吴茱萸碱对人前列腺癌du145细胞的体外作用及其机制的研究

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3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一13附图·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·25讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”27结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”30参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”30

4、综述ERK／MAPK信号通路各蛋白与相关肿瘤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··34致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“44中文摘要吴茱萸碱对人前列腺癌DUl45细胞的体外作用及其机制的研究摘要目的：在体外研究吴茱萸碱(evodiamine，evo)对人前列腺癌DUl45细胞增殖、凋亡的影响，并探讨其可能作用机制。方法：细胞培养技术体外培养人前列腺癌DUl45细胞，用不同浓度的吴茱萸碱进行干预。MTT法检测各浓度吴茱萸碱对人前列腺癌DU

5、l45细胞增殖的影响；流式细胞术测定吴茱萸碱对细胞周期和凋亡的影响；倒置光学显微镜下观察DUl45细胞形态变化；免疫细胞化学法检测前列腺癌DUl45细胞内PCNA的表达情况；WesternBlot方法检测t-ERK、P．ERK及CleavedCaspase．3的表达。用SPSSl3．0统计软件处理所得结果，以P

6、细胞经过吴茱萸碱处理后细胞内增殖标志物PCNA表达降低，细胞内总的ERKl／2蛋白表达水平无明显变化，而磷酸化ERKI／2蛋白与对照组相比水平下降。2吴茱萸碱对DUl45细胞周期的影响：流式细胞分析技术结果显示，经过吴茱萸碱作用24小时后各个浓度组(10～M、10～M、10弓M)所处理结果显示各周期内的细胞数量发生明显变化，其中G。、S期细胞明显减少而G2／M期细胞积累增多，其差异有统计学意义，即吴茱萸碱使DUl45细胞增殖阻滞于G2／M期。3吴茱萸碱可诱导DUl45细胞凋亡：流式细胞分析技术结果显示，吴茱萸

7、碱各浓度组(10。7M、lO击M、10。5M)作用于DUl45细胞72h后，凋亡细胞明显增多，且凋亡率随着药物浓度的增加而增加，呈现药物浓度依赖方式，经过各浓度组吴茱萸碱处理后的DUl45细胞所测得的凋亡率结果差异使用单因素方差分析有显著性差异(尸

8、，可能通过抑制ERK磷酸化水平从而实现抑制其增殖作用。2吴茱萸碱可诱导DUl45细胞凋亡，推测通过激活Caspase．3上调CleavedCaspase．3的表达量是吴茱萸碱诱导DUl45细胞凋亡的机制之一。关键词：吴茱萸碱；前列腺癌DUl45细胞；增殖；凋亡；英文摘要一_—————————————————————————————————————————————_————————————一Study