臭氧对两种主要储粮真菌的抑制作用研究

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1、万方数据第40卷臭氧对两种主要储粮真茵的抑制作用研究·3·，簟-簟●坐-●●★●●●●●●弋：储粮有害生物及防治技术薹飞爿}爿‘弗爿B蒂綦带綦1摹1}j}j卜—‘j卜蒂书臭氧对两种主要储粮真菌的抑制作用研究。秦宁1郭道林2王双林2付鹏程2(1南京财经大学食品科学与工程学院210046)(2中储粮成都粮食储藏科学研究所610031)摘要研究了常温下不同浓度臭氧、不同处理时间对两种主要储粮霉茵黄曲霉、黑曲霉的生长抑制作用(茵落生长法)，以及臭氧对两种霉茵的茵落形态、茵丝结构的影响。结果表明，臭氧对两种霉茵茵落生长均表现出抑制作用，并且随着臭氧浓度的提高

2、、处理时间的延长，押制效果愈加显著；臭氧处理可使两种霉茵茵落褪色，茵丝发生弯曲、断裂或局部膨大，甚至使细胞发生胞溶。分析可知，在本实验条件下臭氧浓度170mglm3"--190mg／m3、处理6h对两种霉菌的抑制效果较为理想。关键词臭氧黄曲霉黑曲霉抑制作用我国是传统的农业大国。根据国家有关部门的统计数据，2000一--2010年期间我国粮食年总产量为4．5．'--．-,5．5亿吨，并且每年呈上升趋势(2003年除外)。另据统计，每年我国需要处理的高水分粮达1亿多吨，约占总产量的1／5～1／4[¨。高水分粮很容易因发生霉变而品质降低甚至不能食用。这不

3、仅是一笔巨大的经济损失，而且霉变的粮食可能污染真菌毒素，人畜食用后可导致中毒甚至致癌。因此，为确保高水分稻谷储藏期的质量稳定和安全，防霉成为迫切需要解决的问题。目前，臭氧应用于粮食防霉的研究国内已有一些报道[2叫】，但是对于不同浓度臭氧在常温条件下对不同储粮真菌的作用效果研究还是空白，因此研究并提出在常温条件下抑制不同霉菌的最佳臭氧浓度及处理时间对于粮食安全储藏具有重要的指导意义。黄曲霉和黑曲霉是侵染高水分粮的主要储粮真菌，本研究旨在探讨常温条件下不同浓度臭氧对黄曲霉和黑曲霉两种主要储粮真菌的抑制作用，为臭氧在粮食防霉方面的应用提供一定的理论依据。

4、1材料与方法1．1实验材料及设备1．1．1实验菌种黄曲霉(AspergiUusflavus)和黑曲霉(Aspergillusniger)分离自稻谷，由成都粮食储藏科学研究所微生物实验室提供。1．1．2培养基本实验采用高盐察氏培养基进行菌种的培养，以抑制非真菌类杂菌的生长。高盐察氏培养基成分：硝酸钠2g，硫酸二氢钾1g，硫酸镁(含7个结晶水)0．5g，氯化钾0．5g，硫酸亚铁(含7个结晶水)0．01g，氯化钠60g，蔗糖30g，琼脂20g，蒸馏水i000mL。制法：加热溶解，分装后，在121"C高压灭菌20min。必要时，可酌量增加琼脂。1．1．3主

5、要仪器SOZ—YW一200G(空气源)型臭氧发生器：广州生产；HRT一7．5A冷冻干燥机：深圳生产；VⅣ一O．64／7无油空压机：湖南生产；水冷系统：成都粮科所研制；Uv一100紫外臭氧检测仪：美国制造；I，DZX一100KtLS型立式压力蒸汽灭菌器：上海生产；ZRX--100ESW型智·基金项目。国家科技支撵计划课题。稻谷收获集约化干燥技术和设备研发与示范”(课题编号t2009BADAOB03)通讯地址t成都市花牌坊街95号万方数据·4·粮食储藏2011(5)能人工气侯培养柜：杭州生产I超净台；缓冲室；臭氧处理室；普通直尺；光学显微镜等。1．2实

6、验方法1．2．1臭氧幸6备本实验使用的臭氧发生器组主要由SOZ—YW一200G(空气源)型臭氧发生器、HRT--7．5A冷冻干燥机、Vw一0．64／7无油空压机和水冷系统等组成。制备臭氧时，接通电源，首先启动水冷凝器，然后启动冷冻干燥机，再打开无油空压机出气阀门，最后开启臭氧发生器。由于该臭氧发生器组臭氧产生量较大，而作为臭氧处理室的干燥器体积有限，如果直接将臭氧发生器的臭氧出口与臭氧处理室连接，在极短时间内便可使臭氧处理室内的臭氧浓度达到很高，远远高于实验所需的浓度。为此，本实验采用一个储气瓶作为缓冲室，首先将产生的臭氧收集于该缓冲室，再利用微型

7、真空泵将缓冲室内的臭氧抽人臭氧处理室。该方法一方面降低了进人臭氧处理室的臭氧浓度，可达到实验所需浓度；另一方面由于臭氧的不稳定性[5]，臭氧处理室内的臭氧浓度不断减少，根据臭氧浓度的变化可通过开启真空泵进行臭氧补充，从而使处理室内的臭氧浓度维持在一定的范围内。1．2．2臭氧对黄曲霉、黑曲霉的生长抑制效果实验本实验采用菌落生长法测定臭氧对黄曲霉、黑曲霉两种主要储粮真菌的生长抑制效果[6]。在无菌条件下，将黄曲霉、黑曲霉接种在高盐察氏培养基平板上，28"C恒温条件下培养至菌落刚刚长出(约36h，此时菌落直径约3mm)。分别用质量浓度130mg／ma、1

8、50mg／ms、170mg／ma、190mg／ms左右的臭氧处理4h、5h、6h、7h、8h、9h，以不用臭氧处理作为空白