iNKT细胞发育、分化及其在MSU晶体诱导性痛风性关节炎中的作用机制探究.pdf

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1、分类号：R73                                                    密级：公开 UDC：610                                                     学校代码：11065博士学位论文iNKT细胞发育、分化及其在MSU晶体诱导性痛风性关节炎中的作用机制探究作者姓名王杰指导教师王颜刚教授专业领域内科学（内分泌与代谢病）培养单位医学院答辩日期2018年5月17日iNKT细胞发育、分化及其在MSU晶体诱导性痛风性关节炎中的作用机制探究摘要目的：本实验旨在探究HDAC3,JMJD3对iNKT细胞

2、的发育、成熟及其对痛风性关节炎的影响。方法：首先检测Vα14转基因（Vα14TG）小鼠胸腺中不同发育阶段iNKT细胞中HDAC3及JMJD3mRNA的表达谱；应用CD4Cre系统对小鼠胸腺HDAC3或JMJD3特异性敲除，流式细胞技术比较同窝野生型小鼠（WT）及HDAC3或JMJD3敲除型小鼠（HDAC3KO或JMJD3KO）胸腺及外周免疫器官中iNKT细胞的发育分化情况；并利用CD1dKO小鼠背部气囊模型、腹腔模型及体外骨髓来源性巨噬细胞(BMDM)/iNKT细胞共孵育等实验等探究iNKT细胞对MSU晶体诱导性痛风性关节炎的探究。结果：我们发现，HDAC3及JMJD3mRNA在iN

3、KT细胞发育不同阶段特意表达。胸腺细胞特异性敲出HDAC3将导致小鼠胸腺及外周免疫器官中iNKT细胞数目显著降低，并表现凋亡相关蛋白表达升高。残存iNKT细胞主要阻断在ST1及ST2阶段。与此同时，敲出JMJD3，iNKT细胞数目略减少但并不影响其成熟。但有趣的是，缺失JMJD3严重影响NKT17细胞的分化。HDAC3KO及JMJD3KO小鼠骨髓细胞移植实验表明HDAC3及JMJD3对iNKT细胞的影响是细胞固有性质。iNKT细胞的功能实验证实iNKT细胞缺失导致小鼠MSU晶体诱导性痛风性关节炎症加重，BMDM/iNKT细胞共孵育实验发现iNKT细胞促进BMDM细胞的M2极化并保护M

4、SU晶体诱导的痛风性炎症。结论：HDAC3及JMJD3对小鼠胸腺iNKT细胞的正常发育及分化有重要作用。另外，iNKT通过促进巨噬细胞M2极化，减轻小鼠MSU晶体诱导痛风性炎症的发生。博士研究生：王杰（内分泌与代谢病）指导老师：王颜刚教授米庆胜教授周丽教授关键词：HDAC3；JMJD3;iNKT细胞；痛风炎症ⅠiNKTcellsdevelopmentandtheirrolesinMSUcrystalinducedgoutyinflammationinmicemodelAbstract1,21121JieWang,QuanhuiZhang,YangangWang,LiZhouQing-

5、ShengMi1CenterforCutaneousBiologyandImmunologyResearch,DepartmentofDermatology,2HenryFordHealthSystem,Detroit,Michigan,USA48202EndocrinologyDepartments,theAffiliatedHosptialofQingdaoUniversity,Qingdao,Shandong,China266000Background：InvariantnaturalkillerT(iNKT)cellsareinnate-likeTcellsthatregul

6、atedifferentimmuneresponse.However,iNKTcellsdevelopmentandfunctioninMSUcrystalinducedgoutyinflammationarestillunclear.Method:Weusedq-PCRtoidentifyHDAC3andJMJD3expressionindifferentdevelopmentalstagesofthymusiNKTcellsinVα14transgenicmice.ThenwegeneratedaTcellspecificHDAC3knockout(KO)andJMJD3KOmi

7、cetostudytherolesofHDAC3iniNKTcelldevelopmentanddifferentiation.Then,air-pouchmodelandperitonealmodelwereusedinMSUcrystalinducedgoutyinflammationinvivostudy.Thetotalinfiltratingcells,includingtherecruitmentofneutrophilsandmacropha