虾夷扇贝应答高温变化的相关生理生态学研究

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1、分类号密级UDC编号硕士学位论文虾夷扇贝应答高温变化的相关生理生态学研究贲月（1013001）指导教师姓名常亚青教授专业名称动物遗传育种与繁殖论文答辩日期2013年6月8日学位授予日期2013年月日MasteralDissertationStudyonthephysiologicalecologyoftheMizuhopectenyessoensisresponsetohightemperaturechangeMasterCandidate:BenYueSupervisor:Professor.ChangYa-qingLifeScienceAndThchnologyInstitute，

2、DalianOceanUniversity，Dalian，Liaoning，P.R.ChinaApr.2013本研究由国家海洋局公益项目(201205031);农业部“948”项目（2011-G12）;国家“863”（2012AA10A410）;辽宁省教育厅项目（L2011118）;资助摘要摘要本论文以虾夷扇贝为实验材料，采用实验生理学、生态学、组织学及分子生物学方法，分别对不同规格、不同壳色及不同家系的虾夷扇贝进行高温刺激实验，并检测其存活、耗氧、排氨及各项免疫指标，探明高温刺激下虾夷扇贝各组织中HSP70表达量的时空变化规律，了解高温刺激下虾夷扇贝鳃组织结构变化规律。主要研究结果如

3、下：（1）在实验室内检测了虾夷扇贝对高温突变的耐受能力及在不同高温水平下的存活、耗氧率、排氨率、相关免疫酶活力、HSP70表达量及鳃组织结构变化。结果显示，经96h胁迫，15-24℃处理组间虾夷扇贝的存活无显著差异（P＞0.05），且均大于82.29%。但26℃处理组虾夷扇贝在经12h胁迫后，其存活降为0。虾夷扇贝在8-、12-、24-、48-和96h半致死温度（LT50）分别为27.52、24.41、24.37、24.24和23.81℃。另外，在高温胁迫后，虾夷扇贝体腔液中CAT和T-AOC含量变化显著（P＜0.05），其中，22、24和26℃处理组在胁迫8h时达到最高值，之后恢复到

4、对照组水平，而MDA含量和SOD活力随着胁迫时间的延长与对照组差异不明显。高温下虾夷扇贝不同组织HSP70表达量的变化显示：鳃组织HSP70表达量显著高于外套膜和闭壳肌两组织HSP70表达量（P＜0.05），随温度升高，各组织的HSP70表达量呈上升趋势。高温变化下虾夷扇贝鳃组织的结构变化表明：随温度升高，鳃小瓣厚度、鳃丝宽度和丝间隔均显著减小（P＜0.05）；鳃小腔和瓣间隔在温度15-20℃之间时，变化不显著（P＞0.05），但当温度达到24℃时，鳃小腔和瓣间隔扩张明显（P＜0.05）。（2）实验室内检测了2种规格虾夷扇贝在不同高温水平下的存活、耗氧、排氨和免疫指标。结果显示，缓慢升

5、温实验中，15-22℃处理组之间虾夷扇贝存活均大于90%，且组间无显著差异（P＞0.05），但在28-30℃时大贝存活显著高于小贝（P＜0.05）。小贝在15-24℃之间随温度升高代谢水平增强，24℃时开始下降；大贝在15-26℃时代谢水平随温度升高代谢水平增强，26℃时降低。大、小贝各项免疫指标均随温度升高呈现先上升后下降的趋势，小贝在24℃达到最高值，大贝在26℃达到最高值。（3）实验室内检测了“枫叶贝”、“红贝”和“白贝”3种壳色虾夷扇贝在不同高温水平下的存活、耗氧、排氨和免疫指标。结果显示：15-22℃处理组之间虾夷扇贝存活均大于90%，且组间无显著差异（P＞0.05），但26

6、℃时“枫叶贝”存活较其它壳色虾夷扇贝低，且差异显著（P＜0.05）。15-24℃期间，随着温度升高，三种壳色虾夷扇贝的耗氧和排氨均显著升高，但当温度达到26℃时，虾夷扇贝的耗氧和排氨均显著下降。另外，虾夷扇贝T-AOC水平、CAT、SOD和POD的活力随温度上升呈先上升后下降的趋势，在24℃时达到最高值，并在26℃时显著下降。（4）在实验室内检测了5个家系（r2、w5、wr2、w1和rron）虾夷扇贝在高温变化下的存活及相关免疫指标的变化规律。结果表明，当温度升到29℃时，三个家系死亡率I摘要超过50%，此时w1虾夷扇贝存活最高，为63%，其次为w5，存活为57%，但wr2虾夷扇贝存活

7、最低，为10%。各家系间CAT、T-AOC和POD活力相比均呈显著差异（P＜0.05），SOD活力差异不显著（P＞0.05）。关键词：虾夷扇贝；高温；存活；免疫；HSP70IIAbstractAbstractInthispaper,Imadeslowheatingexperimentsandrapidheatingexperimentusingexperimentalphysiology,ecology,histologiclandmolecu