水稻齿叶矮缩病初侵染源及其病原病毒的遗传信息研究

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1、分类号●UDC学校代码10593学号1031304009彦商大学学位论文水稻齿叶矮缩病初侵染源及其病原病毒的遗传信息研究专业名称植物病理学学院名称农学院指导教师廖咏梅(教授)申请学位级别硕士论文提交日期2013年6月论文答辩日期2013年5月学位授予日期2013年6月答辩委员会主席韦继光(教授)论文评阅人双盲评审论文评阅人双盲评审广西大学学位论文原创性和使用授权声明IUlIIIIIIIIIIIY2408882本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个

2、人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。√不保

3、密。(请在以上相应方框内打“√”)论文作者签名：乓受重指导教师签名：荐禾拶作者联系电话：∽7矿／弓；9谚日期：№l；。p∥·t／日期々∞c弓、秒多2f电子邮箱：；仍马；歹产绲c朋水稻齿叶矮缩病的初侵染潮e反其病原病毒的遗传信息研究水稻齿叶矮缩病初侵染源及其病原病毒的遗传信息研究摘要水稻齿叶矮缩病是由植物呼肠孤病毒科(Reoviridae)水稻病毒属(Oryzavirus)的水稻齿叶矮缩病毒(Riceraggedstuntvirus，RRSV)引起的，是水稻上一种危害严重的病毒病害。本文从广西大学农场诱虫灯下褐飞虱虫口数量统计及其带

4、毒检测、田间褐飞虱带毒检测、田间自生稻、再生稻及部分禾本科植物的带毒检测来初探该病的初侵染源。结果表明：水稻齿叶矮缩病的初侵染源主要有两个方面：一是迁飞来的带毒褐飞虱，二是本地越冬后未完全死亡的染病自生稻、再生稻、玉米(Zeamays)、稗草(Echinochloacrusgalli)、光头稗(Echinochloacolonum)和看麦娘(Alopecurusaequalis)等禾本科植物，其中光头稗携带RRSV为首次报道。分别用褐飞虱长翅型成虫和短翅型成虫进行不同时间的传毒试验，30d后通过RT-PCR技术检测水稻植株中的RR

5、SV，结果发现，褐飞虱长翅型成虫和短翅型成虫的传毒时间相差不大，最短的传毒时间均为30min，长翅型成虫传毒2．4h时传毒效率比较高，水稻植株带毒率为10％，短翅型成虫传毒4h时传毒效率比较高，水稻植株带毒率为25％，随着褐飞虱取食水稻的时间增长，水稻感染RRSV的比率提高。根据白广西大学农场采集的水稻病毒病样品的小RNA高通量测序所获得的RRSV序列和Genbank上发表的RRSV基因组各片段的序列，分别设计RRSV基因组不同片段的特异性引物，利用RT-PCR的方法成功克隆RRSV南宁分离物(RRSV-NN)基因组S5、S6、S

6、7、S8和S10片段的全长序列。经VectorNTI11．05软件分析得出RRSV-NN．S5RNA全长序列2682nts，含有1个ORF，编码一个含808个氨基酸的蛋白；RRSV-NN．S6RNA全长序列2158nts，含有1个ORF，编码一个含680个氨基酸的蛋白；RRSV-NN．S7RNA全长序列1938nts，含有1个ORF，编码一个含608个氨基酸的蛋白；RRSV-NN．S8RNA全长序列1913nts，含有1个ORF，编码一个含596个氨基酸的蛋白；RRSV-NN．S10RNA全长序列1162nts，含有1个ORF，编

7、码一个含296个氨基酸的蛋白。用VectorNTI11．05软件分析RRSV-NN各片段与已报道的RRSV各地分离物核苷酸序列和氨基酸序列同一性，结果发现：RRSV-NN基因组S5、S6、S7、S8、S10片段水稻齿叶矮缩病的初侵蔡嗣【及其病周L，黉薯岫々遗传信忠研究与已报道的各地RRSV相应片段的核苷酸序列同一性分别为94．4％．94．6％、98．2％．99．4％、96．4％．100％、98．2％．99．4％和99％．99．3％。与已报道的各地RRSV相应片段编码的氨基酸序列同～性分别为97．6％．97．9％、99．3％．99．

8、6％、99．5％．99．6％、98．2％．99．7％、99．4％．99．7％。从RRSV的S5、S6、S7、S8和S10片段的系统进化树分析来看，南宁分离物的每个片段展示出的与已经报道的分离物的相应片段存在的差异不尽相同，这暗示了RRSV的S5、S