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1、中国农业科学2013,46(8):1646-1656ScientiaAgriculturaSinicadoi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.08.014NaCl胁迫对黄瓜种子萌发的影响及DNA甲基化的MSAP分析黄韫宇，张海军，邢燕霞，齐艳，孙倩倩，周春蕾，赵冰，郭仰东（中国农业大学农学与生物技术学院，北京100193）摘要：【目的】研究黄瓜种子萌发过程中DNA甲基化动态变化情况以及外源施加NaCl对种子萌发及种子DNA甲基化水平的影响，探索DNA甲基化在黄瓜种子萌发过程及NaCl胁迫反应
2、中的作用。【方法】运用甲基化敏感扩-1增多态性（methylationsensitiveamplifiedpolymorphism，MSAP）技术，分析0、150、200mmol·LNaCl处理下，黄瓜种子萌发过程（0、1、2、4、6、8d）的DNA甲基化水平及动态变化情况。【结果】MSAP结果显示，黄瓜种子CCGG位点的甲基化水平约15.25%，以双链甲基化方式为主。种子中DNA甲基化水平在萌发1—2d略有升高，而在整个萌发过程中呈下降趋势；NaCl处理加剧了甲基化的变化幅度，并使萌发末期的甲基化水平更低。萌发过程中
3、甲基化升高和降低同时发生，分别在不同萌发时期占主导，不同变化类型中CG/CHG（H=A，T，C）位点胞嘧啶甲基化同时变化的类型占主导。甲基化变化同时发生在编码序列和非编码序列中。【结论】黄瓜种子萌发过程的DNA甲基化表现出复杂性，甲基化和去甲基化进程同时进行，并具有时空特异性。NaCl处理降低了种子基因组甲基化水平的稳定性，对种子萌发有抑制作用。关键词：黄瓜；萌发；DNA甲基化；NaCl；甲基化敏感扩增多态性EffectsofNaClStressonSeedGerminationandDNAMethylationSta
4、tusDetectedbyMSAPAnalysisinCucumberHUANGYun-yu,ZHANGHai-jun,XINGYan-xia,QIYan,SUNQian-qian,ZHOUChun-lei,ZHAOBing,GUOYang-dong(CollegeofAgricultureandBiotechnology,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100193)Abstract:【Objective】Theobjectivesofthisstudyweretoanalyze
5、thecytosinemethylationdynamicsduringcucumberseedgerminationandtoassesstheeffectofNaCltreatmentonseedgerminationandDNAmethylationstatus.Moreover,theroleofDNAmethylationonseedgerminationandsaltstressadaptationwasstudiedatthesametime.【Method】Methylationsensitiveamp
6、lifiedpolymorphism(MSAP)methodwasusedtoanalyzethelevelandvariationpatternsofDNAmethylationatdifferenttimes(0,1,2,4,6,8d)duringcucumberseedgerminationindifferentNaCltreatments(0,150,200mmol·L-1).【Result】MSAPresultsshowedthatthemethylationlevelincucumberdryseedswa
7、s15.25%,mainlyinfullmethylationpattern.ThelevelofglobalDNAmethylationdecreasedduringthewholegerminationprocess,withaslightincreaseattheearlystages(1-2d).NaCltreatmentaggravatedthesechanges,andmadethefinallevelofDNAmethylationlower.Hypermethylationandhypomethylat
8、ionhappenedsimultaneously,andpredominatedatdifferentgerminationstages.Amongdifferentchangetypes,CG/CHG(H=A,T,C)simultaneouschangeswerethedominatingtypes.DNAmethylatio
