镍致职业性接触性皮炎的机制初探

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1、硕士研究生学位论文题目：镍致职业性接触性皮炎的机制初探姓名：陈健学号：2111541028硕院系：公共卫生士研究学位类型：专业学位医学硕士生学位专业：公共卫生论文导师姓名：谈伟君教授及职称蔡日东主任医师程树军研究员二○一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：密级：UDC：镍致职业性接触性皮炎的机制初探姓名：陈健学号：2111541028院系：公共卫生学院学位类型：专业学位医学硕士专业：公共卫生研究方向：职业病防治导师：谈伟君教授蔡日东主任医师程树军研究员论文提交日期：2018年3月15日论文答辩日期：2018年5月20日学位授予单位：广东

2、药科大学二〇一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文ApreliminarystudyonmechanismofoccupationalcontactdermatitiscausedbynickelCandidate：ChenJianStudentID：2111541028Affiliation：SchoolofPublicHealthAcademicDegreeApliedfor：ProfessionaldegreeofPublicHealthSpeciality：Occupationaldiseasepreven

3、tionandtreatmentSupervisor：Pro.TanWeijunAssistantSupervisor：ChiefphysicianCaiRidongPro.ChengShujunDayofDefence：May2018Degree-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniversityMay2018广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文镍致职业性接触性皮炎的机制初探摘要研究目的由镍引起的职业性接触性皮炎（OCD）是一种常

4、见的职业性皮肤病，也是我国职业卫生领域需要关注的问题。OCD的发生会给人们带来生活和工作上的不便。目前对该病的发病机制虽有研究但尚未明确，难以向患者提供有效的预防和治疗措施。本文试图通过对2种免疫相关细胞的共培养，探索镍致OCD过程中细胞间相互作用的可能机制。通过检测HaCaT细胞活率、THP-1细胞内ROS水平及其表面标志物CD54、CD86的表达情况，以及炎性因子IL-18、IL-1β和IL-8的分泌情况并进行分析，为2种镍化合物致OCD的机制做初步的探索。研究方法1.镍化合物对HaCaT细胞影响：配制不同浓度NiCl2·6H2O和NiSO4

5、·6H2O溶液，使用MTT法分别检测2种化合物对体外培养HaCaT细胞的毒性作用。2.镍化合物对THP-1细胞的影响：配制不同浓度的NiCl2·6H2O和NiSO4·6H2O溶液，探讨THP-1在细胞活率大于50%时细胞内ROS水平和细胞表面标记物（CD54、CD86）变化。3.使用HaCaT细胞与THP-1细胞建立共培养体系，再暴露于不同浓度NiCl2·6H2O和NiSO4·6H2O溶液，检测THP-1细胞在受到镍I广东药科大学硕士研究生学位论文刺激后表面标志物（CD54、CD86）的表达情况，同时对培养基中IL-18、IL-1β和IL-8浓度

6、进行分析，比较2种细胞共培养与单细胞系统的各检测指标是否具有差异性，初步探索镍致OCD过程中2种细胞间相互作用的关系。研究结果1.在本实验条件下，2种镍化合物均能对HaCaT细胞产生毒性作用，其中NiCl2·6H2O的IC50均值为273.44μg/mL，CV75为113.30μg/mL；NiSO4·6H2O的IC50与CV75均值分别为392.71μg/mL与191.65μg/mL，其诱导OCD产生的机制可能与其对表皮细胞的损伤有关。2.由2种镍化合物对THP-1细胞影响的结果来看，在本实验设计浓度范围内，NiCl2·6H2O未能引起THP-1

7、细胞内ROS水平和细胞表面标志物CD86、CD54的上升；NiSO4·6H2O也未能引起THP-1细胞内ROS水平改变，但可以使THP-1细胞表面标志物CD86、CD54上升，说明2种镍化合物致敏机制均不会引起THP-1细胞内ROS水平改变。NiCl2·6H2O引起致敏过程中不会直接作用于THP-1细胞，而NiSO4·6H2O可以直接激活THP-1细胞，引起细胞表面标志物上升，—2-说明镍盐所结合酸根离子（Cl、SO4）可能对其致敏机制存在一定影响。3.在本实验条件下，使用HaCaT细胞与THP-1细胞共培养方法的实验结果表明，在共培养系统下，仍

8、未观察到NiCl2·6H2O对THP-1细胞表面标志物CD86、CD54表达的影响，而能增强NiSO4·6H2O对II广东药科大学硕士研