乌苏拟鲿人工繁育及线粒体基因组结构研究

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1、分类号：S814单位代码：10364密级：学号：S10090501512安徽农业大学学位论文乌苏拟鲿人工繁育及线粒体基因组结构研究StudiesonArtificialReproductionandtheCompleteMitochondrialGenomeofPseudobagrusussuriensis研究生：陶刚指导教师：万全副教授申请学位门类级别：农学硕士专业名称：动物遗传育种与繁殖研究方向：经济动物与水产动物繁殖控制技术所在学院：动物科技学院答辩委员会主席：2013年6月摘要本文对乌苏拟鲿人工繁育进行了初步研究。结果表明，雌鱼适宜的

2、催产剂量为第一针PG0.5mg/kg+HCG300IU/kg+LRH-A210μg/kg，第二针PG5mg/kg+HCG1200IU/kg+LRH-A220μg/kg，两针间距约为16h。水温24℃～25.5℃时，药物效应时间为12h。5日龄仔鱼卵黄基本吸收完，口能自主摄食，可以投喂饵料。观察了乌苏拟鲿胚后发育，对亲本选择、人工授精、孵化管理等关键技术进行了探讨。报道了乌苏拟鲿Pseudobagrusussuriensis线粒体基因组全序列。乌苏拟鲿线粒体基因组全长16536bp，GenBank登录号NC_020344.1。包括2个rRNA基

3、因、22个tRNA基因、13个编码蛋白质基因及2个非编码控制区。除ND6和tRNAGln、tRNAAla、tRNAAsn、tRNACys、tRNATyr、tRNASer、tRNAGlu和tRNAPro编码基因位于L链，其余基因位于H链。序列分析显示，乌苏拟鲿线粒体基因组碱基含量分别为：A为31.8%，T为26.8%，G为14.9%，C为26.5%，A+T含量（58.6%）明显高于G+C含量（41.4%），表现出的碱基偏好性，类似于脊椎动物偏好于A+T碱基一致。乌苏拟鲿线粒体基因间排列紧密，基因间有9处重叠，共30bp。基因之间共有10处基因间

4、隔，共62bp，大小为1～32bp，最大基因间隔发生在tRNAAsn和tRNACys之间。除COXⅠ基因以GTG为起始密码子外，其余12个均以ATG为起始密码子。9个蛋白质编码基因拥有完整的终止密码子，分别为TAG3个（ND1、ND2和ND3）和TAA6个（COXⅠ、ATP8、ATP6、ND4L、ND5和ND6）。4个蛋白编码基因（COXⅡ、COXⅢ、ND4和Cytb）的终止密码子为不完全密码子，以单个碱基T终止。tRNA长度范围为67～75bp，预测了22个tRNA基因的二级结构，均为三叶草结构。轻链复制起始区（OL）都位于5个tRNA串（

5、WANCY基因簇）的tRNAAsn和tRNACys之间，长度为34bp。分析10种鲿科鱼类OL均可形成茎环结构，且茎区保守序列为（CTTYCCCCGCCT/GAARGGGGCGGA）。乌苏拟鲿线粒体DNA控制区（D-loop区）位于tRNAPro和tRNAPhe之间，总长892bp。乌苏拟鲿mtDNA控制区可分为终止序列区、中央保守区和保守序列区：终止序列区含有扩展终止相关序列ETAS；中央保守区包含CSBF、CSBE和CSBD；保守序列区含有CSB1、CSB2和CSB3。为了探讨鲿科鱼类系统发生关系，本文基于鲇形目14种鱼类线粒体基因组的1

6、2个蛋白编码编码基因（除ND6基因）的核酸序列，采用NJ法进行系统发育分析。结果支持东亚鲿科有效属为鳠属和拟鲿属。关键词：乌苏拟鲿，人工繁育，线粒体基因组，系统发生IAbstractPreliminarystudiesonartificialreproductionofPseudobagrusussuriensiswereconductedinthepresentstudy.TheproperhormonedosageforthefemalewasPG0.5mg/kg+HCG300IU/kg+LRH-A210μg/kginthefirstin

7、jectionandPG5mg/kg+HCG1200IU/kg+LRH-A220μg/kginthesecondinjection.Theeffectivetimewas12hatthewatertemperatureof24℃～25.5.5daysafterhatching,theeggsyolkisabsorbedcompletelyanditcanbefedwithartificialfood.Inaddition,weobservedthepostembryonicdevelopmentofPseudobagrusussuriensi

8、s,selectingparentfish,artificialfertilization,hatchmanagement,andothertechniqueswe