复合益生菌在凡纳滨对虾苗种培育中的应用及评价.pdf

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1、学校代码：10264研究生学号：M150104120上海海洋大学硕士学位论文复合益生菌在凡纳滨对虾苗种培育题目：中的应用及评价EffectsofcomplexprobioticsintheseedbreedingofLitopenaeus英文题目：vannamei专业：临床兽医学研究方向：水产病害防控姓名：孙博超指导教师：宋晓玲研究员二O一八年五月日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得

2、的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学

3、位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会人员名单姓名工作单位职称是否硕士导备注师孙黎中科院海洋所研究员是主席聂品青岛农业大学教授是委员站文斌中国海洋大学教授是委员潘鲁青中国海洋大学教授是委员李健黄海水产研究所研究员是委员李晨黄海水产研究所研究员是委员答辩日期2018年5月24答辩地黄海所１号楼３楼会议室日点上海海洋大学硕士学位论文复合益生菌在凡纳滨对虾苗种培育中的应用及评价

4、EffectsofcomplexprobioticsintheseedbreedingofLitopenaeusvannamei学位论文完成日期：指导教师签字：答辩委员会成员签字：上海海洋大学硕士学位论文复合益生菌在凡纳滨对虾苗种培育中的应用及评价摘要随着经济迅速发展，人们对水产品的需求日益增加，水产养殖规模不断扩大，养殖密度不断增大，导致水环境的生态平衡遭到威胁。抗生素以及化学药物带来的负面影响有目共睹，现在水产养殖行业急需一条健康的可持续发展的道路。益生菌作为一种微生态制剂，不仅可以改善水体环境，并能抑

5、制或杀死水体中的病原菌，还可以促进水产动物的生长提高水产动物的免疫力。凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)作为我国主要的水产养殖动物之一，具有较高的经济价值。凡纳滨对虾养殖的成败与其苗种质量密切相关。凡纳滨对虾幼体时期需要经过多个变态过程，伴随着形态、生活习性、食性的转变以及免疫系统的形成。本研究从水样中筛选分离具有功能性的菌株，与本实验室保藏菌株进行配伍后应用于凡纳滨对虾苗种培育过程中，分析复合益生菌对对虾幼体体内微生物组成的影响，探究复合益生菌在凡纳滨对虾苗种培育中的应用潜力。研究主要内

6、容如下：1、海水中硝化细菌及产酸细菌的分离鉴定不同的益生菌具有不同的功能，随着养殖水体中氮浓度的快速上升，导致水体的自净能力严重下降。而且氨氮和亚硝酸对水生动物具有一定的毒性，影响水产动物的健康和生长。而硝化细菌具有降低养殖水体氨氮的功能。乳酸菌是一种能够发酵碳水化合物产生乳酸的微生物。乳酸菌定植在动物体内，产生乳酸，从而减少病原菌的数量。本实验从水样中经过选择性培养基的筛选，筛选出能够有效利用亚硝酸盐的优势菌株和能够产酸的优势菌株。并通过16srRNA方法进行鉴定，并且构建系统发育树。结果显示BC109为

7、芽孢杆菌，BC702为肠球菌。血平板结果说明两株菌在数量达到1×106CFU时不具有溶血活性，这表明这两株菌可以作为益生菌在水产养中进行应用。2、复合益生菌配方的筛选为了预防对虾急性肝胰腺坏死综合征（Acutehepatopancreasnecrosissyndrome,AHPNS）等病害的发生与流行，越来越多的微生态制剂被应用到凡纳滨对虾的养殖过程中。本研究中，我们对复合益生菌配方以及添加方式进行筛选。选取5种益生菌，分别为：假交替单胞菌CDM8、蜡样芽孢杆菌PC465、短小芽孢杆菌LV012、I上海海洋

8、大学硕士学位论文芽孢杆菌BC109以及肠球菌BC702，以及一株具有PirA和PirB毒力基因的副溶血弧菌。首先，我们对5种益生菌之间的相互拮抗作用进行检测，检测结果表明假交替单胞菌CDM8对其他四株菌都具有拮抗作用。对益生菌进行配伍，并以不同方式进行添加。添加益生菌后，对水体中的总菌数（TBC）和总弧菌数（VBC）进行监测，结果表明假交替单胞菌CDM8与短小芽孢杆菌LV012和芽孢杆菌BC109交替添加和假交替