黄芩苷对动物过敏性哮喘的治疗作用及作用机制研究

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生虢舐新擗一僻咖一／曰镣黪艘矽≯曰研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论

2、文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导师签章：讯弩z／d口，3年厂月oJ日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5研究论文黄芩苷对动物过敏性哮喘的治疗作用及作用机制研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ll刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ll材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～．．12结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22匀日7K⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·‘附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43综述儿童支气管哮喘发病机制研究进展以及中药在治疗哮喘中发挥的作用⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．47致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯．58中文摘要黄芩苷对动物过敏性哮喘的治疗作用及作用机制研究摘要目的：本课题研究黄芩苷对于豚鼠以及哮喘模型小鼠的治疗作用，并对其

4、可能的作用机制进行初步研究。方法：1黄芩苷对豚鼠离体气管的影响作用取离体豚鼠气管，将豚鼠气管剪成宽约3mm，长约20mm的螺旋气管条，悬挂于盛有20mlK．H营养液的恒、温(37。C-4-0．5)的麦式浴槽中，上端接肌肉张力换能器，传入RM6240B／C生物医学信号采集处理系统，观测不同浓度的黄芩苷溶液对乙酰胆碱(Ach)或组胺(His)诱发的豚鼠气管平滑肌收缩的影响。2黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的影响作用：30只健康豚鼠，雌性，体重200士209，随机分为5组，于4L密闭玻璃钟罩内用乙酰胆碱及组胺混合溶液引喘，分别给予黄芩苷和阳性对照药雾化吸入后，观察豚鼠状态，记录豚鼠引喘

5、潜伏期。3小鼠哮喘模型实验3．1小鼠哮喘模型的制备48只SPF级健康BALB／cd',鼠，随机分为6组，分别为正常组，模型组，阳性药组，黄芩苷低中高剂量给药组。采用卵蛋I刍(OVA)致敏，激发，制作小鼠支气管哮喘模型，观察记录实验动物造模前后精神状态，生理指征。第0、7天卵蛋I兰t(OVA)致敏液腹腔注射致敏，从第14天起开始雾化吸入2％卵蛋白溶液激发，连续6天，每天一次，每次30分钟；给药组激发前1小时雾化吸入给予黄芩苷低、中、高剂量中性溶液，空白对照组致敏液，激发液，治疗药液均用0．9％生理盐水替代，第2l天取材。3．2检测模型小鼠免疫器官脏器系数迅速摘取实验模型小鼠

6、脾脏以及胸腺，记录哮喘小鼠模型试验中各组小鼠脾脏及胸腺脏器系数。3．3HE染色法观察各组小鼠肺脏组织的形态变化。迅速摘取实验模型小鼠左侧肺脏，置于中性4％甲醛溶液中固定，石中文摘要蜡包埋，切片，苏木精一伊红染色，观察各组哮喘模型小鼠肺脏组织的形态学变化。3．4ELISA(酶联吸附实验)法检测各组小鼠血清中几．4，IFN-y的含量。取各组哮喘模型小鼠血，静置1小时后离心取上层血清，ELISA试剂盒检测各组哮喘模型小鼠血清中m-4，IFN-y的含量。3．5应用RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)技术检测各组小鼠IL．4，IFN-y的mRNA的表达水平。取实验模型小鼠右侧肺脏，

7、提取各组模型小鼠肺脏组织总RNA，应用RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)技术检测各组哮喘模型小鼠肺脏组织中m．4，IFN—y的mRNA的表达水平。结果：l黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的作用豚鼠引喘潜伏期实验中，黄芩苷能够延长组胺和乙酰胆碱混合喷雾所引起的豚鼠引喘潜伏期，中剂量及高剂量(15mg／ml、50mg／m1)与对照组具有显著差异(P<0．05)，说明黄芩苷能对组胺和乙酰胆碱混合喷雾所引起的豚鼠药物性哮喘具有保护作用，能够改善乙酰胆碱和组胺引起的支气管痉挛。2黄芩苷对离体豚鼠气管的舒张作用黄芩苷对乙酰胆碱和组胺诱导的气管平滑