资源描述：
《g蛋白偶联受体40在游离脂肪酸影响小鼠胰岛nit_1细胞脂性凋亡中的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、·1376·中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2009,25(7):1376-1380[文章编号]1000-4718(2009)07-1376-05G蛋白偶联受体40在游离脂肪酸影响小鼠3胰岛NIT-1细胞脂性凋亡中的作用#△张莹,程桦,罗招凡,徐明彤,张少玲,黎峰,严励,李焱(中山大学附属第二医院内分泌科,广东广州510120)[摘要]目的:探讨G蛋白偶联受体40(GPR40)是否介导游离脂肪酸(FFAs)对小鼠胰岛NIT-1细胞脂性凋亡的影响及其可能机制。方法:观察棕榈酸、油酸(500μmo
2、l/L,48h)对NIT-1细胞凋亡的影响,用Hoechst33342染色、TUNEL及流式细胞仪检测凋亡。并利用siRNA技术抑制GPR40在NIT-1细胞表达,观察棕榈酸、油酸对GPR40表达抑制细胞脂性凋亡的影响,行Westernblotting观察Bcl-2、Bax和p-c-Jun表达。结果:棕榈酸长期作用可诱导NIT-1细胞凋亡;而油酸可抑制棕榈酸对NIT-1细胞的诱导凋亡作用。抑制GPR40表达后,空转组、controlsiRNA、GPR40siRNA转染细胞分别予棕榈酸孵育48h,3组间细胞凋亡率差异无显著;3组细胞分别予棕
3、榈酸、油酸共孵育48h,GPR40siRNA转染细胞凋亡率明显高于空转组细胞,差异显著(P<0.05),Westernblotting显示这一过程伴随c-Jun磷酸化水平下降、Bcl-2、Bax表达无明显变化。结论:GPR40未参与饱和脂肪酸诱导的β细胞凋亡,而介导了不饱和脂肪酸对脂性凋亡的抑制作用,c-Jun可能参与这一过程。提示GPR40参与调节β细胞适应性,为探讨肥胖和T2DM的关系提供了新的线索。[关键词]G蛋白偶联受体40;糖尿病,非胰岛素依赖型;游离脂肪酸;细胞凋亡;NIT-1细胞[中图分类号]R363[文献标识码]ARole
4、ofGPR40mediatestheeffectsofFFAsonlipoapoptosisinmouseβ-celllineNIT-1ZHANGYing,CHENGHua,LUOZhao-fan,XUMing-tong,ZHANGShao-ling,LIFeng,YANLi,LIYan(DepartmentofEndocrinology,TheSecondAffiliatedHospital,SunYat-senUniversity,Guangzhou510120,China.E-mail:hcheng_4374@yahoo.com)[
5、ABSTRACT]AIM:ToevaluatetheroleofGprotein-coupledreceptor40(GPR40)mediatestheeffectsoffreefattyacids(FFAs)onlipoapoptosisinmouseβ-celllineNIT-1andthemechanismsinvolvedinthisprocess.METH2ODS:NIT-1cellsweresupplementedwithpalmitate(500μmol/L)oroleate(500μmol/L)for48h,thenapo
6、ptosisofthecellswasdeterminedbythemethodsofHoechst33342,TUNELandflowcytometry(AnnexinV/PI).Thesmallinterfer2ingRNAtechniquewasusedtoinhibittheexpressionofGPR40inNIT-1cell.Themock,controlsiRNAandGPR40siRNAtransfectedcellswereeithersupplementedwithpalmitate(500μmol/L)orco-i
7、ncubatedwithpalmitateandoleate(500μmol/Lforeach)for48h.Thepercentagesofapoptoticcellswerequantified.Theexpressionofp-c-Jun,Bcl-2andBaxweredetectedbyWesternblotting.RESULTS:Palmitateinducedβcelllipoapoptosis,whereasoleateinhibitedNIT-1cellsfrompalmitate-inducedlipoapoptosi
8、s.Nosignificantdifferenceofthepercentagesofapoptoticcellswasindicateda2mongthemock,controlsiRNAa
