兔面神经颅内段牵拉损伤对面神经核运动神经元caspase-3、bax及bcl-2表达影响

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1、’▲．、●●了●徐州医学院硕士学位论缩略词ANApafl英文全称缩略词表AbbreviationAcousticneurinomaApoptoticproteinaseactivatigfactorCaspase一3CysteinylaspartatespecificproteasesCADCaspase-activateddeoxyribonucleaseC”CDIISHISSHRISHFNFPHEPBSPCDPFSHCytochromeCDistractioninjuryInsirehybr

2、idizationInsirehybridizationhistochemistryRNAinsituhybridizationFacialnucleusFacioplegiahematoxylin—eosinPhosphatebelancedsolutionProgrammedcelldeathParaformaldehydeShamgroup’～．'徐州医学院硕士学位论文兔面神经颅内段牵拉损伤对面神经核运动神经元Caspase3、Bax及Bcl一2表达的影响中文摘要目的1．观察牵拉损伤兔面神

3、经颅内段后兔的行为学改变，检测手术侧面神经核运动神经元中Caspase．3、Bax及Bcl．2的表达变化；2．初步探讨一定量的牵拉损伤对面神经核结构的影响，及Caspase．3、Bax和Bcl．2对面神经核运动神经元的作用，为牵拉损伤后面神经功能修复提供理论依据，同时为临床治疗面神经损伤提供新思路。方法选取成年健康R本长耳大白兔40只，体重2．2．2．5kg，随机分为假手术组(ShamGroup，SH)、牵拉损伤组(DistractioninjuryGroup，DI)。根据本课题前期面神经牵拉安

4、全阈值的实验证实：以牵拉重量及牵拉时间分别为6g、10S作为牵拉损伤的拉力参数，对兔面神经颅内段进行牵拉损伤后，面神经功能出现中度损伤，并且部分恢复。因此，我们手术组用滑轮、精确砝码选取6g、10S作为牵拉损伤的拉力参数，对兔面神经颅内段进行牵拉损伤，假手术组不予以牵拉。DI、SH两组分别以术后ld，7d，14d，21d而各分4个亚组，观察大白兔的行为学改变；HE染色观察手术侧面神经核团(facialnucleus，FN)运动神经元的病理形态学；原位杂交技术(Insituhybridizatio

5、n，ISH)观察手术侧面神经核区Caspase一3mRNA的表达变化；免疫组织化学染色法规察手术侧面神经核区Caspase．3、Bax及Bcl一2等蛋白的表达。结果1．行为学变化面神经牵拉损伤后随着时问的延长，出现大白兔面神经瘫痪(Facioplegia，FP)，面神经功能障碍表现较为明显，而SH组未出现面神经功能障碍。2．面神经核HE染色SH组术侧运动神经元核大而圆，染色浅，胞质内可见块状的尼氏体，细胞结构形态趋于J下常；Dl7d、DI14d、DI21d组损伤侧面神经2，■’徐州医学院硕士学位

6、论文核运动神经元变性显著，细胞内空泡增多，核仁偏移，细胞结构形态紊乱。SH组可各时间点FN区运动神经元之间数目无明显差异(pO．05)；DI1d组FN区神经元数目与同时间点的SHld相比差异无统计学意义(尸>0．05)；DI7d、DI14d、DI21d组FN区运动神经元数目逐渐减少，并且各组之间减少有明显差异衅0．05)。3．Caspase一3mRNA原位杂交实验Sham组术侧FN区Caspase．3mRNA阳性染色神经元较少，DI组损伤侧阳性细胞较多。SH组各组之间无明显差异(P>0．05)，

7、DI7d、DI14d、DI21d组术侧阳性细胞数目都较SH组显著增多(P0．05)。术后第7、14、21天，DI组术侧FN去运动神经元Caspase．3蛋白表达量明显增多(氏O

8、．05)，并以DI14d组最高；DI组，除DI1d外各组的Bax蛋白表达阳性细胞与同时间点的SH组相比均明显增高(尸