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《迁地保护黄檗群体的遗传多样性评价_闫志峰》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、第33卷第10期中国中药杂志Vo.l33,Issue102008年5月ChinaJournalofChineseMateriaMedicaMay,2008迁地保护黄檗群体的遗传多样性评价*闫志峰,张本刚,张昭(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京100094)[摘要]目的:评价迁地保护黄檗群体的遗传多样性水平。方法:利用8对荧光引物,对10个迁地保护黄檗群体共计67株个体进行AFLP分析。结果:共扩增1574条谱带,其中多态带1354条;黄檗物种水平的遗传多样性高于迁地保护群体水平,多态位点百分率PPL分别是86102,41155,有效等位基因数Ne分别为11427
2、5,112376,Nei基因多样性指数H分别是012312,011400,Shannon信息指数I分别是013973,012113。结论:初步评价了黄檗迁地保护效果。[关键词]珍稀濒危药用植物;黄檗;迁地保护;AFLP;遗传多样性;[中图分类号]R282.5[文献标识码]A[文章编号]1001-5302(2008)10-1121-06[9,10]黄檗PhellodendronamurenseRupr.为芸香科黄檗在以往迁地保护以及调查研究的基础上,[1]属植物,系第三纪古热带植物区系的孑遗植物,为选取来自10个地区的黄檗迁地保护群体个体进行[2]常用中药材关黄柏的基源植物,是我国
3、珍贵的药用实验(表1)。中国医学科学院北京药用植物园所保和用材树种。曾广泛分布于我国东北的吉林、黑龙护的7个迁地保护群体(THA,THB,JH,Q,W,F,江、辽宁等地,由于长期过量的林木采伐和不合理药BJ)及中国科学院植物研究所植物园(南)(X)和北材采收,资源量越来越少,野生黄檗的生存状况十分京植物园(北)(Y)所保护的2个迁地保护群体的样严峻,极易陷入濒危的状态,在5中国植物红皮书)))品采幼嫩叶片放入自封袋中,-20e迅速冷冻保[3]稀有濒危植物6第1册中,黄檗被列为渐危种,国家存;哈尔滨国家森林植物园(H)的样品采用10倍量2级保护植物。根据作者多年野外调研发现,野生黄
4、的变色硅胶(青岛海洋化工有限公司)12h内快速檗多散生分布,且成年树下很少有实生苗出现,分布干燥。实验采用北京鼎国生物技术有限公司的区持续缩小,因此开展黄檗保护研究已是势在必行。FISH-AFLP试剂盒。DNA分子标记技术已广泛用于濒危植物遗传表1黄檗迁地保护群体的取样情况[4,5]多样性研究,目前在评价迁地保护群体遗传多种源地群体编号采集地取样数/株样性上也有利用[6]。扩增的限制性片段长度多态通化THA中国医学科学院药用植物园10[7]通化THB中国医学科学院药用植物园9性(amplifiedfagmentlengthpolymorphisms,AFLP)抚松F中国医学科学院
5、药用植物园10是一种高效的显性遗传标记,结合了RFLP的专一蛟河JH中国医学科学院药用植物园6性和RAPD技术的随机性、高效性,是新一代的分泉阳Q中国医学科学院药用植物园3湾沟W中国医学科学院药用植物园5子标记技术,本实验采用荧光标记引物扩增产物在不详BJ中国医学科学院药用植物园9[8]自动测序仪上扫描鉴定,分析和评价了迁地保护不详Y北京植物园6黄檗群体的遗传多样性和保护效果。不详X中国科学院北京植物所植物园4不详H哈尔滨国家森林植物园51材料与方法1.2总DNA制备1.1材料[11,12]本实验称取材料012g,采用CTAB法提取DNA,018%琼脂糖电泳检测DNA纯度、完整性
6、及产[收稿日期]2007-03-10-1量,DNA质量浓度大约为50ng#LL。[基金项目]国家中医药管理局科学技术研究专项(04-05ZP07);北京市教委重点学科共建项目(XK100230448)1.3AFLP实验[7][通讯作者]*张昭,Te:l(010)62899773,E-mai:lzhangzhao1962@AFLP方法参照VOS等的方法,其中酶切和连tom.com接采用一步法进行,预扩增反应参考北京鼎国生物技#1121#第33卷第10期中国中药杂志Vo.l33,Issue102008年5月ChinaJournalofChineseMateriaMedicaMay,2
7、008术有限公司FISH-AFLP试剂盒说明。利用2组DNA别是P-GAA/M-CTG,P-GAA/M-CTT,P-GAC/M-CTT,样品从64对AFLP引物中(PsÑt/MseÑ)(表2)筛选出P-GAC/M-CAC,P-GTT/M-CAA,P-GTT/M-CAC,P-扩增图谱清晰的8对引物对进行选择性扩增反应,分GTT/M-CTG,P-GTT/M-CTT。表2AFLP接头和引物序列DNA接头和引物核苷酸序列备注PstÑ接头15c-CTCGTAGACTGCGTACATGCA-
