紫贻贝和虾夷扇贝雌核发育二倍体的遗传学研究

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1、中国海洋大学谨以此论文献给我的导师、我的父母------齐明君紫贻贝和虾夷扇贝雌核发育二倍体的遗传学研究学位论文答辩日期：指导教师签字：答辩委员会成员签字：独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日---------------

2、------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下事项：1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》

3、。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日紫贻贝和虾夷扇贝雌核发育二倍体的遗传学研究摘要紫贻贝(Mytilusgalloprovincialis)和虾夷扇贝(Patinopectenyessoensis)都是我国著名的海水养殖经济贝类，本实验探索了紫贻贝和虾夷扇贝雌核发育发生的最适宜条件，并对其遗传学特性进行了相关的研究。1.紫贻贝雌核发育二倍体的遗传学研究本实验首先探索诱导紫贻贝(Mytilusgalloprovincialis)雌核发育二倍体的最7佳条件，实验中，首先对既定浓度为1.0×10个/mL的

4、精液进行紫外线的梯度照2射，发现在紫外线强度为2561μW/(cm·s)的照射条件下，持续照射60s是最合适的照射剂量。在梯度照射实验中发现，随着紫外线照射时间的增加，卵裂率、早期胚胎存活率和D形幼虫发生率的数值总体呈下降的趋势，且有Hertwig效应出现，在照射时间达到55s以后，D形幼虫发生率变为0。在受精后25min，用浓度0.5μg/mL的细胞松弛素B持续处理受精卵20min以阻止第二集体的排出，成功的诱导出紫贻贝的第二极体抑制型的雌核发育二倍体。微卫星分析表明,雌核发育二倍体诱导成功率为100%。本实验研究了6个微卫星位点在两个雌核发育二倍体家系中的分

5、离情况，两个家系中雌核发育二倍体的诱导成功率均为100%。观测到的8组基因型标记均符合孟德尔遗传规律（p＜0.05）。8个微卫星位点中有1个存在无效等位基因。通过杂合后代的比率计算出重组率y的范围是0.24到0.67，平均值为0.38。在假设完全干涉的前提下，微卫星-着丝粒距离范围为12cM-34cM。2.虾夷扇贝雌核发育二倍体的遗传学研究诱导虾夷扇贝(Patinopectenyessoensis)雌核发育二倍体采用紫外线照射使精子遗传物质失活，用细胞松弛素B(CB)处理受精卵抑制第二极体释放。用强度2为2561μW/(cm·s)的紫外线(254nm)照射不同时

6、间的精子与正常卵子受精。结果发现随照射时间的增加，卵裂率、早期胚胎存活率和D形幼虫发生率总体呈I下降趋势，照射50s为最适宜的照射剂量。受精后45min，用浓度0.5μg/mL的CB处理受精卵20min抑制第二极体的释放，诱导出虾夷扇贝雌核发育二倍体。微卫星分析表明,雌核发育二倍体诱导成功率为100%。本实验筛选了32个微卫星位点在3个雌核发育二倍体家系中的分离情况，通过半四分子分析的研究进一步进行着丝粒图谱的构建。三个家系中雌核发育二倍体的诱导成功率分别为100%，100%和96%。观测到的53组基因型标记中有51组在经过顺序邦弗朗尼校正后符合孟德尔遗传规律（

7、p＜0.05）。32个微卫星位点中有6个存在无效等位基因。通过杂合后代的比率计算出重组率y的范围是0.07到0.85，平均值为0.37，发现在虾夷扇贝的某些染色体上存在交叉干涉现象。在假设完全干涉的前提下，微卫星-着丝粒距离范围为4cM–42cM。本研究通过着丝粒与微卫星之间的遗传距离完善遗传图谱的构建，为虾夷扇贝的遗传育种研究提供了重要的参考资料。关键词：紫贻贝，虾夷扇贝，雌核发育二倍体，半四分体分析，微卫星，标记-着丝粒重组率，着丝粒作图IIGeneticstudiesongynogeneticdiploidsinMytilusedulisandPatino

8、pectenyessoe