烟草根寄生孢囊线虫的初步研究

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1、万方数据APreliminaryStudyofCystNematodeParasitizedonTobacRootarasttizeOn1OaccoThesissubmittedtodaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomy．一dlrChengZichao(CollegeofAgronomyandPlantProtection)Supervisor：ZhaoHonghaiQingdao，ChinaJune，2013万方数据独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在

2、导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。～躲枕be时间：_f夕年钿关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论

3、文在解密后应遵守此协议)研究生签名时间：：山／产铜／jb翩签名乇眨／臼帆侧滓多月／J日论万方数据青岛农业大学硕士毕业论文摘要烟草根寄生孢囊线虫的初步研究摘要本文于2010．2012年期间，对烟草根寄生孢囊线虫进行了初步研究。鉴定了病原种类并对种内群体间rDNA．ITS区进行了RFLP分析；调查了病害在我国植烟区的分布情况以及在山东省的发生规律；研究了病原对大豆的致病性，初步探索了病原的特异性。通过对烟草根寄生孢囊线虫进行系统的形态观测，发现孢囊阴门锥突出，双半膜孔，具有发达的下桥和泡囊，阴门裂长44．1+3．5lain，阴门窗长50．4+4．8lma、宽36．6+4．1gm，下桥长83

4、．8--b4．7岫、宽11．0士0．9Ilm。利用分子生物学方法，发现烟草根寄生孢囊线虫可以扩增出大豆孢囊线虫(SCN)特异性DNA片段，且ITS区序列与GenBank收录的SCN序列相似度高达99％r)t_K。形态学和分子生物学鉴定结果表明，寄生在烟草上的孢囊线虫为大豆孢囊线虫(HeteroderaglycinesIchinohe，1952)。利用7种限制性内切酶对10个寄生烟草的SCN群体进行了RFLP分析。结果显示，经彳胁I、Bsh1236I、HaeIII、HhaI、MvaI、lisaI酶切后产生的表型相同；经AvaI酶切后产生了2种表型。在全国9个省和1个直辖市共采集土壤样品7

5、6份，其中19份分离到孢囊，检出率为25％，孢囊密度为每100g土壤2．117个；仅在山东省潍坊市、临沂市、日照市和河南省许昌市、洛阳市的部分县／县级市的土壤样品中分离到孢囊，其他各地区均未发现。以山东省辛兴烟草农场作为固定调查点，系统研究孢囊线虫在烟草上的侵染发生规律。寄生烟草的SCN在山东省潍坊市辛兴地区一年可以发生3代，完成1个世代大约需要20．30d。5月中旬发生初侵染，6月中旬完成第一代。第二代的发生时间从6月底持续到7月中旬，第三代从7月下旬持续到8月上旬。通过接种实验，发现寄生烟草的SCN对大豆没有致病性。通过与寄生大豆的SCN进行对比实验，发现两者通过引物F194F19

6、5，D2AD3B，18S26S，SSU26RSSUl8A扩增后，产生的DNA片段均相同；寄主的根渗出液都能刺激SCN卵的孵化，Cu离子都能抑制SCN卵的孵化；但是zn离子对两者卵的孵化影响不同：对寄生大豆SCN卵的孵化具有刺激作用，但对烟草SCN卵的孵化无影响。关键词：线虫；烟草；大豆孢囊线虫；新寄主万方数据青岛农业大学硕士毕业论文AbstractAPreliminaryStudyofCystNematodeParasitizedTobaccoRootarasie0n10acco14,00tAbstractApreliminarystudyofcystnematodeparasitiz

7、edontobaccorootWascarriedoutduring2010to2012．IdentificationofthepathogenandRFLPanalysisofintrapopulationrDNA—ITSregionsweredone．DistributionintobaccoproducingareasfromChinaandoccurrenceinShandongProvincewereinvestigated．Path