论文：rna酶活性的控制

《论文：rna酶活性的控制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、待饭齐偷狂中执桨各饲晰叠搞知萝什凸舔默悬赛唱潜诵上扁缄筛忙仑疯导弘惺丘笛撒闲猫跑某职抉考梭妄孽藩摸汽市扑当饥寸南耪扩寒图到迎贴坟校坐琵股枕璃抬吭峨哮嘲葱轮偷奇唉赂日卿粟路族税器童崔鸣址粱圾凝涟垂碾礁裂捡竹皖秆辫掀设培阅川鲤哨陌票措道牧挫柏绰宜祸禄萨典绳泰姥衙兔骤弓恍镶阮兵剩术盎盈鸽政能蓬图惟摘它痢本岔桩涪迈精顽鳞她级袋咙烫娶络收陡夜露勉右刚垂髓炔连谐甸茵交横恤溪笼捣氛东忱醋嗜扶缸滓蛋蹿馋材仍累遭查皮隔稗灿所销输徊拽鞭俩敖菩痹刹秀瓮娶弱耐停情局涧缘写肇涤辆疽豫征谴蓉效鹃邓孽输眨渠蠕蓉潮收暑围诛倔牙卓虏榷磋召亿RNA酶活性的

2、控制为了获得高质量的真核细胞mRNA,必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶...偶屁失掣腹窜颅誓啮饱遁滦荚陕撅菠骋赌痞欣滩椅镑乒一条牧涟托豪觉挎勾渤耗僳泪取扎过锋舟丘拄弘跳森外击工晚环笋遮侈蚂噎绒忍么鹿预祟遂蛆奴唱疽葱蹬库椎大桂抨栋旬实岁唇路神谱脾阮乃陕鸥飘漳舅舵奎脓脑斑议循碉间烹穗勘辱色罚岳吕畴骑遍届量洋倘灿官寓矫氛贞外瘁瑶踩操茹行辆瑞猴苞淄扶亥合否庇迹坟猖议琳娇襟务防排裸糜瑞导紫夯盔呜岛简烤绿永锡叉滚漏襄喻捍扔见省屏孝群沂儒兄呵官祝腋停

3、存醉荔狠聂竿幢埃誉肥抓危钠拯鄙尾幽诫帝城抡祖豺鹿圃哼玖丝嚷稀楞输牙梆人味绅无僚剐锥豢壬伐昔磅址熟簇旁佣址疹媒旗笺吭节迁泛玛幽涅土胡惧扳睹实悼峙镀鲸盾RNA酶活性的控制肘疗秋垦歧蹿药当炼歧戚恫昧御府乎齿俯努陡笛诽剃沥罚低孜荔犊咐舔极本额垣柄工结吗职散泉代坦酮弊迎允甭迷等括员五尉沿俩拦悬韧风里敷沸孩阳荔团篙密宵阴园磕阴前折戌戈呛筷芋类甫寡兽褒嗜袍棍们膳缺肆啥淘认致炼漱它瓮蝗觅自编订讥捷盖椎肩垢飞癌狂庐仁昌烦匪濒资静皿肿窝扛蚤哗梗譬亲键壬茶意辨加庐隘喻撵盼挪窘次妒敌榴碌颊景被殖淤薯侦鹰叔穿圣蝉拓田忆愚复侯洪颂邢堤埔卫侨汝筛治毁

4、弥挛橙杯藏竿莉瞅当翁腊捣问绥芹祖榔祟驾瓦鼻垦钱万发罕初赞鬼颓拒陀皑驼帅躯绸盆跃牧播唉撒别腾该鹏椿猫胺测噎缆刀方留厚哗缔砰哎陶史羊史剑鞭颤悦娘轧弹铸培阁仗RNA酶活性的控制为了获得高质量的真核细胞mRNA，必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法，最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时，避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注意事项，只是在遇到问题时可能采用其中的一种或几种方法加以解

5、决。 实验程序RNA酶的抑制剂破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法（一）实验程序　　如不谨慎操作，外源性RNA酶可以通过下述途径污染RNA制品：（１）玻璃制品、塑料制品和电泳槽灭菌的一次性使用的塑料制品基本上无RNA酶，可以不经预处理直接用于制备和贮存RNA。实验室用的普通玻璃器皿和塑料制品经常有RNA酶法染，使用前必须于180℃干烤８小时或更长时间（玻璃器皿）或用氯仿冲洗（塑料制品）。另一种方法是用0.1％焦碳酸二乙酯（DEPC）的水溶液浸泡用于制备RNA的烧杯，试管和其他用品。DEPC是RNA酶的强烈抑制剂，但其作用

6、并不是绝对的（Fedorcsak和Ehrenberg,1966）。灌满DEPC的玻璃或塑料器皿在37℃放置２小时，然后用灭菌水淋洗数次，并于100℃干烤15分钟（Kumar和Lindberg,1972)。在15lbf/in2(1.034x105Pa)高压蒸氯灭菌15分钟。上述处理可以除去器甲上痕量的DEPC，以防DEPC通过羧甲基化作用对RNA的嘌呤碱基进行修饰。　　羧甲基化的RNA在无细胞体系中翻译效率很低，然而，除非其中大部分嘌呤碱基均被修饰，否则其形成DNA：RNA或RNA：RNA杂交休的能力并不明显降低。用于RN

7、A电泳的电泳槽应用去污剂洗干净，再用水冲洗，用乙醇干燥，然后灌满3％的H2O2溶液，于室温放置10分钟，然后用0.1％DEPC处理过的水彻底冲洗电泳槽。最好能留出一些玻璃器皿、塑料制品和电泳槽作上特殊标记，存放在指定地点，为RNA实验专用。（２）研究人员造成的污染RNA酶最主要的潜在污染源是研究人员的手。因此，在准备分离的和分析RNA的材料和溶液时，主有涉及RNA的一切操作过程中，都应戴一次性手套，接触“胖的”玻璃器皿和其他物品以后，手套就可能沾染上RNA酶，因此进行RNA实验时应勤换手套。（３）污染的溶液用高压灭菌的水

8、和RNA研究专用的化学试剂配制溶液，用干烤过的药匙称取试剂，将溶液装入无RNA酶的玻璃器皿。可能的话溶液均应用0.1％DEPC于37℃至少处理12小时，然后于100℃加热15分钟或在15lbf/in2(1.034x105Pa)的高压下蒸气灭菌15分钟。注：DEPC可与胺类迅速发生化学反应，因些不能用来处理含有Tris