分子印迹磁性微球在生物样品分析中的应用

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1、中山大学硕士学位论文分子印迹磁性微球在生物样品分析中的应用姓名：李苑雯申请学位级别：硕士专业：分析化学指导教师：胡玉玲20100605分子印迹磁性微球在生物样品分析中的应用专业：学位申请人：指导老师：分析化学李苑雯胡玉玲副教授摘要分子印迹聚合物(molecularlyimprintedpolymer,M口)具有构效预定性、特异识别性、良好的化学稳定性等特点，在固相萃取、色谱分离、膜分离等方面得到日益广泛的应用。分子印迹磁性微球结合了分子印迹技术和磁分离技术的优点，具有特异性吸附能力，形状均匀可控，在外加磁场下实现磁

2、分离，简化样品前处理的操作。本文建立了真空微波辅助萃取鹏l哚乙酸MP磁性微球富集-高效液相色谱(11ighperformanceliquidchromatography,HPLC)方法在植物生长素分离分析中的应用，并初步研究了植物外源激素溶液浸种和清水浸种后豌豆、水稻种子萌芽过程中生长素的含量变化。制备了莱克多巴胺M口磁性微球，研究其结构性质和萃取性能，并应用于猪肉和猪肝加标样品的分离富集。本文主要研究内容如下：(1)概述了分子印迹聚合物微球的合成和表征方法，其中重点介绍了分子印迹磁性微球的研究进展。概述了分子印迹

3、聚合物在生物样品前处理中的应用。(2)建立了真空微波辅助萃取／Ⅱ弓l哚乙酸M口磁性微球富集．HPLC测定豌豆和水稻中吲哚乙酸和吲哚丁酸2种植物生长素的分离分析方法。研究表明，与室温浸提法、．20"C过夜浸提法比较，真空微波辅助萃取具有更好的提取效果，并缩短了提取时间。吲哚乙酸MP磁性微球能有效消除基体干扰，选择性萃取和富集豌豆和水稻中的生长素。吲哚乙酸和吲哚丁酸的检出限分别为1．9p∥L和6．8“∥L，加标回收率分别为74．1％．85．6％和69．6％．83．2％。采用该方法初步研究了植物外源激素赤霉酸(gibbe

4、rellieacid，GA3)溶液浸种和清水浸种后豌豆、水稻种子萌芽过程中生长素的含量变化。(3)采用微波辐射法制备了莱克多巴胺MIP磁性微球，研究其结构性能和萃取性能，并应用于猪肉和猪肝加标样品中争兴奋剂的分离富集。采用扫描电子显微镜、红外吸收光谱、热重分析方法、磁学性质测量和激光粒度分析表征莱克多巴胺Mm磁性微球的表观形貌和结构特征。莱克多巴胺MP磁性微球呈均匀球形，表面疏松多孔，粒径主要分布在80．100lain，具有良好的热稳定性和超顺磁性。采用Freundlieh方程拟合实验所得吸附等温线数据，结果表明莱

5、克多巴胺MP磁性微球识别位点具有非均一性。对比其他结构类似物和对照物，莱克多巴胺MIP磁性微球对模板分子有较高的结合百分率，表明了其对模板分子的特异性识别作用。建立了莱克多巴胺MIP磁性微球富集．HPLC方法测定3种D．兴奋剂的分离分析方法，方法的检出限为O．5．1．0lag／L。该方法应用于猪肉和猪肝加标样品中的3种p．兴奋剂的分析，回收率分别为82．o％一89．6％和80．4％．86．8％，RSD为在6％以内，满足复杂基体样品中痕量p．兴奋剂分析的要求。关键词：分子印迹磁性微球，植物生长素，p．兴奋剂，高效液相

6、色谱，生物样品UTheApplicationofMagneflcMolecularlyImprintedBeadsinBiologicalSamplesMajor：AnalyticalChemistryName：LiYuanwenSupervisor：AssociateProfessorHuYulingAbstractMolecularlyimprintedpolymers(MIP)arecharacterizedbyspecificrecognitionpropertiestowardsthetemplatemo

7、lecules．Thestabilityandlowcostofmolecularlyimprintedpolymersmakethemadvantageousforuseinanalysis．Molecularlyimprintedpolymershavebeenappliedinanincreasingnumberofapplications．Magneticmolecularlyimprintedbeadscombinetheadvantagesofmolecularlyimprintedtechnology

8、andmagnetictechnology．MagneticmolecularlyimprintedbeadsCanbecontrolledinregularsizeandsphericalshapeandCallbeeasilyseparatedbyexternalmagneticfields．Thisstudydevelopedasampleprepar