艾灸大肠俞对大鼠背根神经节p2x7受体介导内脏痛敏的作用研究

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1、分类号：密级：UDC：学号：406519611007南昌大学硕士研究生学位论文艾灸“大肠俞”对大鼠背根神经节P2X7受体介导内脏痛敏的作用研究Effectofmoxibustionat"dachangshu"areaonvisceralhyperalgesiamediatedbyP2X7receptorofdorsalrootgangliainrats朱启城培养单位（院、系）：南昌大学医学院基础学院导师：梁尚栋教授指导教师姓名、职称：刘双梅讲师申请学位的学科门类：理学学科专业名称：生理学论文答辩日期：答辩委员

2、会主席：评阅人：年月日万方数据学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家

3、有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日I万方数据摘要摘要研究

4、背景与目的：肠功能紊乱性疾病（如肠易激综合征）和炎性反应性肠病常出现内脏敏感性增高，而内脏痛敏是引发内脏痛的最主要病理机制。功能性肠病肠壁与炎性反应性肠病相似也存在炎性反应，肠壁慢性炎性剌激产生内脏伤害性反应，伤害性信号引发内脏痛。三磷酸腺苷（ATP）及其作用的P2X7受体在痛觉伤害性信息传递中具有重要作用。外周感受器感受伤害性刺激后形成伤害性冲动是通过背根神经节（DRG）初级感觉神经传入。艾灸可能具有抗炎免疫调节作用。热敏灸是施灸热敏腧穴治疗时通过产生透热、扩热、传热、局部不热远部热等现象的一种悬灸治疗方法

5、。临床研究显示热敏悬灸可较好治疗肠易激综合征，但其作用机制尚不清楚。本研究以新生乳鼠结直肠扩张（colorectaldistension,CRD）制备肠易激综合征内脏痛敏模型，悬灸大鼠热敏腧穴“大肠俞”40min模拟热敏灸，观察艾灸镇痛效应是否与肠壁慢性炎症剌激后背根神经节P2X7受体表达变化有关。方法：（1）以新生乳鼠结直肠扩张制备肠易激综合征内脏痛敏模型，悬灸大鼠热敏腧穴“大肠俞”40min模拟热敏灸治疗；（2）检测对照组，模型组，艾灸非穴位组和艾灸穴位组大鼠腹壁撤退反射评分(abdominalwithd

6、rawalreflex,AWR)评分和内脏痛敏阈值（3）免疫荧光双标法观察卫星胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）与P2X7受体的共表达情况。(4)RT-PCR观察各组背根神经节P2X7受体mRNA表达的变化。(5)免疫组织化学和WesternBlot方法检测各组大鼠背根神经节P2X7受体蛋白表达变化。结果：1、新生乳鼠直结肠球囊扩张刺激8周建模后检测结果表明：模型组CRD痛敏阈值较对照组痛敏阈值明显降低，模型组在20、40、60、80mmHg各级CRD的AWR评分较对照组明显增高（p<0.01）。结果

7、表明新生乳鼠CRD连续刺激可形成内脏痛敏模型。II万方数据摘要2、穴位艾灸组大鼠痛阈值较模型组大鼠增加(p<0.01)，非穴位艾灸组大鼠痛阈值与模型组比较无差异(p>0.05)。穴位艾灸组在20、40、60、80mmHg各级CRD的AWR评分均较模型组明显降低(p<0.01)，非穴位艾灸组与模型组比较无差异（p>0.05）。3、免疫组织化学检测显示：模型组DRG中P2X7受体免疫反应性水平较对照组明显增加(p<0.01)，艾灸“大肠俞”穴位组较模型组P2X7受体表达水平显著下降(p<0.01)，艾灸非穴位组与

8、模型组之间无差异(p>0.05）。4、逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测结果显示：模型组DRG中P2X7mRNA表达水平较对照组明显增加(p<0.01)，艾灸“大肠俞”穴位组较模型组P2X7mRNA表达水平显著下降(p<0.01)，艾灸非穴位组与模型组之间无差异(p>0.05）。5、免疫荧光双标检测显示：背根神经节细胞P2X7受体和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）共表达，模型组P2X7受体和GF