【达人学社】拟南芥叶卷曲突变体lcd的遗传分析及基因定位

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1、2010年3月湖南师范大学自然科学学报Vol.33No.1第33卷第1期JournalofNaturalScienceofHunanNormalUniversityMar.,2010拟南芥叶卷曲突变体lcd的遗传分析及基因定位11111213周继业,袁玉菊,顾佳宁,于峰,田连福,朱俊林,李东屏(11湖南师范大学生命科学学院,中国长沙410081;21湖南师范大学公共管理学院,中国长沙410081)摘要对拟南芥叶卷曲突变体lcd的表型观察表明:在幼苗期,从第一片真叶开始叶片向下卷曲,且叶张角变大;在莲座叶成熟后,与野生型相比,叶片尖端较钝,基部

2、较宽,叶柄较短.通过遗传分析得知该突变为隐性单基因突变.采用图位克隆技术,将该突变基因初步定位于拟南芥的第3号染色体上,且与分子标记GAPAB紧密连锁.该研究为克隆该基因和阐明该基因的功能奠定了基础.关键词拟南芥;lcd突变体;叶卷曲;图位克隆;SSLP中图分类号S511文献标识码A文章编号100022537(2010)0120096205GeneticAnalysisandMappingoftheLeafCurvatureMutantlcdinArabidopsisthaliana11111213ZHOUJi2ye,YUANYu2ju,GU

3、Jia2ning,YUFeng,TIANLian2fu,ZHUJun2lin,LIDong2pingAbstractThephenotypeofleafcurvaturemutant,lcdinArabidopsisthalianashowsthattheleavesofthismutantcurldownwardfromthefirsttrueleafatitsseedlingstage,itsleafangleislargerthanthatofthewild2typeatthesamestage,anditsmaturerosettel

4、eavesbecomeblunter,withlongerbladesandshorterpetioles.Genetica2nalysisindicatesthatthemutationiscontrolledbyasinglerecessivegene.Themutantgenewaslocalizedonchro2mosome3ofArabidopsisbymapping,whichwascloselylinkedtoSSLPmolecularmarkerGAPAB.KeywordsArabidopsisthaliana;lcdmuta

5、nt;leafcurvature;mapping;SSLP[122][3][4]植物体叶片的发育受基因、环境和激素等因素共同调节.叶极性的建立直接决定叶的平展性发[5]育,极性改变会破坏大多数植物叶的平展性,影响植物体的光合作用、蒸腾作用、呼吸作用等生理功能.因[627]此,参与叶极性建成的属性基因或作用于激素信号途径的基因发生突变,都会导致叶形态异常.目前,国内外科学家已从拟南芥等植物中分离出了一些发生叶卷曲的突变体,卷曲类型可分为,叶上卷(即偏下性生[8][9]长),如hasty25;叶下卷(即偏上性生长),如Icu和叶片卷皱等.植物叶发

6、育研究在最近几年取得了较大[10211]进展,许多叶发育相关的基因已经被揭示出来,microRNA(miRNA)也参与了调控植物器官极性分[12213]化,但有关叶发育分子调控的信号途径仍不明了.lcd突变体是一个利用T2DNA插入诱发叶片发育异常的突变体,对其进行遗传分析和基因定位,为了解叶片极性或叶卷曲发生的遗传规律,研究叶发育的调控机理都具有一定的理论意义.3收稿日期:2009201208基金项目:国家自然科学基金资助项目(30970273);湖南省科技厅基金资助项目(2007ZK3010);湖南省教育厅基金资助项目(07C562)3通

7、讯作者,E2mail:dongbing-lee@yahoo.com.cn第1期周继业等:拟南芥叶卷曲突变体lcd的遗传分析及基因定位971材料与方法1.1材料与试剂拟南芥(Arabidopsisthaliana)野生型为Columbia(Co1)生态型与Lansbergerecta(Ler)生态型,突变体为lcd突变体,突变体亲本是Col生态型;rTaqDNA聚合酶为Ambiogen公司产品;标准DNA分子量Marker(DNAMarkeⅠr)为TIANGEN公司产品;寡核苷酸引物合成(PAGE纯化)及DNA序列测定由上海生工公司完成.1.2

8、实验方法1.2.1拟南芥突变体lcd的表型观察用数码相机(SONY,DSC2S85)近距离拍摄植株整体形态或新鲜的离体器官;测量叶片长度和面积.1.2.2突变体的遗

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