Degree-Conferring-Institution：ShanghaiJiaoTongUniversity万方数据万方数据万方数据上海交通大学硕士学位论文组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白的影响及可能机制摘要背景:α-突触核蛋白异常聚集在帕金森病（Parkinson'sdisease，PD）发病中扮演重要角色，探讨影响α-突触核蛋白的核心因子对于探索PD新型治疗方法具有重要意义。已有研究显示在多种神经变性疾病模型中，组蛋白去乙酰化酶6

4、（Histonedeacetylase6，HDAC6）可通过多条途径促进异常蛋白质的降解；但另有研究显示HDAC6在部分神经系统疾病中与诱发线粒体凋亡通路有关。而关于HDAC6在PD发病中的确切作用及其机制，目前尚不明确。目的:构建PD细胞模型，研究调节HDAC6水平对α-突触核蛋白异常聚集的影响及其可能机制。方法:将野生型pcDNA3.1（+）-α-突触核蛋白真核表达质粒稳定转入SK-N-SH细胞，并加入蛋白酶体抑制剂lactacystin，制成蛋白质异常聚集的PD模型；通过siRNA转染技术

5、干扰HDAC6表达或pEGFP-HDAC6转染使其过表达后，使用噻唑蓝比色法检测细胞存活率，蛋白免疫印迹法检测α-突触核蛋白寡聚体、热休克蛋白（Heatshockprotein，HSP）27和HSP70的表达，使用免疫荧光染色检测包涵体水平。结果:PD模型组较对照组细胞存活率下降、α-突触核蛋白寡聚体水平升高、出现包涵体、HSP27和HSP70表达水平升高；预先干扰HDAC6表达的PD模型细胞存活率进一步下降、寡聚体水平进一步升万方数据上海交通大学硕士学位论文高、包涵体数量减少、HSP27和HS

6、P70表达水平降低；而预先使HDAC6过表达的PD模型细胞存活率升高、寡聚体水平减少、包涵体数量轻度增多、HSP27和HSP70表达水平升高。上述差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:HDAC6在α-突触核蛋白从寡聚体向包涵体形式的转换过程中有重要作用，从而保护神经元，作用机制可能与HSP27和HSP70表达水平的升高有关。关键词:帕金森病；组蛋白去乙酰化酶6；α-突触核蛋白；寡聚体；包涵体；热休克蛋白万方数据上海交通大学硕士学位论文THEEFFECTSOFHISTONEDEACETYLAS

7、E6ONα-SYNUCLEINANDTHEPOSSIBLEMECHANISMSINCELLMODELOFPARKINSON'SDISEASEABSTRACTBackgroud:Abnormalaggregationofα-synucleinplaysanimportantroleinParkinson'sdisease(PD),anditisofgreatsignificancetoexplorethecorefactorsaffectingα-synucleinforthedevelopmen

8、tofnewtreatmentmethods.Previousstudieshaveshownthatinmodelsofmanyneurodegenerativediseases,histonedeacetylase6(HDAC6)acceleratedthedegradationofabnormalproteinsthroughanumberofways.WhileotherstudiesshowedthatHDAC6wasrelatedtotheinducingofthemitochond