桃蛀螟嗅觉相关基因的筛选与表达谱分析

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1、分类号：S垒2鱼密级：公珏单位代码：!QQ墨委学号：2Q!Q垒15桃蛀螟嗅觉相关基因的筛选与表达谱分析IdentificationandExpressionProfilingoftheOlfactoryRelatedGenesinConogethespunctiferalis(Lepidoptera：Crambidae)学位申请人：葛星指导教师：王振营研究员王勤英教授学科专业：农业昆虫与害虫防治学位类别：农学硕士授予单位：；．--fjL农业大学答辩日期：二。一三年五月二十五日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致

2、谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得烫j量壅些太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：葛星签字日期：为侈年』月；／日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解通j匕壅些太堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权通j壁壅些太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者

3、签名：蔼显导师签名：摇老签字日期：瑚f?年!月弓f日签字同期：刎弓年j月弓7日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：摘要昆虫个体问以及昆虫与环境问的交流主要依靠嗅觉和味觉来实现，其中嗅觉系统在长期的进化过程中，已经发展成为高度专一、极其灵敏的化学检测器，它能够将外界传入的化学信号转化为电信号，从而调节昆虫的行为活动，如寻找食物、觅偶、寄主、栖息场所、产卵场所以及躲避不良环境等，因此对昆虫的存活和繁殖起到重要作用。昆虫对外界气味分子的识别过程主要涉及到几种蛋白，这些蛋白包括气味结合蛋白、化学感受蛋白、气味受体蛋白和气味降解酶等。在害虫防治过程中，这些蛋白可作为新的靶标，切断任

4、意一个环节，都可能破坏昆虫对外界气味分子的识别，从而影响其正常活动。桃蛀螟是农林生产过程中危害十分严重的一种害虫，而且寄主十分广泛，每年都会造成巨大的经济损失。目前对桃蛀螟的防治主要采取化学防治，长期、大量的使用化学农药极易引发害虫的抗药性，因此需要寻找新的防治技术，特别是生物防治技术，以持续、有效的控制桃蛀螟的危害。本文通过构建桃蛀螟触角cDNA文库，筛选出与嗅觉相关的基因，为进一步研究该基因的功能奠定了基础，并为桃蛀螟的生物防治提供了理论支持。主要研究结果如下：1．利用SMART技术构建了桃蛀螟成虫触角的cDNA文库，获得l867条ESTs序列，利用生物信息学方法筛选出28个嗅觉相关蛋白

5、基因，其中包括11个气味结合蛋白基因，4个信息素结合蛋白基因，1个普通气味结合蛋白基因，1个触角结合蛋白基因，8个化学感受蛋白基因，3个气味受体基因。2．首次克隆了桃蛀螟气味受体蛋白基因CpunOrco的开放阅读框(ORF)全长和内参基因fl-acan部分序列，GenBank登录号分别为为JXl01681和JXll9014。CpunOrco基因的开放阅读框全长1425bp，编码475个氨基酸，序列中有7个跨膜区。利用荧光定量PCR技术分析CpunOrco基因在桃蛀螟雌雄蛾不同组织内的表达谱，结果表明，CpunOrco基因在雌雄蛾触角、喙、下颚须、足、腹部和胸部都表达，不同组织间以及雌雄蛾的表

6、达量存在较大差异，主要在触角和下颚须中表达，且雄蛾触角中表达量高于雌蛾触角。3．利用半定量方法分析可溶性蛋白OBP和CSP在雌雄蛾不同组织的表达情况，结果显示OBP和CSP主要在触角中表达，CpunGOBP、CpunOBPl．5、CpunOBPlO在下颚须中也有一定的表达，CpunOBP3-5、CpunOBP8—11在雄蛾触角中的表达量远高于雌虫。CSP的分布范围LLOBP广，CpunCSPl—2、CpunCSP5—6、CpunCSP8在雌雄蛾各部位都表达，以触角中的表达量最高。CpunCSP4、CpunCSP77在触角和下颚须中表达，并且雄蛾的表达量高于雌蛾。关键词：桃蛀螟；嗅觉相关蛋白；

7、cDNA文库；表达谱。IdentificationandExpressionProfilingoftheOlfactoryRelatedGenesinConogethespunctiferalis(Lepidoptera：Crambidae)Mastercandidate：GeXingSupervisor：Prof．WangZhenyingProf．WangQinyingMajor：AgriculturalI