果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响

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广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响摘要本试验旨在研究果寡糖（FOS）和地衣芽孢杆菌（BL）对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响。试验选取28±1日龄断奶仔猪240头，随机分为6组，每组4个重复（栏），每重复10头猪，公母各半，进行为期28d饲养试验。I组为对照组，饲喂基础饲粮，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组分别饲喂基础饲粮添加0.2%FOS、0.4%FOS、1999×10CFU/kgBL、0.2%FOS+1×10CFU/kgBL、0.4%FOS+1×10CFU/kgBL的试验饲粮。试验结果表明：（1）生产性能：与Ⅰ组比较，Ⅱ组～Ⅵ组的平均日增重分别提高了16.13%、19.35%、12.90%、6.45%和16.13%（P>0.05）；Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅵ组的饲料/增重比均显著降低（P<0.05）；Ⅱ组～Ⅵ组的腹泻率分别降低了12%、42%、30%、10%和27%（P>0.05）；Ⅳ组的发病指数以及Ⅲ组、Ⅳ组的发病率均显著降低（P<0.05）；Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组饲粮粗蛋白表观消化率、Ⅱ组和Ⅵ组粗纤维表观消化率、Ⅳ组和Ⅵ组粗灰分表观消化率以及Ⅵ组的磷表观消化率均显著提高（P<0.05）。（2）血液生理生化指标及免疫器官指数：Ⅴ组的血清总蛋白、Ⅱ组的白蛋白、Ⅲ组的球蛋白含量和Ⅳ组的谷草/谷丙比值；Ⅵ组血液白细胞数、Ⅳ组和Ⅵ组的淋巴细胞数、Ⅱ组～Ⅳ组的淋巴细胞百分比以及Ⅴ组的单核细胞数均显著高于Ⅰ组（P<0.05）；而其余血液生理生化指标各组间差异不显著（P>0.05）。I 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响Ⅳ组的腹股沟淋巴结指数、Ⅲ组的脾脏指数和Ⅵ组的胰脏指数均较Ⅰ组显著提高（P<0.05）。（3）肠道内环境：与Ⅰ组比较，Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组空肠和盲肠pH以及Ⅲ组的回肠pH均显著降低（P<0.05）;Ⅲ组空肠食糜粘度显著降低（P<0.05）；Ⅲ组和Ⅳ组猪十二指肠绒毛长度和宽度、Ⅳ组和Ⅵ组十二指肠绒毛长度/隐窝深度（V/C）值、Ⅳ组空肠绒毛长度、Ⅵ组回肠绒毛长度和Ⅲ组回肠绒毛宽度均显著提高（P<0.05）；而Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组空肠绒毛宽度极显著降低（P<0.01）。与Ⅰ组比较，空肠前段，Ⅲ组大肠杆菌数显著降低，而Ⅲ组和Ⅵ组乳酸杆菌数以及Ⅵ组双歧杆菌数均显著增加（P<0.05）；空肠后段，Ⅳ组大肠杆菌以及Ⅲ组和Ⅳ组的沙门氏菌均显著降低，而Ⅲ组和Ⅵ组乳酸杆菌以及Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的双歧杆菌数均显著提高（P<0.05）；回肠，Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组大肠杆菌以及Ⅵ组沙门氏菌均显著降低，而Ⅲ组和Ⅵ组的乳酸杆菌和双歧杆菌均显著提高（P<0.05）；盲肠，Ⅲ组沙门氏菌、Ⅳ组和Ⅵ组大肠杆菌和沙门氏菌均显著降低，而Ⅳ组双歧杆菌、Ⅲ组和Ⅵ组乳酸杆菌及双歧杆菌均显著提高（P<0.05）；结肠，Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组大肠杆菌和沙门氏菌数均显著降低，而Ⅳ组乳酸杆菌、Ⅲ组和Ⅵ组的乳酸杆菌及双歧杆菌均显著提高（P<0.05）。综上所述，果寡糖及地衣芽孢杆菌的使用能一定程度提高断奶仔猪保育期日增重，降低仔猪发病和死亡率，有效降低饲料/增重比，提高饲料转化率，提高粗蛋白的表观消化率；一定程度上改善血液生理生化功能，提高免疫器官指数；有效降低各肠段pH值，提高小肠绒毛长度和绒毛宽度，提高V/C值；有效抑制各肠段中大肠杆菌和沙门氏菌等有害菌，促进各肠段中乳酸杆菌和双歧杆菌的等有益菌生长繁殖，改善肠道微生态环境，有益动物健康。II 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响关键词：果寡糖地衣芽孢杆菌肠道菌群小肠黏膜形态生产性能血清生化指标III 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响TheEffectsofFructo-oligosaccharidesandBacillusLicheniformisonPerformance,BloodPhysiologicalandBiochemicalIndexesandIntestinalFlorainWeaningPigletsABSTRACTThisexperimentwastoinvestigatetheeffectsofFructo-oligosaccharides(FOS)andBacilluslicheniformis(BL)onperformance,bloodphysiologicalandbiochemicalindexesandintestinalflorainweaningpiglets.240weaningpigletswhichwere28±1daysoldwereselectedanddividedinto6froupsrandomly,with4repeatsofeachgroupand10weaningpigletsineachrepeat,5malesand5females.Theexperimentwasdesignedina2x3factorialforfeedingtrialof28days.GroupIwasthecontrolgroupfedbasicdiet(BD);GroupⅡ,Ⅲ,Ⅳ,9Ⅴ,ⅥwasfedBDsupplementedwith0.2%FOS,0.4%FOS,1×10CFU/kgBL,0.2%99FOS+1×10CFU/kgBL,0.4%FOS+1×10CFU/kgBLrespectively.Theresultsofexperimentsshowthat:(1)productionperformance：ComparedwithGroupI,theaveragedailygain(ADG)ofGroupⅡ-Ⅵwereincreasedby16.13%,19.35%,12.90%,6.45%and16.13%respectively(P>0.05);thefeed-gainratiosofGroupⅡ,ⅢandⅥweredecreasedsignificantly(P<0.05);thediarrheaindexofGroupⅡ-Ⅵwasdecreasedby12%,42%,30%,10%and27%respectively(P>0.05);thediseaserateofGroupⅢandⅣweredecreasedSignificantly(P<0.05);theapparentdigestibilityofdietarycrudeprotein(CP)ofGroupⅢ,ⅣandⅥ,theapparentdigestibilityofcrudeIV 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响fiber(CF)ofGroupⅡandⅥ,theapparentdigestibilityofcrudeashofⅣandⅥ,andtheapparentdigestibilityofphosphorus(P)ofgroupⅥallshowedsignificantincreasing(P<0.05).(2)physiologicalandbiochemicalindexesofbloodandImmuneorgansindexes:comparedwithGroupI,thetotalprotein(TP)contentofGroupⅤ,thealbumin(alb)contentofGroupⅡ,theglobulin(glo)contentofGroupⅢ,theratioofAST/ALTofGroupⅣwereallincreasedsignificantly(P<0.05);thewhitebloodcount(WBC)ofGroupⅥ,theabsolutelymphocyte(LYM)ofGroupⅣandⅥ,thelymphocytepercentage(LYM%)ofGroupⅡ,ⅢandⅣ,andthebsolutemonocyte(MONO)ofGroupⅤallshowedsignificantlyincreasing(P<0.05);theinguinallymphnodeindexofGroupⅣ,thespleenindex(SI)ofGroupⅢ,andthepancreasindexofGroupⅥwereallincreasedsignificantly(P<0.05).(3)intestinalenvironment:comparedwithGroupI,thejejunumPhandcecumpHofGroupⅢ,ⅣandⅥ,theileumpHofGroupⅢandtherelativeviscosityofchimeinjejunumofGroupⅢallshowedsignificantlydecreasing(P<0.05);thevilliheightandvilliwidthofduodenumofGroupⅢandⅣwereincreasedsignificantly(P<0.05),whilethecryptdepthandvilliheight/cryptdepth(V/C)ofduodenumofGroupⅣandⅥweredecreasedsignificantly(P<0.05);thevilliheightofjejunumofGroupⅣandthevilliheightofileumofGroupⅥandthevilliWidthofileumofGroupⅢallshowedsignificantincreasing(P<0.05),andthevilliwidthofjejunumofGroupⅢ,ⅣandⅥshowedextremelysignificantincreasing(P<0.01).V 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响ComparedwiththeanteriorjejunumofGroupI,thecountofEscherichiacoli(E.coli)ofGroupⅢwasdecreasedsignificantly(P<0.05),andthecountofLactobacillusofGroupⅢandⅥ,andthecountofBifidobacteriumofGroupⅥwereincreasedsignificantly(P<0.05).ComparedwiththeposteriorjejunumofGroupI,thecountofE.coliofGroupⅣandthecountofsalmonellaofGroupⅢandⅣshowedsignificantdecreasing(P<0.05),whilethecountofLactobacillusofGroupⅢandⅥ,andthecountofBifidobacteriumofGroupⅢ,ⅣandⅥshowedsignificantincreasing(P<0.05).ComparedwiththeileumofGroupI,thecountofE.coliofGroupⅢ,ⅣandⅥ,andthecountofsalmonellaofGroupⅣshowedsignificantdecreasing(P<0.05),whilethecountofLactobacillusandBifidobacteriumofGroupⅢandⅥshowedsignificantincreasing(P<0.05).ComparedwiththececumofGroupI,thecountofE.coliofGroupⅣandⅥ,andthecountofsalmonellaofGroupⅢ,ⅣandⅥshowedsignificantdecreasing(P<0.05),whilethecountofLactobacillusofGroupⅢandⅥ,andthecountofBifidobacteriumofGroupⅢ,ⅣandⅥshowedsignificantincreasing(P<0.05).ComparedwiththecolonofGroupI,thecountofE.coliandsalmonellaofGroupⅢ,ⅣandⅥshowedsignificantdecreasing(P<0.05),whilethecountofLactobacillusofGroupⅢ,ⅣandⅥ,andthecountofBifidobacteriumofGroupⅢandⅥshowedsignificantincreasing(P<0.05).Insummary,theuseofFOSandBLcaneffectivelyreducethefeed-gainratioandraisethefoodconversionratioofweaningpigletsforconservationperiod,andraisetheADGofweaningpigletstosomeextent;restraintherejectionrate,VI 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响mortalityrate,diarrhearateandmorbidityrateasacertainextenteffect;effectivelyraisetheapparentdigestibilityofCP;optimizethebloodphysiologicalandbiochemicalpropertiesofweaningpigletstosomeextent;raisetheimmuneorganindexesasacertainextent;apparentlyreducethepHofdifferentintestines;raisethevilliheightandvilliwidth,andreducetheV/Cofsmallintestineeffectively;restrainthegrowthofharmfulmicrobesincludingE.coliandsalmonellaobviously,andraisethegrowthofbeneficialmicrobesincludingLactobacillusandBifidobacteriumevidently;improvemicro-ecologicalenvironmentofintestines,promoteanimalhealth.Keywords:Fructo-oligosaccharides(FOS);B.licheniforms;IntestinalFlora;MucosaMorphologyofSmallIntestine;ProductionPerformance;SerumBiochemicalIndexesVII 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响目录摘要...............................................................................IABSTRACT..........................................................................IV符号（引用术语）说明...............................................................X第一章绪论........................................................................11.1研究背景...................................................................11.2功能性寡糖.................................................................21.2.1果寡糖................................................................31.3地衣芽孢杆菌...............................................................41.3.1地衣芽孢杆菌的特性....................................................41.3.2地衣芽孢杆菌在猪生产中的研究与应用....................................51.4功能性寡糖与益生素联用(合生元)的研究与应用..................................51.4.1合生元的定义与作用机理................................................51.4.2合生元的应用..........................................................61.5本试验研究内容、目的及意义.................................................71.5.1研究内容..............................................................71.5.2研究目的及意义........................................................71.5.3研究技术路线（见图1-2）..............................................8第二章果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能和饲粮养分消化率的影响................92.1材料与方法.................................................................92.1.1试验用添加剂..........................................................92.1.2试验动物及试验地点....................................................92.1.3试验设计及饲粮处理....................................................92.1.4饲养试验管理.........................................................112.1.5试验观测指标及方法...................................................112.1.6数据分析.............................................................132.2结果与分析................................................................132.2.1断奶仔猪保育期生产性能...............................................132.2.2断奶仔猪保育期死淘率、腹泻率及发病率.................................142.2.3断奶仔猪保育期饲粮养分表观消化率.....................................152.3讨论......................................................................162.3.1果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期生长性能的影响...................162.3.2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期死淘率、腹泻率及发病率的影响.....172.3.3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期饲粮养分表观消化率的影响.........182.4本章小结..................................................................20第三章果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪血液生理生化指标和免疫器官指数的影响.........213.1材料与方法.................................................................213.1.1试验用添加剂.........................................................213.1.2试验动物及试验地点...................................................213.1.3试验设计及饲粮处理...................................................213.1.4试验饲养管理.........................................................213.1.5试验指标测定及方法...................................................213.1.6数据分析方法.........................................................22VIII 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响3.2结果与分析................................................................223.2.1血清生化指标.........................................................223.2.2血液生理指标.........................................................253.2.3免疫器官指数.........................................................293.3讨论......................................................................303.3.1果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期血清生化指标的影响...............303.3.2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期血液生理指标的影响...............323.3.3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期免疫器官指数的影响...............343.4本章小结..................................................................36第四章果寡糖和地衣芽孢杆菌对仔猪肠道内环境和肠道菌群的影响......................374.1材料与方法.................................................................374.1.1试验用添加剂.........................................................374.1.2试验动物及试验地点...................................................374.1.3试验设计及饲粮处理...................................................374.1.4饲养试验管理.........................................................374.1.5试验指标测定及方法...................................................374.1.6数据分析方法.........................................................404.2结果与分析................................................................404.2.1断奶仔猪保育期肠道pH................................................404.2.2断奶仔猪保育期小肠食糜粘度...........................................414.2.3断奶仔猪保育期小肠绒毛形态...........................................414.2.4断奶仔猪保育期肠道菌群...............................................434.3讨论......................................................................464.3.1果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期肠道pH的影响....................464.3.2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期小肠食糜粘度的影响...............474.3.3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期小肠绒毛形态的影响...............474.3.4果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪肠道菌群的影响.........................494.4本章小结..................................................................50第五章结论......................................................................515.1本试验验研究总体结论.......................................................515.2本试验的创新之处...........................................................525.3有待进一步研究解决的问题..................................................52参考文献..........................................................................53附图..............................................................................58致谢..............................................................................60攻读学位期间发表论文情况..........................................................62IX 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响符号（引用术语）说明Symbol(ReferenceTerms)Definitions符号(术语)Term意义Meaning单位unitA/G血清白蛋白/球蛋白比ADFI平均日采食量kg/dADG平均日增重kg/dAIA酸不溶灰分Alb白蛋白g/LALP碱性磷酸酶U/LALT丙氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶)U/LAST天门冬氨酸转移酶（谷草转氨酶）U/LAST/ALT谷草转氨酶/谷丙转氨酶BBL双歧杆菌选择性培养基BIS0%嗜碱性粒细胞百分比%9BISO嗜碱性粒细胞绝对值10/LBS沙门氏菌选择性培养基CD隐窝深度µmCF粗纤维CP粗蛋白DM消化能E0S%嗜酸性粒细胞百分比%EE粗脂肪EMB大肠杆菌选择性培养基9EOS嗜酸性粒细胞绝对值10/LF/G料重比%FOS果寡糖Glo血清球蛋白g/LGLU空腹血糖mmol/LHCT红细胞压积HDL高密度脂蛋白胆固醇mmol/LHGB血红蛋白g/LIgG免疫球蛋白G含量g/LIgM免疫球蛋白M含量g/LLBS乳酸杆菌选择性培养基LDL低密度脂蛋白胆固醇含量mmol/L9LYM淋巴细胞绝对值10/LLYM%淋巴细胞百分比%Lys赖氨酸MCH平均血红蛋白含量pgMCHC平均血红蛋白浓度g/LMCV红细胞平均体积flX 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响符号(术语)Term意义Meaning单位unitMet蛋氨酸9MONO单核细胞绝对值10/LMONO%单核细胞百分比%MPV血小板平均体积NDOs非消化性低聚糖9NEU中性粒细胞绝对值10/LNEU%中性粒细胞百分比%OS寡糖PCT血小板体积9PLT血小板计数10/L12RBC红细胞计数10/LRDW血小板分布宽度%RDWCVRBC体积分布宽度%T-Cho总胆固醇含量mmol/LTG甘油三酯mmol/LThr苏氨酸TP总蛋白含量g/LV/C绒毛长度/隐窝深度%VH绒毛长度µmVW绒毛宽度µm9WBC白细胞计数10/LXI 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响第一章绪论作为一种新型的健康绿色的营养生理活性物质，功能性寡糖因其对生物机体特殊的生理营养调节功能，在当下的食品、医药以及饲料添加剂领域，均得到世界各国学术和企业界的重视及广泛应用。非消化性寡糖如膳食纤维、寡糖及抗性淀粉等对健康促进效果一直处于研[1]究阶段。我国农业部批准可在饲料中使用的功能性寡糖有：果寡糖、甘露寡糖、壳寡糖、低聚木糖（木寡糖）、低聚壳聚糖、半乳甘露寡糖等。1.1研究背景20世纪80年代起，寡糖已被生产作为低热量的食品添加剂，因其更为安全健康的特点而广受消费者青睐。功能性食品的概念首先在日本被提出；1991年，寡糖仅被定义为“特定保健食品”。如今世界各研究已将非消化性寡糖定义为功能性食品。目前功能性食品在美国市场总额达270亿美元，专家预测仍有8.5%-20%的增长。2005年，功能性食品在全球市场总额达735亿美元，2013年更高达905亿美元。最大的功能性食品市场及供应区在美国、欧洲及日本，2003年所占比重分别为33.6%、28.2%和20.9%。中国、印度和拉丁美洲是功能性食品的新兴市场，受文化因素、低营养学水平及收入水平等方面的影响，限制了其在人[1]类健康食品中更广泛的应用。从20世纪90年代功能性食品开始进入我国市场，行业内专家及饲料添加剂企业均看好功能性食品应用前景，寡糖类添加剂的应用日趋广泛，也是动物[2]营养学研究的持续热点。自上世纪80年代以来，我国年存栏猪数、年出栏猪数及年产猪肉量基本呈现逐年增长趋势。我国是世界生猪生产、消费和贸易大国，多年来生猪出栏量保持在每年6亿头以上，猪肉产量5000多万吨，占世界一半、居世界第一位，直接产值约为6000亿元人民币。猪生产为我国国民经济特别是农业、农村经济的发展做出了重大的贡献。然而在大力发展养猪生产过程中，为满足动物性食品量的需求出现的专门化育种、集约化饲养、滥用各种添加剂等措施，使动物在生产过程中处于严重的应激状态，动物福利恶化；猪群健康状况不佳，生产效率低、猪肉产品品质和风味下降，直接影响动物产品的品质；同时还造成病菌滋生、用药量加大，耐药性病严重，养殖业环境严重恶化。猪健康养殖是以安全、优质、高产、高效、生态为主要内涵的可持续发展的养殖业，是在以主要追求数量增长为主的传统养殖业基础上，通过健康高效养殖技术、卫生防控技术、1 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响养殖场污染防控技术、无抗生素安全动物饲养与营养调控关键技术等先进技术体系的应用，实现数量、质量和生态效益并重的现代养殖业。饲料营养与安全贯穿整个猪的饲养过程，是健康养殖的重中之重，实行健康养殖可减少动物养殖对抗生素等药物的依赖性，防止“用药-耐药-大剂量-多残留”的恶性循环，确保动物源性食品的安全优质。尽管抗生素的应用给畜牧业带来了巨大的经济效益，但病原菌的抗药性和抗生素在动物体内及动物产品中的残留问题愈发引起关注和忧虑。2006年1月1号起，欧盟已开始禁止[3]在畜禽生产中使用抗生素饲料添加剂。当前安全绿色畜产品的呼声日益壮大,在标准和措施的逐渐出台的情况下，寻找提高动物本身特异性和非特异性抗病能力、促进饲料营养物质消化吸收、保证动物饲料营养与安全、提高动物的饲料效率和养殖效益的抗生素药物替代物已刻不容缓。1.2功能性寡糖寡糖（Oligosaccharides,OS），或称低聚糖，是指由2～10个单糖经脱水缩合通过糖苷键连接形成的直链或支链的低度聚合糖，聚合度在3-10之间，是介于单体单糖与高度聚[4,5]合多糖之间的物质。其分子式为(C6H12O6)n，(n＝2—10)，分子量约300—2000道尔顿，甜[1,2]度为一般蔗糖的0.3到0.6倍(龙胆寡糖为苦味)。根据其生物学功能可分为功能性低聚糖[6]（Functionaloligosaccharides）和普通低聚糖两大类。功能性低聚糖属于非消化性低聚糖（Non-digestibleOligosaccharides，NDOs），其所[7]具有的结构使其糖苷键无法感应消化酶的水解活性而不被机体直接吸收降解。蔗糖、海藻糖、麦芽糖等属于普通寡糖，可被消化吸收而产生能量。而功能性寡糖是指具有特殊生理学功能的一类双歧因子或益生元（prebiotics）型的物质，不被人和动物肠道分泌的消化酶消化，可促进双歧杆菌的增殖，益于动物机体健康。现国际上已开发70余种功能性寡糖，实[8]际生产与研究应用中主要为果寡糖、木寡糖、甘露寡糖、大豆寡糖等。因其结构稳定，不被动物机体吸收、不为内源酶降解且稳定性高，能承受饲料制粒高温处理，保持其结构和功[9,10]能完整性而不被破坏，具有低热量、低甜度、改善肠道菌落结构等生理作用。凌宝明，瞿明仁，刘兵等研究表明，非消化性寡糖能改善瘤胃发酵功能；并推断瘤胃微[11-13]生物可以消化和利用功能性寡糖。赵晓静等报道，精料中添加葡萄糖甘露寡糖有降低牛[14]粪便大肠杆菌和增加乳酸杆菌趋势。2 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响1.2.1果寡糖1.果寡糖的来源及其结构果寡糖（Fructo-oligosaccharides，FOS），是几个D-果糖通过β-1,2糖苷键与蔗糖的果[5]糖连结而形成的寡糖。作为功能性低聚糖中的一种，果寡糖又可称之为蔗果低聚糖，一般从菊芋或菊苣等果寡糖含量高的天然植物中提取，或者以生物方法利用果糖基转移活性酶将蔗糖进行转化，经化学反应后得到。果寡糖是以β-1，2糖苷键在蔗糖分子上结合1～3个果糖单体形成的聚合糖，结构式简写为G-F-Fn(n=1-3)，一般为直链结构，分子结构见图1。图1-1果寡糖分子结构Figure1-1ThemolecularstructureoftheFOSGF2GF3GF42.果寡糖的作用机理FOS，益生元的一种，主要通过增强动物机体肠道有益菌的定植生长、促进有益优势菌繁殖，从而改善和稳定消化道微生态区系平衡，达到调控营养物质体内代谢、调节机体免疫机制等功能。FOS的β-1，2糖苷键不能被机体消化道前段消化，从而进入肠道后段，被有益[15]微生物所利用。FOS难以被肠道内有害微生物所利用，而有益菌能产生分解果寡糖碳链结构的特定分解酶，从而可从FOS中获得能量与营养基质。有益微生物的快速增殖，抑制有害菌和致病菌的[16]繁殖；FOS可降低有害菌在肠道内着床的几率，增强有益菌结合位点竞争力。FOS在肠道内的降解和发酵可降低肠道pH，益于双歧杆菌和乳酸杆菌等有益菌的增殖而对对酸度敏感的有害菌则被抑制；肠道内pH值的降低可利于钙、铁、镁等矿物质元素的溶解[17-19]吸收；FOS的有效利用可使双歧杆菌产生短链VFA，从而抑制外源性病原菌的定植生长。(3)果寡糖的应用研究3 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响夏中生等在仔猪饲料中添加0.5%果寡糖，发现可增加仔猪日增重13.84%、提高饲料增[20]重比（F/G）8.08%，并能降低仔猪的腹泻率；谭聪灵等在饲料中添加0.3%果寡糖饲喂生长[21]猪，可提高血清IgA、IgG水平达42.86%；林渝宁添加0.4%FOS于仔猪饲料中，可仔猪日[22]增重和采食量显著提高，而使仔猪饲料增重比和腹泻率显著降低；Howard试验表明，在仔[23]猪饲粮中添加FOS，经检测发现粪样中的双歧杆菌的浓度显著提高(P<0.01)。文虹等研究[24]发现甘露寡糖和果寡糖可优化断奶仔猪的血清免疫指标；宋小珍、任克良等分别的试验也证明了FOS对仔猪、泰和鸡、兔子的免疫性能的优化，能显著提高仔猪血清中IgG水平，FOS[25-26]可使泰和鸡脾脏指数和胸腺指数明显上升，免疫器官重量增加。张厂等发现0.6%果寡糖的饲喂可显著降低肉鸡的饲料增重比，显著提高胃蛋白酶、肠道脂肪酶和淀粉酶活性显著改[27]善肠道微生物内环境；白东英等研究表明FOS能提高肉鸡血清新城疫抗体效价及血清溶菌[28]酶，显著提高免疫器官指数(P<0.05)。在水产运用中，各研究者试验均得出果寡糖可提高鱼类生产性能、增重率，降低F/G，显著提高营养物质利用，促进脂肪等物质代谢，提高血清溶菌酶、特异性免疫和补体C3活性、降低血清胆固醇（T-Cho）和甘油三酯（TG）水平，提高罗非鱼肠道内双歧杆菌、乳酸[29-34]杆菌的数量等一致结果。1.3地衣芽孢杆菌[35]地衣芽孢杆菌是芽孢杆菌中最有潜力的菌种之一。根据国家农业部2003年318号公告，批准地衣芽孢杆菌可作为饲料级菌株使用，在2008年公布的《饲料添加剂品种目录》中，地衣芽孢杆菌被批准为饲用微生物添加剂。国内外对地衣芽孢杆菌的研究少见，多关于[36-39][40-41]枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌。1.3.1地衣芽孢杆菌的特性地衣芽孢杆菌是中生芽孢的革兰氏阳性耗氧菌，具有促进机体肠道内有益微生物的生[42]长、降低病原菌的繁殖增长、平衡动物肠道微生态、增强机体免疫力和抗病力等功能。地衣芽孢杆菌的活菌成分是芽孢休眠体，比起传统的益生菌、双歧杆菌和乳酸菌，地衣芽孢杆[43,44]菌在生产运用中具有耐高温、耐酸性、耐干燥、耐胆盐和人工胃液等特点。地衣芽孢杆菌是需氧菌，在动物肠道中生长需要消耗大量氧气，降低机体肠道内氧气浓度，为肠道内的有益微生物尤其生理性厌氧菌的生长繁殖创造有利条件；同时使得需氧菌如4 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响大肠杆菌、沙门氏菌等有害病原菌的生长因缺氧而受到抑制。通过增殖生理性厌氧菌、调整肠道菌群结构从而平衡胃肠道的微生态体系，是动物肠道处在健康平衡状态，因而提高动物[45,46]机体免疫力。在生长代谢过程中地衣芽孢杆菌产生的抗菌物质能有效抑制大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等致病性需氧菌的增殖。伴随地衣芽孢杆菌繁殖代谢过程中产生的抗逆性内生孢子，可产生多种抗生素，有效抑制多种病原菌。此外，地衣芽孢杆菌还能产生多种营养物质，参与动物机体新陈代谢，如维生素、有机酸、氨基酸和促生长因子等，为机体提供营养物质[47]。地衣芽孢杆菌生长条件要求低、繁殖快，能迅速在肠黏膜上定植，在短时间内成为肠道的优势菌群；调节动物肠道菌群平衡，改善肠道微生态环境，促进动物生长、减少动物肠道疾病的发生，提高动物机体的抗病力；同时还具有免疫抑制、竞争性吸附及合成抑菌物质等多方面的功能。地衣芽孢杆菌能刺激动物免疫器官的生长发育，激活淋巴细胞，提高免疫球[48]蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高机体免疫力等。1.3.2地衣芽孢杆菌在猪生产中的研究与应用[49]付维来等给断奶仔猪饲喂地衣芽孢杆菌，能显著降低仔猪的腹泻、提高仔猪的存活率。董爱华等在断奶仔猪饲料中添加地衣芽孢杆菌添加剂，发现地衣芽孢杆菌能有效显著地提高[50]断奶仔猪保育期末重、总增重及平均日增重；极显著降低断奶仔猪料肉比和腹泻率。郭丽华等试验研究表明，在妊娠期和哺乳期的母猪饲料中添加益生菌可起到促进母猪繁殖的作用；出生仔猪在出生末重及平均日增重方面均有显著提高，仔猪腹泻率可降低15个百分点[51]以上，死淘率可降低近七个百分点。Alexopoulos等用地衣芽孢杆菌饲喂母猪，可增加断[52]奶仔猪头数及其出生体重。戴荣国等多次试验发现，地衣芽孢杆菌均能有效提高仔猪的日[53,54]增重和降低腹泻率。林裕胜的研究也表明，地衣芽孢杆菌能有效促进断奶仔猪生产性能，[55]显著增加断奶仔猪的结束重、日增重,降低饲料/增重比，降低腹泻率10%。1.4功能性寡糖与益生素联用(合生元)的研究与应用1.4.1合生元的定义与作用机理[56]合生元（Synbiotics），又称微生态制剂、合生素或共生元；是由益生元益生素组合的5 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响[57]制剂，由Gibson在1995年首次提出；既可通过直接增加肠道有益菌而发挥益生素的细菌[58,59]生理活性，又可通过益生元的选择性促生长作用强化益生菌作用效果；最大限度地发挥[60]其相似协同的叠加作用，是替代抗生素的廉价饲料添加剂。（1）合生元能够补充生理性活菌如乳酸菌、双歧杆菌等有益菌在肠道内的定植与增殖，快速调整肠道紊乱。（2）有害菌的细胞表面或菌毛上的外源凝集素能与动物肠黏膜上皮细胞中的低聚糖受体发生特异性结合，使病原菌黏附在肠壁上并大量增殖，从而破坏动物肠道的微生态平衡。而当合生元中的低聚糖结构相似，能与病原菌的外源凝集素发生特异性结合，使病原菌不能在上皮细胞中定殖从而失去致病能力，伴随低聚糖通过消化道排出体外。（3）低聚糖可被有益菌利用从而大量增殖，并通过磷脂酸和肠黏膜上皮细胞结合与其他厌氧菌共同占据肠黏膜表面，形成生物膜保护屏障，阻止有害菌群入侵，从而起到改善肠道环境和保护肠道的作用。（4）合生元中的益生菌进入机体肠道后迅速繁殖，产生大量有机酸、过氧化氢、二氧化碳、消化酶、细菌素类物质及免疫球蛋白，与病原微生物争夺营养，发生强烈的生物拮抗作用，使其无法在动物肠道内定植，抑制其繁殖生长。（5）合生元是非特异性免疫调节因子，可增强吞噬细胞吞噬能力和Q细胞产生抗体的能力。1.4.2合生元的应用WalshAM等研究发现，断奶仔猪饲喂微生态制剂后，其十二指肠、空肠的绒毛长度均[63]呈显著水平增加而隐窝深度显著下降（P<0.05）。MairC研究表明，用菊粉和益生菌（肠球菌、乳酸杆菌和双歧杆菌）组成合生元饲喂断奶仔猪28d后发现添加合生元能显著降低胃、空肠及回肠的Ph，增加回肠总需氧菌、肠球菌数量以及结肠中乳酸杆菌乳酸杆菌数量（P<0.05），极显著提高肠球菌和革兰阴性厌氧生物生长（P<0.01），表明合生元能调节和稳[64]定肠道微生态平衡。谢淑娥曾报道，基础饲粮中添加微生态制剂可显著提高生长猪ADG[65]（P<0.05），有降低料肉比的趋势。边连全等在断奶仔猪饲料中添加枯草芽胞杆菌-菊糖合生元，发现枯草芽胞杆菌组和合生元组的ADG显著高于对照组和菊糖组（P<0.05），F/G和腹泻率显著低于对照组和菊糖组（P<0.05）；合生元组和枯草芽胞杆菌组血清IgG和IgA以[66]及补体C3和C4水平显著高于对照组，说明合生元可提高断奶仔猪体液免疫功能。李树鹏等报道,黄芪多糖与益生菌剂的协同作用能平衡和稳定肠道微生态区系，显著提高雏鸡周增6 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响重，降低料肉比；有效促进雏鸡肠道乳酸菌和双歧杆菌的增殖，抑制大肠埃希菌繁殖，同时[67-69]增强机体免疫力。1.5本试验研究内容、目的及意义1.5.1研究内容以前人探索的果寡糖和益生素对断奶仔猪的作用原理及适宜添加量作为参考，分别在断奶仔猪饲粮中添加不同比例果寡糖（0.2%FOS和0.4%FOS）以及不同比例下果寡糖加益生菌（地衣芽孢杆菌）的组合构成益生素制剂，比较各种添加剂制剂对断奶仔猪的生产性能、腹泻率、死淘率、消化代谢、血清生化指标、全血生理指标、肠道黏膜结构、肠道pH以及肠道菌群微生态的影响等，探讨果寡糖与地衣芽孢杆菌的作用机理及联合使用的叠加效应。1.5.2研究目的及意义探讨果寡糖、地衣芽孢杆菌及合生元（果寡糖益生菌复合制剂）对猪机体营养调控机理（代谢作用、免疫机能和肠道微生态平衡），为新型饲料添加剂和预混料的开发及其在猪健康养殖中提供科学理论基础。国内外对抗生素替代物的研究开发已成为动物营养和饲料科学的热点之一，寡糖类（益生元）、益生菌（益生素）、合生元（益生元＋益生菌）在动物试验效果还不尽一致，有关其营养机理还存在着一定的争议，大多还属推断而言。通过仔猪的饲养试验分析、消化代谢、生化免疫分析、消化道微生物菌群分析等，试图解决果寡糖及合生元制剂仔猪的用法用量问题，研究探讨果寡糖、合生元制剂对畜禽机体营养代谢作用、免疫机能和肠道微生物菌群的调控机理，为果寡糖等新型饲料添加剂和预混料的开发及其在动物健康养殖中应用提供科学理论基础。7 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响1.5.3研究技术路线（见图1-2）图1-2研究技术路线Figure1-1Researchtechniqueroute断奶仔猪保育阶段饲养试验消化代谢肠道形态肠道微生血液生理生生产性能试验结构分析物分析化指标绒毛长度微生物平绒毛宽度板计数隐窝深度绒毛高/深8 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响第二章果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能和饲粮养分消化率的影响2.1材料与方法2.1.1试验用添加剂试验用果寡糖(FOS)添加剂产品由广东江门量子高科生物股份有限公司提供，产品性状为米黄色色粉末（纯度30.0%），拌料饲喂。试验用地衣芽孢杆菌添加剂产品由广西南宁众达生物工程有限公司提供，产品性状为淡黄色至深黄色粉末（纯度500亿/g），拌料饲喂；规格为：有效活孢子≥500亿/g，杂菌率≤2%，含水量≤8‰。2.1.2试验动物及试验地点试验动物：选取28日龄断奶的“三元杂”仔猪，由广西农垦永新畜牧集团金光有限公司青年母猪养殖场提供。试验地点：广西壮族自治区南宁市西乡塘区坛洛镇金光农场跃进生猪养殖场。2.1.3试验设计及饲粮处理试验选取28±1日龄同期生长发育良好的断奶仔猪240头。随机将试验猪分成6个组，每个组内设4个重复（每栏），每重复10头断奶仔猪，公母各5头，每重复置1个栏内饲养，各组猪初始平均体重无显著差异（P<0.05）。其中试验Ⅰ组为对照组，试验Ⅱ-Ⅵ组为试验组。正式试验前进行为期5天的预饲养试验，而后进入为期28天保育阶段正式饲养期，采用平地饲养，标准化饲养管理。基础饲粮营养水平及配方配制参考NRC（2004）标准，饲粮中不添加果寡糖及地衣芽孢杆菌含量或任何抗生素，见表2-1。试验I组为对照组，饲喂基础饲粮；试验Ⅱ组基础饲粮中添加0.2%果寡糖；试验Ⅲ组基9础饲粮中添加0.4%果寡糖制剂；试验Ⅳ组在基础饲粮中添加1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌；9试验Ⅴ组在基础饲粮中添加0.2%果寡糖和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌；试验Ⅵ组在基础饲9粮中添加0.4%果寡糖和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌。由于本试验中的饲料添加剂果寡糖及9 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响地衣芽孢杆菌产品能量含量极低，为了使对照组及各试验组的饲粮能量保持一致，以添加剂添加量最大的组别为基准，给各试验组添加对应量差额相等的沸石粉，达到各试验组饲粮能量一致的目的。试验设计及饲粮组成见表2-2。表2-1基础饲粮成份及其营养水平（风干基础）Tbale2-1Basicdietarycomponentsandnutritionlevel(drybasis)原料组成Material含量Content(%)Composition(%)玉米corn54.30膨化大豆extrudedsoybean10.00豆粕soybeanmeal(46.5%CP)14.00次粉wheatmidding3.00鱼粉fishmeal4.50低蛋乳清粉wheypowder8.00大豆油soybeanoil1.00预混料premixfeed5.00赖氨酸Lys0.20总计Total100.00营养水平NutritionalLevel消化能DE(MJ/kg)14.32代谢能ME(kcal/kg)13.24粗蛋白CP18.55总赖氨酸1.50可消化Lys%1.39可消化Thr%0.75可消化Met%0.37可消化Met+Cys%0.61可消化Trp%0.19钙0.69总磷0.68有效磷0.40铜(mg/kg)180.00碘(mg/kg)0.48铁(mg/kg)155.00镁(mg/kg)15.25锌(mg/kg)2200.00维生素AVit.A(IU/kg)16000.00维生素DVit.D(IU/kg)3500.00维生素EVit.E(IU/kg)36.0010 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响表2-2试验设计及饲粮组成Table2-2Theexperimentdesignanddietcomposition组别Group处理Treatment饲粮组成DietCompositionⅠ对照基础饲粮Ⅱ0.2%FOS基础饲粮+0.2%FOSⅢ0.4%FOS基础饲粮+0.4%FOS99Ⅳ1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌基础饲粮+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌99Ⅴ0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌基础饲粮+0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌99Ⅵ0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌基础饲粮+0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌2.1.4饲养试验管理试验前，高压冲洗整栋猪舍，对猪栏地面及饲喂料槽进行消毒，并空栏一周以上。饲喂使用桶式料槽和乳头式自动饮水器自由采食及饮水。确保各试验组光线、温度及湿度等条件基本一致。按猪场常规程序进行驱虫和免疫。预饲期5天，试验期28天，分别饲喂对照组饲粮和各试验组饲粮，饲养试验期间按生猪养殖场日常管理要求严格执行饲养生产及管理。一日饲喂三次，分别于早晨7：00，中午12：00及下午5：00，饲喂同时记录各试验组的剩料量及耗料量。每天清晨定时扫粪，清扫及消毒每个猪栏内外。试验期间除正常的免疫程序外，各组均不添加任何营养性或非营养性添加剂以及抗生素药物。饲养饲养期间免疫药物及剂量见表2-3。表2-3饲养试验期间免疫药物及剂量Table2-3Theimmunedruganddoseduringfeedingexperiment日龄免疫项目接种方法接种剂量药物名称DaysImmunizationProgramInoculationMethodsInoculationDoseDrugName30猪瘟活役苗肌肉注射1.5头份/头猪瘟活役苗（兔源）肌肉注射405号病疫苗2mL/头猪口蹄疫O型灭活疫苗肌肉注射60猪瘟疫苗两头份/头猪瘟活疫苗（传代细胞源）2.1.5试验观测指标及方法1.生长性能试验各组按重复为单位进行空腹称重，记录为初始体重。试验为期28天。试验结束日，猪空腹称重，记录为试验结束时体重。试验期间每日观察各组的生长和采食情况，常规方法记录各重复给料量（耗料量）和剩料量，计算出整个试验期的平均日采食量（ADFI）、平均日11 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响增重(ADG)和饲料增重比（即料重比，F/G）。生长性能测定指标：平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、饲料增重比（F/G）。生长性能测定计算方法如下：（1）平均日采食量（ADFI）计算方法（2-1）（2）平均日增重（ADG）计算方法①试验期间无死淘情况（2-2）②试验期间有死淘猪只（2-3）（3）料重比（F/G，%）＝饲养期内所耗饲料量(kg)÷同期增重(kg)＝消耗的饲料量/增加的活重量（2-4）2.仔猪死淘率、腹泻率、发病率饲养期间，观察记录断奶仔猪保育期间的精神状况、毛发颜色、组群均匀度、发病症状和用药情况等，并记录每重复（每栏）中仔猪死亡、淘汰、腹泻、发病数量，统计并计算出仔猪死亡率、淘汰率、死淘率、腹泻率、发病指数和发病率。检测指标：仔猪死亡率、淘汰率、死淘率、腹泻率、发病指数和发病率。计算方法如下：死亡率=死亡数/总数×100%（2-5）淘汰率=淘汰数/总数×100%（2-6）死淘率=（死亡数+淘汰数）/总数×100%（2-7）腹泻率=试验全期腹泻头次/（试验头数×试验天数）×100%（2-8）发病指数=观察期间内发生的新病例数/同期平均猪只头数×100%（新病例数：咳嗽、喘气、腿疼、发烧等疾病数）（2-9）发病率=（试验全期腹泻头次+新病例数）/（试验头数×试验天数）×100%（2-10）12 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响3.饲粮营养物质消化率于试验结束前4d起进行粪样采集工作，每天早、午、晚各收集一次，按重复采集各组仔猪粪样，加10%硫酸混合均匀进行固氮后保存。将各组4d所采集粪样及饲料样本带回饲料分析检测实验室，于烘箱中60-65℃烘干，粉碎，过40目筛后于4℃冰箱冷藏室保存备用。采用内源指示剂法酸不溶灰分法（AIA法)测定主要营养成分表观消化率或沉积率，饲料和粪中的酸不溶灰分含量测定采用4N-HCL不溶法测定。粗蛋白质（CP）含量采用全自动凯氏定氮仪测定；粗脂肪（EE）、粗纤维（CF）和粗灰分含量测定则参照张丽英主编的《饲料分析及饲料质量检测技术》方法：干物质测定：在105℃恒温烘箱中烘干至恒重即为所得；粗脂肪（EE）使用索氏脂肪抽取器乙醚浸提法测定；粗纤维（CF）采用酸碱消煮法测定；粗灰分：试样在550℃灼烧后所得残渣质量；钙（Ca）采用高锰酸钾络合滴定法测定；磷(P)[70]采用铝黄法使用分光光度计进行测定；能量测定使用全自动量热仪。饲粮营养物质消化率测定指标：粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）、粗纤维（CF）、粗灰分、钙、磷及能量的表观消化率。饲粮养分表观消化率计算公式如下：ac营养物质消化率（%）=(100)100%bd（2-11）2.1.6数据分析试验所有数据先用微软OfficeExcel软件预处理，后经SPSS17.0软件处理，使用OneWayAnova程序对数据进行方差分析及LSD法进行多重比较。数据表达以“平均值±标准误”(M±SD)表示，差异显著水平为0.05，极显著水平为0.01。2.2结果与分析2.2.1断奶仔猪保育期生产性能试验期间果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生产性能的影响见表2-4。由表2-4可知，对照组和试验各组的平均末重、平均日增重以及平均日采食量组间均无显著性影响（P<0.05）。但相比于对照组，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组以及Ⅵ组的平均末重分别提高了8.34%、13 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响11.78%、8.75%、3.31%和9.58%。而试验组Ⅱ组至Ⅵ组的平均日增重也分别比对照组提高16.13%、19.35%、12.90%、6.45%以及16.13%。除Ⅲ组和Ⅵ组外，Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组的平均日采食量分别比对照组提高4.00%、6.00%和2.00%。相比于对照组，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅵ组的料重比均显著降低（P<0.05），且以Ⅲ组最低、Ⅵ组次之，Ⅱ组再之。其余两组Ⅳ组Ⅴ组料重比亦低于对照组但差异不显著（P>0.05），分别比对照组降低了7.45%和4.35%。其中，Ⅲ组料重比显著低于Ⅳ组Ⅴ组（P<0.05），而Ⅵ组料重比也显著低于Ⅴ组（P<0.05）。表2-4果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生产性能的影响Table2-4TheeffectsofFOSandBLonproductionperformanceofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅴ组Ⅵ组对照0.2%FOS0.4%FOS1×0.2%FOS+1×0.4%FOS+1×910CFU/kgBL109CFU/kgBL109CFU/kgBL平均末重kg14.51±1.1315.72±0.4916.22±0.4815.78±2.3014.99±1.0715.90±1.90日增重kg0.31±0.010.36±0.010.37±0.010.35±0.050.33±0.050.36±0.04日采食量kg0.50±0.020.52±0.000.49±0.010.53±0.070.51±0.060.49±0.02abcddabcabcd料重比(X:1)1.61±0.031.45±0.051.33±0.001.49±0.011.54±0.011.38±0.082.2.2断奶仔猪保育期死淘率、腹泻率及发病率从表2-5中可知，相较于对照组，试验各组的淘汰率、死亡率、死淘率和腹泻率均无显著性差异（P>0.05）。其中，试验组Ⅱ组到Ⅴ组的淘汰率比对照组分别降低了100%、66.67%、66.67%和33.33%；相比于对照组，试验组Ⅲ组到Ⅵ组的死亡率分别降低了50%、50%、100%和100%；除试验Ⅵ组的死淘率比对照组降低了40%，试验组Ⅱ组到Ⅴ组的死淘率比对照组均降低了60%。表2-5果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪死淘率、腹泻率及发病率的影响Table2-5TheeffectsofFOSandBLonmortalityandrejectionrate，diarrhearateandmorbidityrateofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅴ组Ⅵ组（%）对照0.2%FOS0.4%FOS1×0.2%FOS+1×0.4%FOS+1×99910CFU/kgBL10CFU/kgBL10CFU/kgBL淘汰率7.50±0.000.00±0.002.50±1.252.50±1.255.00±1.447.50±2.39死亡率5.00±1.445.00±1.442.50±1.252.50±1.250.00±0.000.00±0.00死淘率12.5±1.255.00±1.445.00±1.445.00±1.445.00±1.447.50±2.39腹泻率3.48±0.333.04±0.282.01±0.112.42±0.833.13±0.502.54±0.78aababbabab发病指数1.29±0.370.63±0.210.71±0.240.45±0.210.80±0.050.67±0.37aabbbabab发病率4.78±0.293.66±0.302.72±0.262.86±0.843.93±0.513.21±0.77各组间腹泻率虽不呈显著性差异，但试验各组Ⅱ组到Ⅵ组的腹泻率分别比对照组降低了14 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响12%、42%、30%、10%和27%。相比于对照组，Ⅳ组的发病指数显著降低（P<0.05），而试验组Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅴ组和Ⅵ组的发病指数分别比对照组降低了51.16%、44.96%、37.98%和48.06。比较对照组，Ⅲ组和Ⅳ组均能显著降低断奶仔猪发病率，且以Ⅲ组的发病率最低。其余三组试验组的发病率较对照组均无显著性差异，Ⅱ组、Ⅴ组和六组的发病率比对照组分别降低了23.43%、17.78%和32.85%。2.2.3断奶仔猪保育期饲粮养分表观消化率由表2-6可知，试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的粗蛋白表观消化率的组间差异不显著，但都显著高于对照组，而且也均显著高于试验组Ⅱ组和Ⅴ组（P<0.05）。粗蛋白表观消化率最高的是Ⅵ组，其次为Ⅲ组和Ⅳ组。试验组Ⅱ组和Ⅴ组的粗蛋白表观消化率虽与对照组无显著性差异，但分别比对照组高4.06%和1.93%。表2-6果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪饲粮养分表观消化率的影响Table2-6TheeffectsofFOSandBLonapparentdigestibilityofdietarynutrientsofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅴ组Ⅵ组对照0.2%FOS0.4%FOS1×0.2%FOS+1×0.4%FOS+1×910CFU/kgBL109CFU/kgBL109CFU/kgBLbbaaba粗蛋白CP75.65±0.4278.72±1.0782.89±0.4282.45±2.2577.11±3.8785.71±3.05粗脂肪EE68.32±7.1474.96±3.5274.19±2.9371.99±2.1468.95±3.3671.11±2.31cabcbcbca粗纤维CF20.19±0.3824.18±0.6119.91±1.1422.76±2.1420.81±1.1527.30±0.91cddadb粗灰分Ash40.24±0.2338.82±0.0838.48±0.6545.13±0.3138.45±0.1643.23±0.67钙Ca53.81±1.9153.44±0.8064.42±1.8858.13±7.2360.00±3.9963.58±2.08bcbcacabac磷P44.72±2.3046.46±4.7958.46±7.9260.97±3.7442.51±1.9657.57±6.61能量80.87±0.5081.50±0.6782.85±0.6282.27±0.2782.46±0.3582.99±0.71试验各组的粗脂肪表观消化率组间差异均不显著，但相比于对照组，Ⅱ组至Ⅵ组的粗脂肪表观消化率分别提高了9.72%、8.59%、5.37%、0.92%和4.08%，且以0.2%FOS组最高。相比于对照组，Ⅵ组与Ⅱ组的粗纤维表观消化率均显著高于对照组和Ⅲ组，且以Ⅵ组最高（P<0.05）。此外，Ⅵ组的粗纤维表观消化率还显著高于Ⅳ组和Ⅴ组（P<0.05）。对于粗灰分表观消化率，试验各组相比对照组均有显著性差异，而且试验各组的组间差异亦呈显著性（P<0.05）。粗灰分表观消化率最高的是Ⅳ组，其次是Ⅵ组，其余各试验组均低于对照组。试验各组的钙表观消化率组间差异均不显著，但相比于对照组，除Ⅱ组外，Ⅲ组至Ⅵ组的钙表观消化率分别提高了19.72%、8.03%、11.50%和18.16%，且以0.4%FOS组最高。15 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响试验各组的磷表观消化率中，Ⅳ组最高，且显著高于对照组、Ⅱ组和Ⅴ组（P<0.05）。与对照组相比，其余各试验组的磷表观消化率均无显著性差异（P>0.05），但Ⅲ组和Ⅵ组却显著高于Ⅴ组（P<0.05）。试验各组的能量表观消化率组间差异均不显著，但相比于对照组，Ⅱ组至Ⅵ组的能量表观消化率分别提高了0.78%、2.45%、1.73%、1.97%和2.62%，且以Ⅵ组最高。2.3讨论2.3.1果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期生长性能的影响果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪最直接的应用效果体现在其保育阶段的生长性能上。本试验结果表明，相比于对照组，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂各试验组断奶仔猪保育阶段末的平均末重均有提高，且各试验组的平均末重从高至低的排序为：0.4%FOS组、0.4%FOS99+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.2%FOS组和0.2%FOS+1×910CFU/kg地衣芽孢杆菌组。马秋刚等试验研究表明，在饲料中添加0.4%FOS能显著提高断[71]奶仔猪的平均末重。这说明果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独使用或联合使用均能在一定程度上提高断奶仔猪的平均末重。平均日增重可以直观表达动物生长发育的速度。不同浓度果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂试验组中断奶仔猪保育阶段末的平均日采食量均比对照组有所提高，且各试验组平均日采食量9从高至低的排序为：0.4%FOS组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.2%FOS组、199×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。刘虎传等研究表明，[72]添加益生菌制剂可显著提高断奶仔猪平均日增重（P<0.05）。陈文辉等研究表明，不同芽[73]孢杆菌的复合益生菌制剂能显著提高断奶仔猪的平均日增重（P<0.05）。周映华等研究表[74]明，复合益生菌制剂对断奶仔猪的生长有良好的促进作用。付水广给三元杂交断奶仔猪饲[75]喂不同浓度益生素制剂，发现仔猪平均日增重均能显著提高(P<0.05)。这说明果寡糖不同的浓度均对断奶仔猪的平均日增重具有一定程度的提高，且以浓度较高的0.4%FOS组的平均9日增重效果最好，而果寡糖制剂的0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组与0.2%FOS组同样在一定程度上提高断奶仔猪的平均日增重。平均日采食量反映了动物在饲养期间的食物摄入量，同时也是对其机体吸收消化机能的9有效体现。本试验结果表明，0.2%FOS组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS+1×16 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响910CFU/kg地衣芽孢杆菌组的平均日采食量较对照组有一定程度高，这很有可能说明低浓度的果寡糖添加量、低浓度合生元制剂甚至地衣芽孢杆菌的单独使用都有可能提高断奶仔猪的9平均日采食量。而0.4%FOS组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组对断奶仔猪的平均日采食量反而有所降低，虽不呈显著性影响，但是否高浓度的果寡糖及合生元制剂添加剂量会影响断奶仔猪的日采食量仍有待进一步研究。饲料增重比(F/G)，即饲料转化率，也称耗料增重比、料重比、料肉比、饲料消耗比、饲料报酬等，是动物养殖过程中生长性能更为直接的体现，也是养殖户最为关心的指标之一，直接体现了其经济效益，同时也是本试验的出发点之一。本试验结果表明，果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂各试验组对断奶仔猪的料重比均比对照组有所降低。其中，0.2%FOS组、0.4%FOS9组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的料重比较对照组显著降低（P<0.05），各试验9组的料重比依低至高排序为：0.4%FOS组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.2%FOS99组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。这直接说明了果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能有效提高断奶仔猪的料重比。此外，990.4%FOS组的料重比较1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组成显著性降低，这说明了高浓度的果寡糖添加量对断奶仔猪料重比的应用效果要好于低浓度的果寡糖添加量和低浓度的合生元制剂的使用。2.3.2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期死淘率、腹泻率及发病率的影响断奶仔猪保育期间的死亡淘汰现象是养殖户十分关注的指标，如何降低断奶仔猪在保育期的死淘率是养殖行业一直关注探讨的焦点，也是本试验的最终目标之一。从本试验结果可9知，除0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的断奶仔猪淘汰率与对照一样外，0.2%FOS的99淘汰率效果最好，为0，而0.4%FOS、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组也均能在一定程度上降低断奶仔猪的淘汰率。这在一定程度上说明低浓度的果寡糖添加量能有所降低断奶仔猪保育期的淘汰率，而高浓度果寡糖添加量、地衣芽孢杆菌以及低浓度合生元制剂也对降低断奶仔猪保育期的淘汰率有一定效果。9死亡率指标中，除0.2%FOS组的死亡率与对照组一样外，0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣9芽孢杆菌组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的死亡率均为0，效果最佳。0.4%FOS9组和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组也较对照组降低了断奶仔猪保育期的死亡率。可见不同浓度的合生元制剂在一定程度上能降低断奶仔猪保育期的死亡率，而高浓度果寡糖添加量和地17 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响衣芽孢杆菌也对降低断奶仔猪保育期的死亡率有一定效果。各试验组的死淘率均比对照组有所降低，这说明果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对断奶仔猪在保育期的死亡淘汰现象均在一定程度上有所降低。仔猪腹泻是断奶仔猪在保育期中常见的不良症状，是引起断奶仔猪死亡淘汰的主导因素，其症状主要因肠道内环境的不稳定所导致。有效降低断奶仔猪在保育期间的腹泻率是养殖行业长期以来共同的目标，也是本试验最重要的目标之一，是实现健康养殖的突破口之一。从本试验结果可知，相比于对照组，各试验组的腹泻率均有所下降，依低至高排序为：0.4%FOS99组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.2%FOS组和90.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。因而得知，果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对降低断奶仔猪在保育期的腹泻现象均有一定程度的效果。断奶仔猪保育期发病是生猪养殖业最为棘手的难题之一，因此发病指数体现着断奶仔猪9在保育期的健康状态。由本试验结果可知，相比于对照组，试验组1×10CFU/kg地衣芽孢杆9菌组能显著降低断奶仔猪保育期的发病指数；而0.2%FOS组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽9孢杆菌组、0.4%FOS组和0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组也降低了断奶仔猪保育期的发病指数，而果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用在一顶程度上也有降低断奶仔猪保育期的发病指数的效果。9由本试验结果可知，比较于对照组，0.4%FOS组和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组均显著降低了断奶仔猪保育期发病率，且以0.4%FOS组的发病率最低。其余各试验组0.4%FOS+1×9910CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.2%FOS组和0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组虽比对照组不呈显著性影响，但也在一定程度上降低了断奶仔猪保育期发病率。由此可得，单独使用高浓度果寡糖添加量和益生菌能有效降低断奶仔猪保育期发病率，而低浓度果寡糖及合生元制剂对降低断奶仔猪保育期发病率效果有一定程度的影响。2.3.3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期饲粮养分表观消化率的影响饲料表观消化率是评价饲料营养价值的重要指标，是判断饲粮配方是否合理、饲料利用率高低的依据。由本试验结果可知，果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂各试验组的粗蛋白表观消化9率均比对照组有所提高，其中0.4%FOS组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS+1×910CFU/kg地衣芽孢杆菌组的粗蛋白表观消化率显著高于对照组。消化道内蛋白质的发酵可[76-77]诱发动物肠道失调及致病菌增殖，其发酵可能会释放刺激肠道黏膜的物质，使消化道黏18 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响[78]度增加，导致腹泻。因此可知果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能有效提高断奶仔猪的粗蛋白表观消化率，且以较高浓度合生元制剂添加量的效果最佳，其次是较高浓度的果寡糖添加量和益生菌的单独使用。对断奶仔猪保育期的粗脂肪表观消化率，各果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂试验组虽比对照9组不呈显著性影响，但均有所提高，依高至低排序为：0.2%FOS组、0.4%FOS组、1×10CFU/kg99地衣芽孢杆菌组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。可见果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能在一定程度上提高断奶仔猪的粗脂肪表观消化率，且果寡糖的单独使用效果好于合生元制剂的使用。除0.4%FOS组外，各试验组对断奶仔猪保育期粗纤维的表观消化率均较对照组有所提高。9其中0.2%FOS组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的粗纤维表观消化率显著高于对照99组，且以0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组最高。此外，0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽9孢杆菌组粗纤维表观消化率还显著高于0.4%FOS组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和90.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组，而0.2%FOS组粗纤维表观消化率亦显著高于0.4%FOS组。这充分说明较高浓度的合生元制剂和低浓度果寡糖添加量对提高断奶仔猪的粗纤维表观消化率有显著效果。9各试验组的粗灰分表观消化率差距较大且显著。1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和90.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的粗灰分表观消化率均显著高于对照组，且以1×9910CFU/kg地衣芽孢杆菌组最高，并显著高于0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。而另9三组的粗灰分表观消化率则均显著低于对照组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS+19×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。由此可得，不同浓度的果寡糖和合生元制剂对断奶仔猪的粗灰分表观消化率影响较大，且不同浓度间的单独或联合使用存在不同效果，其作用机制和影响特点仍有待进一步研究。对断奶仔猪保育期的钙表观消化率，各果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂试验组虽比对照组不呈显著性影响，但除0.2%FOS组外各试验组均有所提高，依高至低排序为：0.4%FOS组、990.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和1×910CFU/kg地衣芽孢杆菌组。Rastall的研究报道：果寡糖在肠道中转化为脂肪酸后降低了结[79]肠微生态环境的pH，从而促进矿物质的吸收，尤其是钙和镁的吸收。因此可知，较高浓度的果寡糖添加量以及较高浓度的合生元制剂的使用均能在一定程度上提高断奶仔猪的钙表观消化率。19 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响90.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的磷表观消化率在各试验组中最低，且显著低于991×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS组。而1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的磷表观消化9率最高且显著高于对照组和0.2%FOS组。此外各试验组0.4%FOS组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS组的磷表观消化率均比对照组有所提高，但差异不显著。可见，益生菌的单独使用能显著提高断奶仔猪磷的表观消化率，而果寡糖添加量和较高浓度合生元制剂也在一定程度上影响断奶仔猪磷表观消化率的提高。各试验组对断奶仔猪能量的表观消化率均无显著性影响，但都较对照组有所提高，依高99至低排序为：0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.4%FOS组、0.2%FOS+1×10CFU/kg9地衣芽孢杆菌组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS。可见果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能在一定程度上促进断奶仔猪能量表观消化率的提高。2.4本章小结添加果寡糖或地衣芽孢杆菌在饲料中单独或联合使用添加均能有效地降低断奶仔猪保育期的料重比，并在一定程度上提高断奶仔猪保育期的平均末重、平均日增重，但对平均日9采食量的影响不大甚至降低。其中0.2%FOS和0.4%FOS的添加量以及0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌混合添加量的断奶仔猪保育期的料重比显著高于对照组。因此，不同浓度的果寡糖添加量以及较高浓度的合生元制剂的使用对降低断奶仔猪保育期料重比有显著效果。添加果寡糖或地衣芽孢杆菌制剂在饲料中单独或联合使用添加均能在一定程度上降低断奶仔猪保育期的淘汰率、死亡率、死淘率、腹泻率发病指数和发病率。而较高浓度的果寡糖添加量和益生菌的单独使用能显著有效降低断奶仔猪保育期的发病率。而低浓度的果寡糖添加量以及合生元制剂的联合使用也有降低断奶仔猪保育期的发病率的趋势，效果最佳的为90.4%FOS，其次为1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌。20 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响第三章果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪血液生理生化指标和免疫器官指数的影响3.1材料与方法3.1.1试验用添加剂试验用果寡糖产品及地衣芽孢杆菌制剂同第二章2.1.1所用一致。3.1.2试验动物及试验地点试验动物及试验地点同第二章2.1.2。3.1.3试验设计及饲粮处理试验设计及饲粮处理同第二章2.1.3，试验饲粮配方及营养成分见第二章表2-2。3.1.4试验饲养管理饲养管理方法见第二章2.1.4，具体免疫程序见第二章表2-3。3.1.5试验指标测定及方法1.血清生化指标血清样品的采集：饲养试验结束前1d，各组选取3头精神状态良好、体型体重处于该组平均水平的仔猪，于清晨空腹状态下，前腔静脉采血5mL，置于干净的离心管内，先静置1-2小时，然后4000r/min离心5min，分离血清，-4℃冰箱保存。采用7600型日立全自动血液生化分析仪及相关配套试剂测定血清指标。白蛋白(ALB)采用溴钾酚绿法、总蛋白(TP)采用双缩脲法、球蛋白(GLO)、白蛋白/球蛋白（A/G）换算得出，空腹血葡萄糖(GLU)采用GOD-PAP终点法，尿素(UREA)采用IFCC动力法，天门冬氨酸氨基转移酶（谷草转氨酶，AST）、谷丙转氨酶(丙氨酸氨基转移酶，ALT)和碱性磷酸酶(ALP)采用标准化对应法，谷草/谷丙比值（AST/ALT）计算得出，总胆固醇(T-CHO)采用胆固醇氧化酶，N-(3-磺丙基)-3-甲氧基-5-甲基苯胺法，甘油三酯(TG)采用磷酸甘油氧化酶法,N-(3-磺丙21 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响基)-3-甲氧基-5-甲基苯胺法，去游离甘油法。Ca采用乙二胺四乙酸二钠滴定法，P采用钒钼酸铵显色法。2.血液生理指标血液样品的采集：饲养试验结束前1d，各组选取3头精神状态良好、体型体重处于该组平均水平的仔猪，于清晨空腹状态下，前腔静脉采血5mL，置于抗凝管中，4℃冰箱保存。各指标使用SYSMEXKX-21N型全自动三分类血球分析仪进行测定，包括：白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积、红细胞平均体积、平均血红蛋白含量、平均血红蛋白浓度、血小板计数、血小板平均体积、血小板分布宽度、中性粒细胞绝对值、中性粒细胞百分比、淋巴细胞绝对值、淋巴细胞百分比、单核细胞绝对值、单核细胞百分比、嗜酸性粒细胞绝对值、嗜酸性粒细胞百分比、嗜碱性粒细胞绝对值、嗜碱性粒细胞百分比、RBC体积分布宽度、血小板体积。3.免疫器官指数在试验猪为56±1日龄时，随机抽取每组每重复中1头仔猪进行屠宰解剖，称量其胴体重；分离免疫器官，称量其免疫器官重，计算仔猪免疫器官指数。分离免疫器官包括腹股沟淋巴结、脾脏、心脏、肺、肝脏、肾脏（一对）、胰脏、胸腺（左侧）、扁桃体、颌下淋巴结。计算公式如下：（3-1）3.1.6数据分析方法试验数据分析处理同第二章2.1.6。3.2结果与分析3.2.1血清生化指标由表3-1可知，Ⅴ组的总蛋白含量最高，且显著高于对照组（P<0.05）；而其余各试验组的总蛋白含量也均高于对照组，但差异不显著（P>0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的总蛋白含量分别比对照组提高了11.64%、5.12%、9.34%和5.68%。0.2%FOS组白蛋白含量最高，且显著高于对照组（P<0.05）。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的白蛋白含量则分别比对照组提高了20.95%、17.34%、11.56%和9.91%，但各组差异不显著（P>0.05）。22 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响表3-1果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪血清生化指标的影响Table3-1TheeffectsofFOSandBLonserumbiochemicalindexesofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅴ组Ⅵ组对照0.2%FOS0.4%FOS1×0.2%FOS+1×0.4%FOS+1×99910CFU/kgBL10CFU/kgBL10CFU/kgBLba总蛋白TP（g/L）44.450±2.00649.625±46.725±48.600±50.150±2.81546.975±abababab1.0191.4601.8702.333b白蛋白ABL24.225±2.24830.725±29.300±28.425±27.025±26.625±aabababab（g/L）1.1771.8580.7832.5121.664球蛋白GLO20.225±0.97118.900±0.88117.425±20.175±1.95023.125±4.80620.350+0.726（g/L）0.792baababab白蛋白/球蛋白1.175±0.1491.650±1.725±0.1551.475±0.1441.375±0.2961.325±0.048abA/G0.144丙氨酸氨基转移47.75±49.9456.75±5.4762.00±4.0057.50±9.1766.00±11.5167.75±8.14酶ALT(U/L)bbab天门冬氨酸氨基89.75±9.8291.75±78.25±14.07200.75±86.39106.50±90.25±6.26abab转移酶AST17.0126.37（U/L）bccacc谷草/谷丙比值1.975±0.3091.625±0.2751.225±0.1443.100±0.8771.675±0.2961.375±0.155AST/ALT碱性磷酸酶ALP169.75±33.36208.75±25.12145.25±167.75±12.48167.75±24.32172.25±4.64（U/L）25.62abbaab尿素UREA4.180±0.5433.865±4.0275±2.163±0.2504.905±1.2562.760±0.527abab（mmol/L）0.6971.336总胆固醇2.070±0.3562.153±0.2332.150±0.1372.240±0.1472.313±0.2092.030±0.122T-CHO(mmol/L)甘油三酯TG0.450±0.1250.593±0.1300.608±0.2150.470±0.0540.660±0.1070.378±0.059（mmol/L）高密度脂蛋白胆0.788±0.1520.880±0.0990.753±0.1100.890±0.0470.715±0.1210.738±0.074固醇HDL-C(mmol/L)低密度脂蛋白胆1.160±0.2231.085±0.1621.220±0.0661.098±0.0641.308±0.1831.113±0.023固醇LDL-C（mmol/L）空腹血葡萄糖3.225±0.3233.582±0.5503.375±0.3833.867±0.3983.348±0.4983.280±0.452GLU（mmol/L）abbaaba总钙Ca2.502±0.0692.432±2.262±0.1462.593±0.0662.423±0.1062.523±0.099ab（mmol/L）0.041abababab磷P（mmol/L）2.693±0.4153.383±3.533±0.2142.555±0.3112.715±0.3503.130±0.114ab0.447免疫球蛋白0.955±0.0360.805±0.0750.808±0.1040.663±0.2040.690±0.1720.953±0.076GIgG（g/L）免疫球蛋白0.098±0.0180.115±0.0060.135±0.0100.113±0.0210.095±0.0280.123±0.019MIgM（g/L）23 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响相比于对照组，各试验组的球蛋白含量参差不齐。其中，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的球蛋白含量低于对照组，而Ⅴ组和Ⅵ组的球蛋白含量则分别比对照组提高了14.34%和0.62%，但各组间差异均无显著性（P>0.05）。在白蛋白/球蛋白比值中，0.4%FOS组比值最高，且显著高于对照组（P<0.05）。而其余各试验组白蛋白/球蛋白比值亦均高于对照组，Ⅱ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的白蛋白/球蛋白比值分别比对照组提高了40.43%、25.53%、17.02%和12.77%，但组间差异不显著（P>0.05）。相比对照组，各试验组丙氨酸氨基转移酶含量均提高，但组间差异不显著（P>0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的丙氨酸氨基转移酶分别比对照组提高了18.85%、29.84%、20.42%、38.22%和41.88%。各试验组天门冬氨酸氨基转移酶含量中，Ⅳ组含量最高，且显著高于对照组、Ⅲ组和Ⅵ组（P<0.05）。相比对照组，除Ⅲ组外的各试验组天门冬氨酸氨基转移酶含量均高于对照组，Ⅱ组、Ⅴ组和Ⅵ组分别提高了2.23%、18.66%和0.56%，但各组间差异不显著（P>0.05）。各试验组谷草/谷丙比值组间差异显著，Ⅳ组的谷草/谷丙比值最高，且显著高于对照组（P<0.05），而对照组和Ⅳ组组谷草/谷丙比值显著高于Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅴ组和Ⅵ组（P<0.05）。除Ⅱ组和Ⅵ组的碱性磷酸酶高于对照组22.97%和1.47%，其余各试验组的碱性磷酸酶均低于对照组，且各组间差异均不显著（P<0.05）。Ⅴ组的尿素含量高于对照组17.34%，且差异不显著（P>0.05）；但显著高于Ⅲ组尿素含量（P<0.05）。其余各试验组Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的尿素含量分别比对照组降低了7.54%、3.65%、48.25%和33.97%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组的总胆固醇含量组间差异不显著（P>0.05）。除Ⅵ组的总胆固醇含量低于对照组1.93%外，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组的总胆固醇含量分别比对照组提高了4.01%、3.86%、8.21%和11.74%。除Ⅵ组的甘油三酯含量低于对照组16.00%外，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组的甘油三酯含量分别比对照组提高了31.78%、35.11%、4.44%和46.67%，但各组间差异不显著（P>0.05）。各试验组的高密度脂蛋白胆固醇含量组间差异不显著（P>0.05）。其中Ⅱ组和Ⅳ组的高密度脂蛋白胆固醇比对照组分别提高了11.68%和12.94%；而Ⅲ组、Ⅴ组和Ⅵ组高密度脂蛋白胆固醇则分别比对照组降低了4.44%、9.26%和6.35%。Ⅲ组和Ⅴ组的低密度脂蛋白胆固醇比对照组分别提高了5.17%和12.76%；而Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅵ组的低密度脂蛋白胆固醇则分别比对照组降低了6.47%、5.35%和4.05%，各试验组间不24 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响呈显著性差异（P>0.05）。各试验组空腹血葡萄糖含量均高于对照组，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的空腹血葡萄糖含量分别比对照组提高了11.07%、4.65%、19.91%、3.81%和1.71%，但各组间差异不显著（P>0.05）。各试验组总钙含量相比于对照组均不呈显著性差异（P>0.05）。其中Ⅳ组和Ⅵ组的总钙含量分别比对照组提高3.63%和0.84%，且显著高于Ⅲ组（P<0.05）。除Ⅳ组的磷含量低于对照组且显著低于Ⅲ组（P<0.05）外，各试验组的磷含量均高于对照组，但差异不显著（P>0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅴ组和Ⅵ组的磷含量分别比对照提高25.62%、31.19%、0.82%和16.23%。各试验组的免疫球蛋白G含量均略低于对照组，但不呈显著性差异（P>0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的IgG含量分别比对照组降低了15.71%、15.39%、30.58%、27.75%和0.21%。除Ⅴ组的免疫球蛋白M的含量略低于对照组，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的IgM含量分别比对照组提高了17.35%、37.76%、15.31%和25.51%，但各组间差异不显著（P>0.05）。3.2.2血液生理指标由表3-2可知，各试验组白细胞计数值均高于对照组，其中Ⅵ组的白细胞计数值最高，且显著高于对照组和Ⅴ组（P<0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组的WBC值分别比对照组高11.60%、8.72%、34.26%和0.69%，但各组间差异不显著（P>0.05）。各试验组红细胞计数均高于对照组，但不呈显著性影响（P>0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组RBC值分别比对照组提高了8.19%、0.71%、7.60%、5.10%和1.73%。除Ⅵ组的血红蛋白值低于对照组0.94%外，各试验组HGB值均高于对照组，但各试验组间差异不显著（P>0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组HGB值分别比对照组提高了7.88%、2.52%、7.72%和5.74%。其中Ⅱ组HGB值显著高于Ⅵ组（P<0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组红细胞压积值均高于对照组，分别提高了9.85%、2.39%、7.46%、6.57%和3.88%，但各组间差异不显著（P>0.05）。各试验组的平均红细胞体积虽不与对照组呈显著性影响（P<0.05），但Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组MCV值均高于对照组，分别提高了1.05%、2.01%、0.13%、0.63%和2.06%。除Ⅱ组和Ⅵ组的平均RBC血红蛋白含量分别低于对照组0.22%和2.30%外，Ⅲ组、Ⅳ组25 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响和Ⅴ组的MCH含量分别高于对照组1.68%、0.10%和0.59%，但各试验组间差异均不呈显著性相关（P>0.05）。各试验组平均RBC血红蛋白浓度的组间差异不显著（P>0.05）。除Ⅳ组和Ⅴ组的MCHC浓度分别略高于对照组0.02%和0.06%外，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅵ组的MCHC浓度分低于对照组1.24%、0.34%和4.25%。除Ⅳ组和Ⅴ组的MCHC浓度分别略高于对照组0.02%和0.06%外，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅵ组的MCHC浓度分低于对照组1.24%、0.34%和4.25%，但各试验组间均不呈显著性差异（P>0.05）。各试验组的血小板计数值组间差异均不显著（P>0.05）。除Ⅲ组和Ⅵ组的PLT值分别高于对照组6.90%和8.33%外，Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组的PLT值分别比对照组降低33.06%、42.07%和47.56%。各试验组的血小板平均体积均低于对照组，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的MPV分别降低了2.43%、4.65%、12.57%、5.06%和2.02%，但各组间不呈显著性差异（P>0.05）。Ⅴ组的血小板分布宽度值最高，且显著高于Ⅲ组和Ⅳ组（P<0.05）。相比于对照组，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组各试验组的PDW值分别降低了1.14%、2.86%和2.86%，而Ⅴ组和Ⅵ组的PDW值分别提高了4.57%和1.71%，但各试验组间不呈显著性差异（P>0.05）。表3-2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪血液生理指标的影响Table3-2TheeffectsofFOSandBLonbloodphysiologicalindexesofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅴ组Ⅵ组对照0.2%FOS0.4%FOS1×0.2%FOS+1×0.4%FOS+1×99910CFU/kgBL10CFU/kgBL10CFU/kgBLa白细胞计数16.348±18.245±17.773±21.948±16.460±24.425±1.5899babababbWBC(10/L)1.7952.1522.2863.7032.745红细胞计数5.883±0.1076.365±0.2845.925±0.1846.330±0.0826.183±0.1185.985±0.21612RBC(10/L)血红蛋白HGB(g/l)105.950±114.300±108.625±114.125±112.033±104.955±abaabaabb3.0114.5934.2720.8782.2152.142红细胞压积HCT0.335±0.0100.368±0.0210.343±0.0120.360±0.0040.357±0.0030.348±0.010平均红细胞体积56.750±0.87657.345±0.62357.890±0.63756.823±0.91357.107±0.56957.918±2.201MCV平均RBC血红蛋18.010±0.24217.970±0.21818.313±0.18318.028±0.11718.117±0.11217.595±0.650白含量MCH(pg)平均RBC血红蛋317.400±313.475±316.325±317.450±317.600±303.925±AAaAaAAaBb白浓度MCHC(g/l)2.1194.7492.3253.5232.8293.426血小板计数302.625±202.575±323.500±175.300±158.700±327.825±9PLT(10/l)66.78659.83640.98379.26130.13556.81526 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响项目Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅴ组Ⅵ组对照0.2%FOS0.4%FOS1×0.2%FOS+1×0.4%FOS+1×910CFU/kgBL109CFU/kgBL109CFU/kgBL血小板平均体积11.710±0.96311.425±0.90211.165±0.60610.238±0.83511.117±0.78211.473±0.639MPVababbbaab血小板分布宽度0.175±0.0050.173±0.0030.170±0.0040.170±0.0040.183±0.0030.178±0.003PDW中性粒细胞绝对值7.335±2.4056.003±3.1302.508±1.2444.475±1.6017.410±1.3297.955±2.8919NEU(10/L)中性粒细胞百分比0.473±0.1540.291±0.1300.173±0.0970.216±0.0850.460±0.0800.312±0.108NEU%baaba淋巴细胞绝对值5.115±1.77410.348±10.520±14.050±4.5207.630±2.52012.358±1.4619ababLYM(10/L)1.1552.422baaaabab淋巴细胞百分比0.306±0.0840.596±0.0950.577±0.0880.612±0.1070.445±0.0750.521±0.092LYM%bbababaab单核细胞绝对值0.298±0.1480.235±0.0700.350±0.2580.300±0.1470.730±0.2150.458±0.1669MONO(10/L)单核细胞百分比0.017±0.0080.012±0.0030.024±0.0200.014±0.0070.048±0.0200.018±0.005MONO%abbabababa嗜酸性粒细胞绝对0.178±0.0780.088±0.0470.248±0.0820.248±0.1230.290±0.1000.415±0.1129值EOS(10/L)嗜酸性粒细胞百分0.011±0.0040.006±0.0030.016±0.0060.012±0.0060.020±0.0080.017±0.004比E0S%嗜碱性粒细胞绝对3.425±3.1401.570±1.3684.153±2.1582.870±2.6840.393±0.1963.380±1.7399值BISO(10/L)嗜碱性粒细胞百分0.194±0.1770.095±0.0850.211±0.1080.146±0.1380.028±0.0170.133±0.065比BIS0%RBC体积分布宽度0.175±0.0050.175±0.0030.178±0.0030.185±0.0120.180±0.0060.193±0.005RDWCV血小板体积PCT0.337±0.0550.233±0.0680.364±0.0550.196±0.0960.179±0.0440.376±0.073除Ⅴ组和Ⅵ组的中性粒细胞绝对值分别高于对照组1.02%和8.45外，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的NEU绝对值比对照组分别降低了18.16%、65.81%和38.99%，但各试验组间差异不显著性（P>0.05）。相比对照组，各试验组中性粒细胞百分比均降低，但组间差异不显著（P>0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的NEU百分比分别比对照组降低了38.48%、63.43%、54.33%、2.75%和34.04%。27 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响各试验组的淋巴细胞绝对值均高于对照组，其中Ⅳ组的LYM绝对值最高，其次为Ⅵ组，且此两组的LYM绝对值均显著高于对照组（P<0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅴ组的LYM绝对值分别比对照组提高102.31%、105.67%和49.17%，但组间差异不显著（P>0.05）。对照组的淋巴细胞百分比低于各试验组，其中Ⅳ组的LYM百分比最高，其次为Ⅱ组，再次为Ⅲ组，且此三组的LYM百分比均显著高于对照组（P<0.05）。Ⅴ组和Ⅵ组的LYM百分比分别比对照组提高45.42%和70.26%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组单核细胞绝对值中Ⅴ组MONO绝对值最高，且显著高于对照组和Ⅱ组（P<0.05）。除Ⅱ组MONO绝对值低于对照组21.14%外，Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的MONO绝对值分别比对照组提高了17.45%、0.67%和53.69%，且各组间差异不显著（P>0.05）。除了Ⅱ组和Ⅳ组的单核细胞百分比较对照组分别降低29.41%和17.65%外，Ⅲ组、Ⅴ组和Ⅵ组MONO百分比分别比对照组提高41.18%、182.35%和5.88%，但各组间不呈显著性差异（P>0.05）。Ⅵ组的嗜酸性粒细胞绝对值最高，且显著高于Ⅱ组（P<0.05）。相对于对照组，各试验组的EOS绝对值均不呈显著性影响（P>0.05）。除Ⅱ组EOS绝对值低于对照组50.56%外，Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的EOS绝对值比对照组分别提高了39.33%、39.33%、62.92%和133.15%。除Ⅱ组嗜酸性粒细胞百分比低于对照组45.46%外，Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的EOS百分比分别比对照组提高了45.46%、9.09%、81.82%和54.55%，但各试验组间差异不显著（P>0.05）。各试验组的嗜碱性粒细胞绝对值组间差异不显著（P>0.05）。除了Ⅲ组BISO绝对值比对照组提高21.26%外，Ⅱ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的BISO绝对值分别比对照组降低了54.16%、16.20%、88.53%和1.31%。除了Ⅲ组BISO百分比较对照组提高8.76%外，Ⅱ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的BISO百分比分别比对照组降低了51.03%、24.74%、85.57%和31.44%，但各试验组间不呈显著性差异（P>0.05）。各试验组RBC体积分布宽度组间差异不呈显著行影响（P>0.05）。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的RDWCV值分别比对照组提高了1.71%、5.71%、2.86%和10.29%。除Ⅲ组和Ⅵ组的血小板体积分别比对照组提高8.01%和11.57%外，Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组的PCT值分别比对照组降低了30.86%、41.84%和46.88%，且各试验组间差异不显著（P>0.05）。28 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响3.2.3免疫器官指数由表3-3可知，在各试验组免疫器官指数比对中，试验Ⅳ组的腹股沟淋巴结指数显著高于对照组（P<0.05），而试验Ⅲ组和Ⅵ组的腹股沟淋巴结指数均比对照组提高了57.14%（P>0.05）。试验Ⅲ组的脾脏指数显著高于对照组（P<0.05），而试验Ⅳ组和Ⅵ组的脾脏指数分别比对照组提高了40.63%和62.50%（P>0.05）。试验各组和对照组的心脏指数组间差异不显著且各组间差异甚微（P>0.05）。相比对照组，Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的肝脏指数分别提高了0.56%、1.13%和9.95%，但组间差异不显著（P>0.05）。试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的肾脏指数均高于对照组，分别为1.98%、17.82%和11.88%，但各组间差异不显著（P>0.05）。除Ⅲ组外，试验Ⅳ组和Ⅵ组的胰脏指数均高于对照组，其中Ⅵ组的胰脏指数显著高于对照组、试验Ⅲ组和Ⅳ组（P<0.05），而试验Ⅳ组胰脏指数比对照组高6.25%但差异不显著（P>0.05）。各试验组的胸腺指数均不呈显著性差异，Ⅵ组与对照组的胸腺指数最高，均为0.11%（P>0.05）。试验各组的扁桃体指数比对照组均无显著性差异，但试验Ⅲ组和Ⅵ组的扁桃体指数均比对照组提高了25%（P>0.05）。各试验组中，Ⅲ组的颌下淋巴结指数最高，比对照组提高了45.45%，但是各试验组间差异不显著（P>0.05）。表3-3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪免疫器官指数的影响Table3-3TheeffectsofFOSandBLonimmuneorganindexesofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组9(%)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×910CFU/kgBLbabaab腹股沟淋巴结指数0.07±0.000.11±0.010.13±0.030.11±0.01baabab脾脏指数0.32±0.020.72±0.180.45±0.020.52±0.12心脏指数1.00±0.041.00±0.091.01±0.081.01±0.03肺指数2.51±0.723.69±0.113.10±0.003.17±0.28肝脏指数5.32±0.065.35±0.355.38±0.065.85±0.41肾脏（一对）指数1.01±0.041.03±0.061.19±0.101.13±0.04bbba胰脏指数0.32±0.020.30±0.000.34±0.010.41±0.00胸腺指数0.11±0.010.10±0.010.09±0.020.11±0.01扁桃体指数0.04±0.350.05±0.420.04±0.230.05±0.81颌下淋巴结指数0.11±0.030.16±0.080.10±0.020.09±0.0129 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响3.3讨论3.3.1果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期血清生化指标的影响当肝脏发生病变时，肝细胞合成蛋白质的功能减退，血浆中蛋白质即会发生质和量的变化。血浆蛋白的含量可用于诊断测定肝脏疾患，预后判断的指标。本试验结果表明，各试验9组的总蛋白含量均高于对照组，且0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组TP含量显著高于对照组。陈旭东的试验研究表明，果寡糖及芽孢杆菌制剂能显著提高断奶仔猪血清总蛋白水[80][81]平。李晓丽等研究表明添加果寡糖能显著提高固始鸡血清总蛋白含量。这说明果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清中总蛋白质含量，且以低剂量的合生元制剂效果最佳。血清白蛋白具有结合和运输内源性与外源性物质，维持血液胶体渗透压，清除自由基，抑制血小板聚集和抗凝血等生理功能，在生命过程中有着重要的意义。本试验结果表明，各试验组的白蛋白含量均高于对照组，其中0.2%FOS组的白蛋白含量最高其显著高于对照组。肝功能受损时，白蛋白含量会降低。李晓丽等研究表明添加果寡糖能显著提高固始鸡血清白[81]蛋白含量。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清中白蛋白蛋白质含量，且以较低浓度果寡糖添加量效果最佳。血清球蛋白由动物机体单核吞噬细胞系统合成，其含量的增高可能由慢性炎症和感染所9引起。本试验中，除了0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的球蛋白含量略高于对照组外，各试验组的球蛋白含量均低于对照组，但各试验组间差异不显著。陈旭东的试验研究表[80]明，果寡糖和芽袍杆菌对仔猪血清球蛋白含量没有产生显著影响，但有下降的趋势。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用能在一定程度上降低断奶仔猪保育期血清中球蛋白含量。由本试验结果可知，各试验组的白蛋白与球蛋白比值比对照组有所提高，但均不呈显著性差异。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清中白蛋白与球蛋白比值。因为丙氨酸氨基转移酶非常敏感，所以其在血清中的含量波动较大。其含量的偏高或偏低都是动物机体异常的征兆，尤其是肝脏功能损失时的表现。本试验结果中各试验组的ALT均高于对照组，但各组间差异不显著，只能说明果寡糖及合生元制剂的使用或许能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清中丙氨酸氨基转移酶含量。30 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响天门冬氨酸氨基转移酶(AST)，也称谷草转氨酶（GOT），能反应动物机体组织的损伤程度以及心肌、肝、肾的的病变。本试验结果中除0.4%FOS组AST含量低于对照组外，各试验9组的AST含量均高于对照组。其中1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的AST含量最高且显著高于对照组。这说明益生菌的单独添加或许有提高断奶仔猪保育期血清中AST含量的趋势。但外界的因素也可能引起血清中AST含量的短暂提高，如剧烈运动或应激等。由于未见本试验断奶仔猪机体发生病变，所以试验组中断奶仔猪血清中AST含量的提高很有可能是由于应激所产生。9由本试验可知，1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的谷草与谷丙比值最高，且显著高于对照组和其他试验组，而对照组的谷草与谷丙比值显著高于其他试验组。由此可见，益生菌的使用能有效提高断奶仔猪保育期谷草与谷丙比值，而果寡糖与合生元制剂的使用则明显降低了断奶仔猪保育期血清谷草与谷丙比值。碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶，在骨骼生长期，或当肝脏、骨骼受到损伤或者障碍时，都会引起血清碱性磷酸酶明显升高。本试验结果表明，各试验组间的碱性磷酸酶值差异不显著，说明果寡糖与地衣芽孢杆菌制剂的使用对断奶仔猪保育期血清碱性磷酸酶影响不明显。血清中尿素是人体蛋白质代谢的主要终末产物，通过测定尿素氮,可以了解肾小球的滤过功能，其含量增高主要见于肾脏功能的损伤或炎症。本试验结果中，对照组与0.2%FOS+199×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的血清尿素含量最高，且显著高于1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。而其余各试验组的血清尿素含量均低于对照组。陈旭东的试验研究表明，果寡糖、果[80]寡糖加芽孢杆菌均能显著提高仔猪血清尿素氮含量。这说明益生菌能有效降低断奶仔猪保育期的血清尿素含量，而果寡糖的使用也能在一定程度上降低断奶仔猪的血清尿素含量。9由本试验结果可知，除0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组外，各试验组的总胆固醇含量均略高于对照组，但各组均不呈显著性影响。这说明果寡糖的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清总胆固醇含量，而地衣芽孢杆菌及合生元制剂的效果则不明显。甘油三酯是被储藏起来的热量源，甘油三酯是动物机体的脂肪成分，如皮下脂肪。由本9试验结果可知，除0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组外，各试验组的甘油三酯含量均高于对照组，但各组间差异不显著。可见，果寡糖的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清甘油三酯含量，而合生元制剂的使用效果不明显。9高密度脂蛋白胆固醇具有抗动脉粥样硬化的效果。本试验中，0.2%FOS组和1×10CFU/kg31 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响地衣芽孢杆菌组的HDL-C含量均高于对照组，而其余各试验组的HDL-C含量均低于对照组，可见果寡糖与地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪保育期血清高密度脂蛋白胆固醇影响不明显。肝脏功能异常或动脉粥样硬化都有可能引起低密度脂蛋白胆固醇含量升高。本试验中，各试验组LDL-C含量与对照组差异不显著。可见，果寡糖与地衣芽孢杆菌制剂的使用对断奶仔猪保育期血清低密度脂蛋白胆固醇影响不明显。血清葡萄糖是指血液中的葡萄糖浓度。除了饥饿、剧烈运动等生理活动会降低血清葡萄糖含量外，垂体前叶、肾上腺皮质和甲状腺功能的减退，以及长期营养不良、肝脏功能受损等也会引起血清葡萄糖含量的降低。本试验中各试验组的GLU含量均高于对照组。由此可知，果寡糖与地衣芽孢杆菌制剂的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清葡萄糖含量。各试验组的血清总钙含量相比于对照组均无显著性影响。可见，果寡糖与地衣芽孢杆菌制剂的使用对断奶仔猪保育期血清总钙含量无明显影响。99除1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组外，各试验组血清磷含量均高于对照组。可见果寡糖能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清磷含量。免疫球蛋白G主要在机体免疫中起保护作用，能有效地预防相应的感染性疾病。结缔组织和肝脏的疾病以及传染病等都会引起血清IgG含量的上升。本试验中，各试验组的IgG含量均低于对照组。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用能在一定程度上降低断奶仔猪保育期血清免疫球蛋白G的含量。9除0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的免疫球蛋白M含量略低于对照组，各试验组的IgM含量均高于对照组。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血清免疫球蛋白G的含量。3.3.2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期血液生理指标的影响白细胞(WBC)，又称白血球。一些传染病如伤寒、沙门菌属感染等，以及某类血液病和自身免疫性疾病都有可能引起血液中白细胞含量减少。本试验中各试验组的白细胞计数均高9于对照组，其中0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的WBC计数明显高于对照组。可见，较高浓度合生元制剂能显著提高断奶仔猪的白细胞计数，而果寡糖的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血液白细胞计数。红细胞的生成和破坏处于动态平衡，无论是升高还是降低都会导致疾病的发生，本试验中各试验组的红细胞计数均高于对照组但差异不显著。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的32 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血液红细胞计数。9血红蛋白是氧气运输的载体。本试验中除0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组外，各试验组的血红细胞值均高于对照组，但差异均不显著。可见果寡糖的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血液血红蛋白值。红细胞绝对值的增高会引起红细胞压积相应的增加。本试验中各试验组的红细胞压积均高于对照组，但差异不显著。可见果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血液红细胞压积。平均红细胞体积是判断动物机体贫血的指标之一。本试验中各试验组的平均红细胞体积均高于对照组，但差异不显著。可见果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血液平均红细胞体积。平均红细胞血红蛋白量的增多见于溶血性贫血，而MCH减少则见于缺铁性贫血。本试验中，各试验组MCH值较对照组差异不显著。可见果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用对断奶仔猪保育期血液中平均红细胞血红蛋白量的影响不明显。严重的呕吐、腹泻以及慢性心脏病等都会引起红细胞平均血红蛋白浓度的增加。本试验9中除0.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组外，各试验组的MCHC值均低于对照组。可见，果寡糖的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血液中红细胞平均血红蛋白浓度。血小板具有保护毛细血管完整性的功能。本试验中，各试验组血小板计数较对照组差异不显著。可见，果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期血液中血小板计数的影响不显著。用于判断出血倾向及骨髓造血功能变化，MPV减少可见于脾亢。本试验中，各试验组血小板平均体积均低于对照组，但差异不显著。可见果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用在一定程度上或许降低断奶仔猪保育期血液中血小板平均体积。血小板分布宽度又叫血小板体积分布宽度，其值的增加可见于某些血液性疾病。本试验中各试验组PDW较对照组差异不显著。可见果寡糖及地衣芽孢杆菌的饲喂对断奶仔猪保育期血液中血小板分布宽度的影响不明显。中性粒细胞绝对值是指白细胞计数中的中性粒细胞的含量，其增高一般代表细菌性感染或在机体受疼痛、寒冷等刺激，其减少则有可能见于感染性或血液系统疾病。有本试验结果9可知，0.2%FOS组、0.4%FOS组和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的NEU值低于对照组；而990.2%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的NEU值则高于对照组，但各组间差异均不显著。可见，果寡糖及益生菌的单独使用可能某程度上会降33 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响低断奶仔猪保育期血液中中性粒细胞绝对值，而两者的联合使用则会某程度上有所提高。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。本试验中，各试验组的NEU百分比均低于对照组。可见，果寡糖及益生菌可能在某程度上会降低断奶仔猪血液中中性粒细胞百分比。淋巴细胞是由淋巴器官产生的一种具有机体免疫应答功能的白细胞。本试验中试验各组9的淋巴细胞绝对值均高于对照组，其中1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS+1×910CFU/kg地衣芽孢杆菌组的LYM绝对值显著高于对照组。可见，果寡糖及益生菌的使用或许会增加断奶仔猪保育期血液中淋巴细胞绝对值。9本试验中试验各组的淋巴细胞百分比均高于对照组，其中0.2%FOS组和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的LYM百分比显著高于对照组。可见，果寡糖及益生菌的使用或许会增加断奶仔猪保育期血液中淋巴细胞百分比。单核细胞的增加可能见于某些感染疾病或血液病，也与轻度肺炎有关。本试验中各试验组的单核细胞绝对值与单核细胞百分比均与对照组无显著性影响。可见，寡糖及益生菌的使用对断奶仔猪保育期血液单核细胞的影响无明显效果。嗜酸性粒细胞是白细胞的一种。其数目的增多可见于某些过敏性疾病、支气管哮喘等。本试验中各试验组的嗜酸性粒细胞绝对值与百分比均较对照组无显著性影响。可见，寡糖及益生菌的使用对断奶仔猪保育期血液嗜酸性粒细胞无明显影响。本试验中各试验组的嗜碱性粒细胞绝对值与百分比均较对照组无显著性影响。可见，寡糖及益生菌的使用对断奶仔猪保育期血液嗜碱性粒细胞无明显影响。红细胞体积分布宽度增大，见于缺铁性贫血。本试验中各试验组的RDWCV值均较对有所提高，但不呈显著性影响。可见，寡糖及益生菌的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期血液RBC体积分布宽度。本试验中各试验组的血小板体积较对照组无显著性影响。可见，寡糖及益生菌的使用对断奶仔猪保育期血液血小板体积无明显影响。3.3.3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期免疫器官指数的影响伴随益生菌在机体消化道内繁殖产生的氨基酸类物质及维生素等是免疫器官生长发育[82]的原料；地衣芽孢杆菌的细胞壁含有肽聚糖和多糖，能直接活化内皮细胞、巨噬细胞及中[83]性粒细胞，促进免疫器官生长发育；益生菌在发酵的过程中形成的免疫活性成分，能以免疫佐剂的形式利于免疫器官的生长发育。孙小沛等使用地衣芽孢杆菌饲喂肉鸡发现，法氏囊34 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响和胸腺的发育有促进作用，说明地衣芽孢杆菌可增强体液免疫和细胞免疫，从而积极提高肉[78]鸡免疫器官生长。9由本试验结果可知，1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的腹股沟淋巴结指数较对照组呈显著9性提高，而0.4%FOS组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组腹股沟淋巴结指数虽不呈显著性影响，但也比对照组有所提高。可见，益生菌的单独使用能显著提高断奶仔猪保育期的腹股沟淋巴结指数，而果寡糖及果寡糖制剂的单独或联合使用效果则呈某程度上提高。由本试验结果可知，0.4%FOS组的脾脏指数于各试验组中最高，且显著高于对照组，而991×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组脾脏指数虽不呈显著性影响，但也比对照组有所提高。这说明果寡糖添加量的使用能显著提高断奶仔猪保育期的脾脏指数，而益生菌及地衣芽孢杆菌制剂的使用效果则呈一定程度上提高。各试验组心脏指数与对照组无显著性影响且相差甚微，可见果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对断奶仔猪保育期的心脏指数几乎无影响。各试验组肺指数与对照组无显著性影响，但均有所提高，依高至低排序：0.4%FOS组、990.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。这在某程度上反映了果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对断奶仔猪保育期的肺脏指数有所提高。各试验组肝脏指数比对照组有所提高，但不呈显著性影响，依高至低排序：0.4%FOS+199×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS组。这反映了果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对断奶仔猪保育期的肝脏指数呈一定程度上升。各试验组肾脏指数比对照组均有不同程度的提高，但不呈显著性影响，从高至低排序为：991×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS组。这反映了果寡糖及地衣芽孢杆菌的单独或联合使用可某在程度上提升断奶仔猪的肾脏指数。9有本试验结果可知，0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的胰脏指数要比对照组显著9提高。1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组胰脏指数虽比对照组有所提高，但不呈显著性影响。因此可知，地衣芽孢杆菌制剂对提高断奶仔猪保育期的胰脏指数效果明显。胸腺是细胞免疫的中枢器官。各试验组胸腺指数和扁桃体指数与对照组无显著性影响且相差甚微，可见果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对断奶仔猪保育期的胸腺指数和扁桃体指数几乎无影响。除0.4%FOS组的颌下淋巴结指数稍高于对照组外，各试验组颌下淋巴结指数均稍低于对照组，且各组间差异不显著。因此，对于果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对断35 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响奶仔猪保育期的颌下淋巴结指数的影响不大，而且其机制机理尚不明确。3.4本章小结果寡糖的使用能有效提高断奶仔猪血清中白蛋白含量及白蛋白/球蛋白比值，而果寡糖与地衣芽孢杆菌的联合使用能有效提高血清中总蛋白以及显著降低谷草/谷丙比值AST/ALT，进而有优化断奶仔猪保育期血清生化指标的趋势；各项指标表明果寡糖及地衣芽孢杆菌对断奶仔猪血液生理指标的影响总体不显著；果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合添加使用均有促进断奶仔猪保育期免疫器官的生长的趋势，在一定程度上提高免疫器官指数尤其是腹股沟淋巴结指数、脾脏指数和胰脏指数。36 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响第四章果寡糖和地衣芽孢杆菌对仔猪肠道内环境和肠道菌群的影响本章试验在第二章的基础上选取Ⅰ组（对照组）、Ⅲ组（0.4%FOS）、Ⅳ组（1×9910CFU/kgBL）和Ⅵ组（0.4%FOS+1×10CFU/kgBL）断奶仔猪作为试验对象，探索果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用对断奶仔猪保育期中肠道pH、酶活性、小肠肠道形态以及微生物的菌群的影响，并研究其作用机理。4.1材料与方法4.1.1试验用添加剂试验用果寡糖产品及地衣芽孢杆菌制剂同第二章2.1.1所用一致。4.1.2试验动物及试验地点试验动物及试验地点同第二章2.1.2。4.1.3试验设计及饲粮处理试验设计及饲粮处理同第二章2.1.3，试验饲粮营养组份及配方见第二章表2-2。4.1.4饲养试验管理饲养及管理标准见第二章2.1.4，具体免疫程序见第二章表2-3。4.1.5试验指标测定及方法1.肠道pH值9试验结束当天，在选定的试验组对照组、0.4%FOS组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组9和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组中每重复取1头精神状态良好、体型处于该组中等水平的保育期断奶仔猪，颈部放血处死，迅速剖开腹腔，小心取出肠道，并分别取出空肠、回肠、盲肠和结肠肠段食糜，用PHB-4便携式精密pH计分别测定空肠、37 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响回肠、盲肠和结肠食糜的pH值。2.肠道食糜粘度的测定采用奥式粘度计(0.5-0.6mm)测定小肠食糜相对粘度。试验结束当天，在选定的试验组99对照组、0.4%FOS组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组中每重复取1头仔猪，颈部放血处死，迅速抛开腹腔，结扎空肠和回肠两端小肠，切断取出，挤出肠道食糜于离心管中，以12000r/min于高速离心机中离心20min，取上清液。调节恒温水浴锅至30℃，预热黏度计5min，吸取食糜上清液5mL至粘度计内，记录食糜上清液通过刻度时间(S1)，测定同体积蒸馏水在同一粘度计中通过刻度时间(S2)。计算公式为：相对食糜粘度=上清液通过刻度时间(S1)/蒸馏水通过刻度时间(S2)（4-1）3.肠道形态9样品的采集：试验结束当天，在选定的试验组对照组、0.4%FOS组、1×10CFU/kg地9衣芽孢杆菌组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组中每重复取1头仔猪，空腹12h后，颈部放血处死，迅速抛开腹腔，迅速纵切肠段，截取1.5cm十二指肠(距幽门1cm处)、空肠的中段肠道（约1.0cm）、回肠(回盲瓣前端2cm处)，经生理盐水冲洗干净肠道的内容物，分别放入备用的4%多聚甲醛固定液中固定。石蜡切片制作：将固定约一周的小肠肠段取出，修块的厚度约为0.5cm左右并封在脱水篮中，再依次放入UP超纯水水10min→UP水10min→50%的酒精2h→75%酒精2h→85%酒精2h→95%酒精Ⅰ1h→95%酒精Ⅱ1h→100%酒精Ⅰ1h→100%酒精Ⅱ1h中逐步脱水，再经二甲苯Ⅰ30min→二甲苯Ⅱ30min→石蜡Ⅰ1h→石蜡Ⅱ1h→石蜡Ⅲ1h→包埋。修块好的包埋篮固定于轮转切片机上，将组织切成6μm左右薄片。45℃左右的组织漂烘仪温水浴上面贴片于载玻片上，烤片区2h→烘片区4h，准备染色。HE染：将切片放入二甲苯Ⅰ10min(脱蜡)→二甲苯Ⅱ10min→100%酒精Ⅰ5min→100%酒精Ⅱ5min→95%酒精Ⅰ5min→95%酒精Ⅱ5min→85%酒精3min→75%酒精2min→蒸馏水冲洗1min。染色：苏木精染液10min→自来水洗30s盐酸酒精分色15s→氨水返蓝5~10s→自来水洗30min→伊红染液3min→水洗30s→蒸馏水洗30s，用纱布擦净载玻片上的多余染料。再依次将染色的切片经75%酒精30s→85%酒精30s→95%酒精Ⅰ2min→95%酒精Ⅱ2min→100%酒精Ⅰ5min→100%酒精Ⅱ5min→二甲苯Ⅰ5min→二甲苯Ⅱ5min，然后中性树胶固封。[84]组织切片的观察：将样本蜡片切成7μm厚，苏木精-伊红染色。参照Frankel等在NikonYS100光学显微镜下观察肠绒毛形态，于每张组织切片上随机选取走向平直、结构完整的绒毛10根，并拍照。采用YLE-21DY高清晰度彩色病理图文报告分析系统自带图像分析软件38 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响IMAGEEX测量每个视野中最长绒毛的长度(VH)、隐窝深度(CD)、绒毛肠壁宽度(VW)(μ[85]m)，每张切片测量6～8次并通过计算得出绒毛长度/隐窝深度(V/C)，各指标取平均数作为测定数据。测定指标：绒毛长度；绒毛宽度；隐窝深度；绒毛长度/隐窝深度值(V/C)（4-2）5肠道微生物数量（1）微生物的培养基选择及配制选择性培养基的配方（g/L）、用途及使用方法：各类细菌培养基与培养条件见表4-1。表4-1选择性培养基与培养条件Table4-1Selectivemediumsandcultureconditions培养条件CultureConditions培养基菌种时间条件MediumStrains温度TemperatureTimeConditionsEMB琼脂大肠杆菌24h37℃±1℃耗氧BS琼脂沙门氏菌24h37℃±1℃耗氧BBL琼脂双歧杆菌48h37℃±1℃厌氧LBS琼脂乳酸杆菌48h37℃±1℃厌氧①大肠杆菌选择性培养基（EMB）：称取37.5g试样于1L去离子水或蒸馏水中，加热煮沸搅拌至完全溶解，分装，高压下121℃灭菌15min，冷却至50℃倾注灭菌培养皿。用于分离革兰氏阴性大肠菌群和粪大肠菌群。②沙门氏菌选择性培养基（BS）：称取试样50.4g于1L蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，冷却至55℃左右，摇匀，倾注平板备用。勿需高温灭菌，临用前一天配制。用于沙门氏菌选择性分离培养。（GB、SN标准、FDABAM）③双歧杆菌选择性培养基（BBL）：称取试样59.3g，加入蒸馏水或去离子水600mL和西红柿浸出液400mL（西红柿浸出液制备：将新鲜的西红柿洗净后称量切碎，加等量的蒸馏水在100℃水浴中加热，搅拌90min，然后用纱布过滤，校正pH7.0），搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min。用于双歧杆菌的分离、计数和培养。④乳酸杆菌选择性培养基（LBS）：称取试样72.3g于1L蒸馏水中，加热煮沸搅拌至完全溶解，高压下115℃灭菌20min，摇匀后铺制平板。用于乳酸杆菌的选择性分离培养。39 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响（2）微生物平板培养操作方法9试验结束当天，在选定的试验组对照组、0.4%FOS组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组9和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组中每组每重复随机选取1头仔猪，空腹12h后，颈部放血处死，迅速抛开腹腔，将小肠空肠、回肠以及大肠盲肠、结肠结扎取出至无菌操作台上，取各肠段内容物0.5g至试管，滴加4.5mL无菌生理盐水，于震荡器上震荡1min至溶-1-6-8解，浓度为10，而后稀释至浓度为10～10。使用移液枪吸取稀释后内容物0.1mL，均匀涂布至培养基表面，每样本选取最佳的3个梯度，每梯度涂板3个重复，各组均需以灭菌生理盐水做空白对照。各选择性培养基均需在无菌条件下37±1℃恒温培养24h，检验无杂菌后方可使用。需氧菌接种后在恒温培养箱中37±1℃培养24h，厌氧型菌置厌氧培养箱中37±1℃培养48h。[86，87]（3）微生物平板计数肉眼或放大镜观察培养后的平板，用计数器统计细菌数目，菌落计数以菌落（CFU）为单位，，菌落数的选择以无蔓延现象、数目在30～100为佳。微生物平板计数单位表示为lg(CFU/g)。计算公式为：（4-3）4.1.6数据分析方法试验数据分析处理同第二章2.1.6。4.2结果与分析4.2.1断奶仔猪保育期肠道pH由表4-2可知，断奶仔猪各肠道pH值中，试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的空肠pH值均显著低于对照组（P<0.05），而试验各组差异不显著（P>0.05），并且Ⅵ组的pH最低。试验组Ⅲ组的回肠pH值在各试验组中最低，且显著低于对照组、试验Ⅳ组和Ⅵ组（P<0.05）。试验Ⅳ组和Ⅵ组的回肠pH值分别比对照组降低了0.32%和0.97%，但差异不显著（P>0.05）。断奶仔猪盲肠pH值中试验各组及对照组间两两呈现显著性差异，对照组盲肠pH值最高，其余各试验组盲肠pH值依低到高分别为Ⅵ组、Ⅲ组、Ⅳ组（P<0.05）。相比于对照组，试验各组的40 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响结肠pH值组间均无显著性差异（P>0.05），但Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组分别比对照组降低了3.85%、2.45%和1.75%，且0.4%FOS组结肠pH值最低。表4-2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪肠道pH值的影响Table4-2TheeffectsofFOSandBLonofPHinintestinesofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLabbb空肠pH6.26±0.035.73±0.045.90±0.105.62±0.21abaa回肠pH6.18±0.145.47±0.226.16±0.116.12±0.09acbd盲肠pH5.65±0.115.22±0.025.47±0.005.01±0.00结肠pH5.71±0.035.49±0.025.57±0.155.61±0.054.2.2断奶仔猪保育期小肠食糜粘度由表4-3可知，断奶仔猪肠道食糜粘度比较中，试验Ⅲ组的空肠食糜粘度显著低于对照组（P<0.05）；而试验Ⅳ组和Ⅵ组的空肠食糜粘度较对照组分别降低了12.3%和23.08%，但差异不显著（P>0.05）。试验各组和对照组的回肠食糜粘度各组间差异不显著（P>0.05），且Ⅵ组最低，并比对照组降低了4.37%。表4-3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪小肠食糜粘度的影响Table4-3TheeffectsofFOSandBLonofchymeviscosityinsmallintestineofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99(X:1)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLababab空肠食糜粘度2.60±0.211.53±0.172.28±0.152.00±0.48回肠食糜粘度1.83±0.041.88±0.392.11±0.051.75±0.114.2.3断奶仔猪保育期小肠绒毛形态由表4-4可知，Ⅲ组的十二指肠绒毛长度在各试验组中最高，且显著高于对照组和Ⅵ组（P<0.05）；Ⅳ组十二指肠绒毛长度次之，且显著高于对照组（P<0.05）；Ⅵ组再之，且高于对照组24.98%，但差异不显著（P>0.05）。各试验组的十二指肠绒毛宽度均高于对照组，其中Ⅲ组的十二指肠绒毛宽度最高，且显著高于对照组和Ⅵ组（P<0.05）；Ⅳ组十二指肠绒毛宽度次之，且显著高于对照组（P<0.05）；Ⅵ组再之，且高于对照组6.60%，但差异不显著（P>0.05）。Ⅲ组的十二指肠绒毛隐窝深度在各试验组中最高，且显著高于其余各试验组（P<0.05）；对照组的十二指肠绒毛宽度次之，且显著高于Ⅳ组和Ⅵ组（P<0.05）。Ⅳ组的十二指绒毛长度/隐窝深度（V/C）值最高，Ⅵ组次之，且两组十二指肠绒毛V/C41 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响值均显著高于对照组。Ⅲ组十二指肠绒毛V/C值比对照组提高了22.53%，但组间差异不显著（P>0.05）。表4-4果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪十二指肠绒毛形态的影响Table4-4TheeffectsofFOSandBLonofvillimorphologyinduodenumofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99(μm)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLcaabbc绒毛长度325.88±2.01506.48±5.28426.60±8.42407.28±6.31caabbc绒毛宽度73.43±0.19100.60±0.4388.48±0.5578.28±0.34bacc隐窝深度118.12±1.15143.04±0.4898.50±0.3797.90±0.47babaa绒毛长度/隐窝深度2.76±0.463.54±0.454.33±0.804.16±0.53（V/C）由表4-5可知，Ⅲ组的空肠绒毛长度最高，且显著高于对照组和其余各试验组（P<0.05）。Ⅲ组和Ⅵ组分别比对照组提高了2.57%和0.44%，但组间差异不显著（P>0.05）。表4-5果寡糖和地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪空肠绒毛形态的影响Table4-5TheeffectsofFOSandBLonofvillimorphologyinjejunumofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99(μm)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLbab绒毛长度312.60±320.64±4.11376.16±2.83313.96±2.34b8.65BAaAAb绒毛宽度65.67±0.3585.59±0.9383.58±0.4377.48±0.14BBAB隐窝深度94.79±0.4292.19±0.90130.13±1.2691.39±0.56绒毛长度/隐窝深度3.30±0.883.48±0.682.89±0.593.44±0.53（V/C）试验各组的空肠绒毛宽度均极显著高于对照组（P<0.01）。其中，Ⅲ组空肠绒毛宽度最高，且显著高于Ⅵ组（P<0.05）。Ⅳ组的空肠绒毛隐窝深度最高，且极显著高于对照组和其余各试验组（P<0.01）。而Ⅲ组和Ⅵ组分别比对照组降低了2.75%和3.59%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组间的空肠绒毛长度/隐窝深度（V/C）值组间差异不显著（P>0.05）。除Ⅳ组，Ⅲ组和Ⅵ组的V/C值分别比对照组提高了11.76%和8.97%。由表4-6可知，试验各组的回肠绒毛长度均高于对照组。其中，Ⅵ组的回肠绒毛长度显著高于对照组（P<0.05）。而Ⅲ组和Ⅳ组分别比对照组提高了2.88%和5.72%，但组间差异不显著（P>0.05）。Ⅲ组的绒毛宽度最高，且显著高于对照组（P<0.05）。Ⅳ组和Ⅵ组的回肠绒毛宽度分别42 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响比对照组提高了0.51%和1.93%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组回肠隐窝深度与对照组差异均不显著（P>0.05）。除Ⅳ组外，Ⅲ组和Ⅵ组的回肠隐窝深度分别比对照组降低了2.74%和12.32%。除Ⅳ组外，Ⅲ组和Ⅵ组的回肠绒毛长度/隐窝深度（V/C）值分别比对照组提高了6.22%和16.87%，但各试验组与对照组间差异不显著（P>0.05）。表4-6果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪回肠绒毛形态的影响Table4-6TheeffectsofFOSandBLonofvillimorphologyinileumofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99(μm)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLaba绒毛长度304.24±313.00±321.64±0.92337.72±2.86bab2.602.34babb绒毛宽度77.98±0.2087.09±0.3278.38±0.2979.48±0.24隐窝深度117.02±1.29113.81±1.17130.83±1.55102.60±0.42绒毛长度/隐窝深度2.60±0.512.75±2.552.46±2.413.29±0.55（V/C）4.2.4断奶仔猪保育期肠道菌群由表4-7可知，各试验组断奶仔猪空肠前段的大肠杆菌数均低于对照组，其中Ⅲ组的空肠前段大肠杆菌数最低且显著低于对照组（P<0.05），而Ⅳ组和Ⅵ组的空肠前段大肠杆菌数则比对照组降低了2.48%和6.40%，但组间差异不显著（P>0.05）。表4-7果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪空肠前段内容物微生物数量的影响Table4-7TheeffectsofFOSandBLonofMicrobialquantityofContentsinAnteriorjejunumofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99lg(CFU/g)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLababab大肠杆菌7.66±0.726.83±0.117.47±0.307.17±0.28沙门氏菌3.96±0.453.85±0.473.72±0.743.25±0.51baaba乳酸杆菌7.28±0.327.84±0.557.43±0.387.69±0.39bababa双歧杆菌7.01±0.547.49±0.697.40±1.337.60±1.25各试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组的空肠前段沙门氏菌分别比对照组降低了2.78%、6.06%和17.93%，但各组间差异不显著（P>0.05）。各试验组中Ⅵ组的空肠前段乳酸杆菌数最高，Ⅲ组次之，且两组均显著高于对照组（P<0.05），而Ⅳ组的空肠前段乳酸杆菌数则比对照组提高了2.06%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组的空肠前段双歧杆菌数均高于对照组，其中Ⅵ组组最高且显著高于对照组43 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响（P<0.05），而Ⅲ组和Ⅳ组的空肠前段双歧杆菌数则分别比对照组提高了6.85%和5.56%，但组间差异不显著（P>0.05）。由表4-8可知，各试验组断奶仔猪空肠后段大肠杆菌数均低于对照组，其中Ⅳ组最低且显著低于对照组（P<0.05），而Ⅲ组和Ⅵ组的空肠后段大肠杆菌数则分别比对照组降低7.02%和5.87%，但组间差异不显著（P>0.05）。Ⅳ组空肠后段沙门氏菌数在各试验组中最低，Ⅲ组次之，且两组均显著低于对照组（P<0.05），而Ⅵ组的空肠后段沙门氏菌数则比对照组降低7.63%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组中Ⅲ组空肠后段乳酸杆菌数最高，Ⅵ组次之，且两组均显著高于对照组（P<0.05），而Ⅳ组空肠后段乳酸杆菌数比对照组提高5.65%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组断奶仔猪空肠后段双歧杆菌数均显著高于对照组（P<0.05）。表4-8果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪空肠后段内容物微生物数量的影响Table4-8TheeffectsofFOSandBLonofMicrobialquantityofContentsinPosteriorjejunumofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99lg(CFU/g)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLaabbab大肠杆菌7.83±0.157.28±0.137.06±0.977.37±0.85abbab沙门氏菌3.67±0.303.08±0.273.01±1.143.39±0.87baaba乳酸杆菌7.44±0.158.68±0.138.02±0.798.60±0.98baaa双歧杆菌7.65±1.078.23±1.157.96±0.428.31±0.52由表4-9可知，各试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组断奶仔猪回肠大肠杆菌数均显著低于对照组（P<0.05）。各试验组中Ⅵ组的回肠沙门氏菌数最低且显著低于对照组（P<0.05），而Ⅲ组和Ⅳ组则分别比对照组降低5.09%和1.27%，但各组间差异不显著（P>0.05）。表4-9果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪回肠内容物微生物数量的影响Table4-9TheeffectsofFOSandBLonofMicrobialquantityofContentsinileumofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99lg(CFU/g)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLabbb大肠杆菌7.38±0.8766.81±0.6236.89±0.6376.82±0.913aababb沙门氏菌3.93±0.243.73±0.213.88±0.183.01±0.11baaba乳酸杆菌6.99±1.197.83±0.747.58±1.327.70±0.52baaba双歧杆菌7.88±1.078.35±1.287.92±1.408.33±0.82Ⅲ组的回肠乳酸杆菌数在各试验组中最高，Ⅵ组次之，且两组均显著高于对照组（P<0.05），而Ⅳ组回肠乳酸杆菌数则比对照组提高5.87%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组的回肠双歧杆菌均高于对照组，且以Ⅲ组最高，Ⅵ组次之，且两组均显著高于对照组（P<0.05），而Ⅳ组回肠双歧杆菌数则比对照组提高0.51%，但组间差异不显著44 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响（P>0.05）。由表4-10可知，各试验组断奶仔猪盲肠大肠杆菌数均低于对照组，其中Ⅳ组最低，Ⅵ组次之，且两组均显著低于对照组（P<0.05），而Ⅲ组盲肠大肠杆菌数则比对照组降低3.11%，但组间差异不显著（P>0.05）。表4-10果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪盲肠内容物微生物数量的影响Table4-10TheeffectsofFOSandBLonofMicrobialquantityofContentsincecumofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99lg(CFU/g)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLaabbb大肠杆菌8.37±0.778.11±0.057.53±0.187.85±0.31abbb沙门氏菌5.32±0.065.01±0.095.10±0.404.73±0.70baaba乳酸杆菌8.19±0.228.77±0.748.23±0.888.56±0.38baaa双歧杆菌8.03±0.718.69±0.818.39±0.728.81±0.50各试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组盲肠沙门氏菌数均显著低于对照组（P<0.05）。Ⅲ组盲肠乳酸杆菌数于各试验组中最高，Ⅵ组次之，且两组均显著高于对照组（P<0.05），而Ⅳ组盲肠乳酸杆菌数则比对照组提高0.49%，但组间差异不显著（P>0.05）。各试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组盲肠乳酸杆菌数均显著高于对照组（P<0.05）。由表4-11可知，各试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组断奶仔猪结肠大肠杆菌数和沙门氏菌数均显著低于对照组（P<0.05）。各试验组Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅵ组结肠乳酸杆菌数均显著高于对照组（P<0.05）。各试验组结肠双歧杆菌数均高于对照组，其中Ⅲ组最高，Ⅵ组次之，且两组均显著高于对照组（P<0.05），而Ⅳ组结肠双歧杆菌数则比对照组提高2.06%，但组间差异不显著（P>0.05）。4-11果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪结肠内容物微生物数量的影响Table4-11TheeffectsofFOSandBLonofMicrobialquantityofContentsincolonofweaningpiglets项目Ⅰ组Ⅲ组Ⅳ组Ⅵ组99lg(CFU/g)对照0.4%FOS1×10CFU/kgBL0.4%FOS+1×10CFU/kgBLabbb大肠杆菌9.01±0.178.52±0.088.43±0.108.34±0.13abbb沙门氏菌5.77±0.065.29±0.195.38±0.464.92±0.87baaa乳酸杆菌8.53±0.248.82±0.178.75±0.859.22±0.78baaba双歧杆菌8.25±0.978.80±0.888.42±0.798.79±0.9545 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响4.3讨论4.3.1果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期肠道pH的影响肠道pH值是体现动物机体肠道平衡稳定最为直观的指标之一，是影响动物体内消化环境的重要因素。适宜的酸碱环境利于营养物质在消化道的充分消化吸收以及有益菌群的合理[78,88]生长，抑制病原微生物的繁殖增长。乳酸菌等有益菌适宜在畜禽胃肠道内酸性环境中繁殖，而致病菌生长则适宜呈中性或偏碱性的环境，微生态制剂可通过调节pH、菌群数量、酶[89]的活性甚至肠道结构来影响肠道。由本试验结果可知，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂各试验组的空肠pH值均显著低于对照9组，且以0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组空肠pH值最低，0.4%FOS组次之，1×910CFU/kg地衣芽孢杆菌组再之。可见，无论是果寡糖及益生菌的单独使用，还是合生元制剂的联合使用，均能有效降低断奶仔猪保育期空肠pH。90.4%FOS组的回肠pH值最低，且显著低于对照组。0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌9组和1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组回肠pH值仅次于0.4%FOS组也较对照组有所降低，但无显著性影响。由此可得，较高浓度的果寡糖添加量能有效降低断奶仔猪保育期回肠pH。而地衣芽孢杆菌及合生元制剂则在一定程度上呈降低效果。孙小沛等研究表明，地衣芽孢杆菌的[78]添加显著降低了肉鸡21d回肠、盲肠和直肠的pH值。各试验组盲肠pH值组间两两差异显著，各果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂试验组盲肠pH值9均显著低于对照组，pH值从低至高排序为：0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.4%FOS9组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和对照组。果寡糖可发酵糖类产生大量的乳酸、乙酸和丙酸，从而降低肠道的pH。而pH的降低可抑制有害微生物的繁殖，甚至直接杀死有害微生物。[88]窦茂鑫和吴涛的研究表明，饲料中添加芽孢杆菌有降低盲肠内容物pH的趋势。显然，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用均能有效降低断奶仔猪盲肠pH，且以合生元制剂的联合使用效果最佳。各果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂试验组结肠pH值均低于对照组，但不呈显著性影响，pH99值从低至高排序为：0.4%FOS组、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组、0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和对照组。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合使用能在一定程度上降低断奶仔猪结肠pH。46 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响4.3.2果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期小肠食糜粘度的影响由本试验结果可知，各试验组空肠食糜粘度均比对照组有所降低，其中0.4%FOS组的空9肠食糜粘度最低且显著低于对照组，其次为0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组和1×910CFU/kg地衣芽孢杆菌组的空肠食糜粘度也低于对照组但不呈显著性差异。由此可见，较高浓度果寡糖添加量能有效降低断奶仔猪保育期空肠食糜粘度，而益生菌及地衣芽孢杆菌制剂也能在一定程度上降低断奶仔猪保育期空肠食糜粘度。各果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂试验组的回肠食糜粘度均较对照组呈非显著性影响。除90.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组较对照组有所降低外，各试验组回肠食糜粘度反而较对照组成上升趋势。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂对断奶仔猪保育期回肠食糜粘度的影响波幅较大，对于其内在作用机制仍有待进一步研究。4.3.3果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪保育期小肠绒毛形态的影响在断奶仔猪十二指肠绒毛形态的观测中，由本试验结果可知，0.4FOS组的十二指肠绒9毛长度最高，1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组次之，均显著高于对照组（P<0.05）；而0.4FOS9组的十二指肠绒毛长度还显著高于0.4FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组（P<0.05）。可见，果寡糖及益生菌的单独使用比地衣芽孢杆菌的联合使用对提高断奶仔猪保育期十二指肠绒毛长度效果更为显著。由本试验结果可得，0.4FOS组的十二指肠绒毛宽度度最高，且显著高于对照组和990.4FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组（P<0.05）；而1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组次之，亦显著高于对照组（P<0.05）。可见，果寡糖及益生菌的单独使用对提高断奶仔猪保育期十二指肠绒毛长度效果显著，且优于合生元制剂的使用。9由本试验结果可知，0.4FOS组的隐窝深度显著高于对照组（P<0.05）；而1×10CFU/kg9地衣芽孢杆菌组和0.4FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的隐窝深度则显著低于对照组（P<0.05）。可见，地衣芽孢杆菌及合生元制剂的使用能显著降低断奶仔猪保育期十二指肠绒毛隐窝深度，而果寡糖添加量的使用反而提高了断奶仔猪的十二指肠绒毛隐窝深度。9各试验组的十二指肠绒毛长度与隐窝深度比值均高于对照组，其中1×10CFU/kg地衣9芽孢杆菌组和0.4FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的V/C值显著高于对照组（P<0.05）。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用能显著提高断奶仔猪保育期十二指肠绒毛长度与隐窝深度比值。47 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响在对本试验断奶仔猪空肠绒毛形态观测中发现，各试验组的空肠绒毛长度均高于对照9组，其中1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组最高，且显著高于对照组和各试验组（P<0.05）。由此可知，益生菌能有效提高断奶仔猪保育期空肠绒毛长度，而果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用也能在一定程度上有所提高。由本试验可知，相比对照组，各试验组均能极显著提高断奶仔猪保育期空肠的绒毛宽度9（P<0.01）。其中0.4FOS组的空肠绒毛宽度最高且显著高于0.4FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组。由此可见，果寡糖、地衣芽孢杆菌以及合生元制剂的使用均能极有效提高断奶仔猪保育期空肠绒毛宽度，且果寡糖的单独使用效果优于合生元制剂。9由本试验可知，除1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组极显著高于各组外（P<0.01），其余各试验组均低于对照组，但差异不显著。可见，益生菌能有效提高断奶仔猪保育期空肠绒毛隐窝深度，而果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用也能在一定程度上有所提高。9由本试验可知，除了1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组外，各试验组的空肠容貌高度与隐窝深度比值均较对照组有所提高，但组间差异均不显著。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用能在一定程度上提高断奶仔猪保育期空肠容貌高度与隐窝深度比值。在对本试验断奶仔猪回肠绒毛形态观测中发现，各试验组的回肠绒毛长度均高于对照9组，其中0.4FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的绒毛长度显著高于对照组（P<0.05）。可见，地衣芽孢杆菌制剂的使用能显著提高断奶仔猪保育期空肠绒毛长度，而果寡糖与益生菌的单独使用也能在一定程度上提高断奶仔猪空肠绒毛长度。由本试验结果可知，各试验组的回肠绒毛宽度均高于对照组，其中0.4FOS组的绒毛宽度显著高于对照组（P<0.05）。可见，果寡糖的使用能显著提高断奶仔猪保育期空肠绒毛长度，而地衣芽孢杆菌及合生元制剂的使用也能在一定程度上提高断奶仔猪空肠绒毛宽度。由本试验结果可知，各试验组的回肠绒毛宽度与对照组差异均不显著。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用对断奶仔猪保育期空肠绒毛宽度作用不明显。9由本试验结果可知，相比于对照组，除1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组外，各试验组V/C值均有所提高，但差异不显著。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的使用能在一定程度上提高断奶仔猪回肠高度与隐窝深度比值。48 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响4.3.4果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪肠道菌群的影响仔猪断奶后,肠道菌群原来固有的微生物区系发生改变,而其大肠杆菌浓度上升被认[90]为是导致仔猪腹泻的主要原因之一。由本试验结果可知，各试验组的空肠前段需氧菌数均低于对照组，其中0.4%FOS组大肠杆菌数显著低于对照组。各试验组的空肠前段厌氧菌数均9高于对照组，其中0.4%FOS组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组乳酸杆菌数显著高于9对照组，而0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的双歧杆菌数显著高于对照组。可见，对断奶仔猪空肠前段内容物微生物数量的影响，果寡糖及地衣芽孢杆菌的单独或联合使用均能在一定程度上降低需氧菌大肠杆菌和沙门氏菌的数量，并显著提高空肠前段乳酸杆菌数量，而对厌氧菌双歧杆菌的数量也有所提高。[91]盛清凯等研究表明，主要是消化道后段的部分微生菌群可选择性地发酵利用低聚糖。由本试验结果可知，各试验组的空肠后段需氧菌数均低于对照组，其中0.4%FOS组沙门氏菌99数、1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组大肠杆菌与沙门氏菌数均显著对照组。除1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组乳酸杆菌数增加外，各试验组空肠后段厌氧菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数均显著高于对照组。可见，对于断奶仔猪空肠后段内容物微生物数量的影响，果寡糖及地衣芽孢杆菌的单独或联合使用均能对需氧菌大肠杆菌和沙门氏菌的数量有所降低，且以果寡糖和益生菌的单独使用效果最佳。而对于厌氧菌乳酸杆菌和双歧杆菌，果寡糖及益生菌的单独或联合使用均能显著提高其数量。9由本试验结果可见，各试验组回肠需氧菌大肠杆菌数及0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢9杆菌组沙门氏菌数均显著低于对照组；而0.4%FOS组和0.4%FOS+1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组的厌氧菌乳酸杆菌和双歧杆菌数均显著高于对照组。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌作用明显，均能有效降低断奶仔猪回肠需氧菌大肠杆菌数，并在一定程度上降低沙门氏菌数，其中合生元的联合使用效果最佳。而果寡糖和果寡糖加益生菌的使用对提高断奶仔猪回肠内容物厌氧菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数的作用效果明显。张宏福等给断奶仔猪饲喂0.05%的IMO，发现仔猪盲肠及结肠中大肠杆菌浓度显著降低，[92]乳酸杆菌浓度显著提高，提高了双歧杆菌杆菌浓度但差异不显著。王岭添加0.5％-2％FOS[93]于雏鸡饲粮中，发现19日龄时雏鸡盲肠的沙门氏菌定植数量显著降低。由本试验结果可得，除0.4%FOS组大肠杆菌数有所降低外，各试验组的盲肠需氧菌大肠杆菌数和沙门氏菌数9均比对照组显著增加。除1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组乳酸杆菌数较对照组提高外，各试验组厌氧菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数均能呈显著性提高。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌对降低49 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响断奶仔猪盲肠需氧菌大肠杆菌数和沙门氏菌数，以及提高厌氧菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数的作用效果明显。由本试验结果可知，各试验组的盲肠需氧菌大肠杆菌数和沙门氏菌数均较对照组呈显著9性增加。除除1×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组乳酸杆菌数较对照组提高外，各试验组均能呈显著性提高断奶仔猪结肠厌氧菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数。可见，果寡糖及地衣芽孢杆菌对降低断奶仔猪结肠需氧菌大肠杆菌数和沙门氏菌数，以及提高厌氧菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数具有显著性效果。4.4本章小结果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合添加使用均能显著降低断奶仔猪保育期空肠、回肠和盲肠的pH值，而对结肠pH的降低也有促进效果。其中在空肠和盲肠中0.4%FOS+19×10CFU/kg地衣芽孢杆菌组最佳，而在回肠和结肠中0.4%FOS组效果最佳。果寡糖的添加使用能显著降低断奶仔猪保育期空肠食糜粘度，而益生菌及地衣芽孢杆菌制剂的使用也有促进空肠食糜粘度降低的效果。而地衣芽孢杆菌制剂的使用也能在某程度上降低回肠食糜粘度。果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合添加使用均能显著促进断奶仔猪保育期十二指肠绒毛长度和绒毛宽度的提高，并有效降低隐窝深度，显著提高绒毛长度与隐窝深度比，达到促进十二指肠绒毛生长的效果。果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合添加使用均能极显著促进断奶仔猪保育期空肠绒毛宽度的增加，有提高绒毛长度、绒毛长度与隐窝深度比以及降低隐窝深度的趋势。益生菌的使用显著提高了断奶仔猪保育期空肠绒毛长度。合生元制剂显著促进了断奶仔猪保育期空肠绒毛长度的增加，果寡糖的添加显著提高了断奶仔猪保育期空肠的绒毛宽度。果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合添加使用均有提高绒毛长度与隐窝深度比以及降低隐窝深度的趋势。果寡糖及地衣芽孢杆菌的单独或联合使用均能对断奶仔猪各肠段内容物微生物数量产生显著影响，能有效降低断奶仔猪各肠段中需氧菌大肠杆菌数和沙门氏菌数，且明显提高了断奶仔猪各肠段中厌氧菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数。其中，果寡糖及地衣芽孢杆菌对断奶仔猪大肠内容物微生物的影响要优于小肠，对小肠后段的影响优于前段。而果寡糖与益生菌的联合使用效果稍优于果寡糖和益生菌的单独使用。50 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响第五章结论5.1本试验验研究总体结论（1）果寡糖或地衣芽孢杆菌在饲料中单独或联合使用添加均能有效地降低断奶仔猪保育期的饲料增重比，一定程度上提高改善生长性能，降低发病率和死淘率，提高日增重，但对平均日采食量的影响不大甚至降低。其中0.2%FOS和0.4%FOS的添加量以及0.4%FOS+1×109CFU/kg地衣芽孢杆菌混合添加组饲料增重比显著低于对照组。因此，不同水平的果寡糖以及较高水平的合生元制剂的使用对降低断奶仔猪保育期饲料增重比、提高饲料利用率有显著效果。（2）果寡糖的使用能有效提高断奶仔猪血清中白蛋白含量及白蛋白/球蛋白比值，两者联用能有效提高血清中总蛋白以及显著降低谷草/谷丙比值AST/ALT；果寡糖、地衣芽孢杆菌有促进断奶仔猪保育期免疫器官的生长的趋势，在一定程度上提高免疫器官指数尤其是腹股沟淋巴结指数、脾脏指数和胰脏指数。（3）果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合添加使用均能显著降低断奶仔猪保育期空肠、回肠和盲肠的pH值，其中在空肠和盲肠中0.4%FOS+1×109CFU/kg地衣芽孢杆菌组最效果较好。（4）果寡糖的添加使用能显著降低断奶仔猪保育期空肠食糜粘度，地衣芽孢杆菌制剂的使用也有促进空肠食糜粘度降低的效果。而合生元制剂的使用能在一定程度上降低回肠食糜粘度。（5）果寡糖及地衣芽孢杆菌制剂的单独或联合添加使用均能显著促进断奶仔猪保育期十二指肠绒毛长度和绒毛宽度的提高，并有效降低隐窝深度，显著提高绒毛长度与隐窝深度比，达到促进十二指肠绒毛生长的效果。其中0.4%FOS组促进十二指肠绒毛长度和绒毛宽度效果最佳，而0.4%FOS+1×109CFU/kg地衣芽孢杆菌组降低十二指肠绒毛隐窝深度和提高绒毛长度与隐窝深度比效果最佳。（6）果寡糖及地衣芽孢杆菌的单独或联合使用均能对断奶仔猪各肠段内容物微生物数量产生显著影响，能有效降低断奶仔猪各肠段中需氧有害菌大肠杆菌数和沙门氏菌数，且明显提高了断奶仔猪各肠段中厌氧有益菌乳酸杆菌数和双歧杆菌数。其中，果寡糖及地衣芽孢杆菌对断奶仔猪大肠内容物微生物的影响要优于小肠，对小肠后段的影响优于前段。而果寡糖与益生菌的联合使用效果稍优于果寡糖和益生菌的单独使用。51 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响5.2本试验的创新之处（1）试验研究了FOS、地衣芽孢杆菌不同水平的单独和联合使用在断奶仔猪生产中的作用效果，探讨了两者间的叠加使用效果，给实际生产实践提供了可靠数据依据，具备科学参考价值。（2）试验分析了果寡糖及地衣芽孢杆菌在饲粮中单一使用和联合使用对断奶仔猪生产性能、发病率、死淘率、血液生理生化指标、肠道pH、肠道黏膜结构以及肠道微生物态平衡等方面的影响，初步探讨了其作用原理，具有一定学术研究价值和实践生产应用价值。5.3有待进一步研究解决的问题（1）试验可在分子层面拓宽研究深度，例如使用DGGE变形梯度凝胶电泳、TGGE温度梯度凝胶电泳、16SrRNA细菌序列测序的方法对细菌进行种属鉴定，或实时定量PCR对仔猪肠道菌群进行定性和定量分析，结合细菌培养平板计数，双面论证，以得出更科学准确判断。（2）试验仅对断奶仔猪保育期进行了试验，对其生长期、育肥期可继续加深研究，探讨果寡糖及益生菌添加剂对不同阶段猪的作用效果及机理。（3）试验仅对果寡糖和地衣样芽孢杆菌间的叠加效应进行了探索，效果满意度和稳定性有待提高，对于其他类型的功能性寡糖与不同的益生菌之间有无协同作用，仍有待研究。52 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响参考文献[1]SeemaPatel,ArunGoyal.Functionaloligosaccharides:production,propertiesandapplications[J].WorldJMicrobiolBiotechnol,2011(27):1119–1128.[2]瞿明仁.功能性寡糖及其在动物营养中研究进展[A].见:王康宁主编.动物营养研究进展[C].北京:中国农业科学技术出版社,2008.186-202.[3]SimonO.Micro-organismsasfeedadditives-probiotics[J].AdvancesinPorkProduction,2005,16:161-167.[4]WeijersCAGM,FranssenMCR,VisserGM.Glycosyltransfer-ase-catalyzedsynthesisofbioactiveoligosaccharides.Biotech-nolAdv,2008(26):436–456.[5]杨曙明.寡糖在动物营养研究中的进展[J].动物营养学报,1999,11(1):1～9.[6]来鲁华,杨星婷.寡糖的构象分析[J].生物化学与生物物理进展,1995:22(4).[7]RoberfroidM,SlavinJ.Nondigestibleoligosaccharides[J].CritRevFoodSciNutr,2000(40):461–480.[8]汪建明,赵征,王勇志.低聚糖的分离与鉴定[J].食品研究与开发,2000,06(21):3.[9]姜竹茂.功能性低聚糖的发展及应用[J].食品安全导刊,2010(9):58-60.[10]王雪松,郑芸,方积年.降血糖多糖及寡糖的研究进展[J].药学学报,2004,39(12):1028-1033.[11]瞿明仁,凌宝明,卢德勋,等.灌注果寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响[J].畜牧兽医学,2006,37(8):779~784.[12]明仁,刘兵,张学峰,等.消化道不同部位灌注大豆寡糖对绵羊几个免疫指标影响[J].动物营养学报,2007,19(6):678~683.[13]刘兵,瞿明仁,张学峰,等.瘤胃灌注大豆寡糖(SBOS)对绵羊消化道内营养物质流通与消化的影响[J].畜牧兽医学报,2008.[14]赵晓静,李建国,李秋凤,等.甘露寡糖对犊牛粪便菌群影响的研究[J].中国畜牧,2007,43(5):31-34.[15]米运宏,黄扩宇.低聚果糖的特性及应用[J].广西蔗糖,2007(1):33-36,20.[16]康白.微生态学[M].大连:大连出版社,1988:105-107.[17]江波,王璋.功能性饲料添加剂-低聚果糖[J].粮食与饲料工业,1997(7):27-28.[18]项明洁,刘明,彭奕冰,等.低聚果糖对双歧杆菌增殖效果及肠道菌群的影响[J].检验医学,2005,20(1):49-51.[19]罗予,孟林敏,毛理纳,等.低聚果糖体内外对肠道菌的影响[J].中国微生态学杂志,2003,15(6):321-322.[20]夏中生,许朝芳,潘天彪,等.断奶仔猪饲粮中添加蔗果低聚糖效果试验[J].粮食与饲料工业,1999,(11):40-41.[21]谭聪灵,夏中生,李永民,等.饲粮中添加果寡糖对生长猪的生产性能和免疫机能的影响[J].粮食与饲料工业,2010(4):45-48.[22]林渝宁,冯静,伍淳操,等.低聚果糖对断奶仔猪生长性能及血清生化指标的影响[J].四川农业大学学报,2011,29(1):94-97.[23]Hidaka,H,Eida,T,Takizawa,T.Effectofonintestinalfloraandhumanhealth[J].BifidobacteriaMicroflora,1986,(5):37-50.[24]文虹,邹志恒,等.果寡糖与甘露寡糖替代抗生素对仔猪血液生化指标的影响[J].饲料研究,2004(11):1-3.53 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广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响致谢本试验及论文的完成均在导师夏中生教授的关爱及悉心指导与下完成，衷心感谢夏老师耐心细致的指导。从试验的设计、准备、实施、后期的实验数据分析和论文撰写，夏老师无不给予明确的方向和细致的部署，让我感受到导师的学术科学精神与严谨治学的态度。同时感谢导师对我试验和论文撰写过程中的关心和宽容，让我在温馨舒适的心境和氛围下开展自己的试验。导师夏中生教授知识渊博，思想深邃而敏捷，学术层面广而精深，治学态度科学严谨，这是所有学生能从他身上体会到，也是我们后辈要为之努力的标杆。同时导师爱岗敬业、温和谦逊、为人低调，平易近人，是学术圈和业内泰斗，所有的学生都十分喜欢亲近导师，与其交流。导师的海阔之心与大度之风是我们在为人处世中为之奋斗的目标。短短的几句话道不尽导师三年来的爱护和包容，只能为自己做得不好之处向导师说声道歉。此外，我还要特别感谢王士长教授三年来的关心和指导，在学术学习、试验操作以及生活中王老师同样给予我无微不至的关怀。王老师学识深渊、思想深远，同样是学术圈和业内泰斗，同样和蔼可亲、乐于与学生交流。王老师为人出事的阔达与坦然也是我们不懈为之学习的方向。动物科学技术学院动物营养与饲料科学专业的每一位老师都是我们的良师益友，均需一一答谢。梁明振教授学术渊博、科学严谨注意细节让我们深受体会，课余生活爱好运动与学生关系亲切也让我感受梁老师的随和。李兴芳教授也是在我试验中给予我最大帮助的老师，细致耐心的教导和平时生活中的关爱让我倍受温暖，谢谢您李老师。此外，杨膺白教授、何若刚教授、邹优敬副教授、谭本杰副教授、崔奎青教授、江明生教授和李爱友副教授、等都是指导过我专业课程学习的老师，他们治学科学严谨、学术广博深厚，衷心感谢他们的指导教诲。王晓丽教授、覃小荣老师、黄怡老师、黄艳娜老师和周磊老师等都是我的良师益友，在我的试验前期准备到后期实验都给予莫大的关切和支持，谢谢您们。再者，学院党委曾伟书记、秦建丽副书记、支部书记崔月明老师、研办梁晶晶老师、邓海莹老师和学工组吴老师等都在生活和组织上给予我关心和支持，让我感受到组织的温暖。感谢广西农垦永新畜牧集团金光有限公司的蒋正南总经理、张宁和蓝常力先生；衷心感谢试验养殖实验所在跃进养猪场的所有技术员何煜、覃昱旋、莫炜金、邓桂芳、李荣响60 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响和吕丽珍等，和所有的饲养员，袁凤英、罗红花、马雪琴、班玉莲、黄丽宁、陈仕宁、张慧兰、朱焕满、李言宗等。感谢他们在养殖试验期间对我的实验的全力帮助以及在我生活上的贴心照顾。同时感谢师兄姐的帮助和关心，卢雪芬、张兴、王金伟、曹晓燕、罗丽萍、张家富、朱敏、许静等；感谢同学们的互爱互助，李萍、周祥、宁俊平、姜亚、陈頲、游纯波、贺婷以及生科院的王菲、冯玉亮、张健等；感谢师弟妹的鼎立支持和帮助，韦志艳、万丹、胡海余、蒋芳、唐振华、罗世乾、陈月丽、任凤芸、张胜男、谢植鑫、汪珊如等；尤其感谢好友李俊杰、沈达文、马丽等的鼎立相助和支持。最后就是感谢父母和家人二十几年来一直的支持和无微不至的关爱，有了您们的爱，才能让我安心持续地完成我的试验和论文，衷心地谢谢您们！陈智辉2013年5月26日61 广西大学硕士学位论文果寡糖和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能、血液生理生化指标及肠道菌群的影响攻读学位期间发表论文情况[1]ZhongshengXIA,YaliHUANG,CaixiaZOU,ZhihuiCHEN,XainweiLIANG,ShengjuWEI,XinLIANGandShuluLI.EffectsofsubstitutingBeerLeesandCassavaResiduesrespectivelyforBuffaloDietarySoybeanMealandGrassinessonththRumenFermentationinvitro[C].The10Worldbuffalocongress,The7Asianbuffalocongress,2013,May6-8[2]YaliHUANG,ZhihuiCHEN,ZhongshengXIA,CaixiaZOU,QingFengTANG.EffectsofdietaryFOSonrumenfermentationofbuffalosinvitro[C].InternationalBuffaloNutritionConference,2013,NOV11-15:70-77.[3]陈智辉，李萍，夏中生，陈林，廖玉英，何仁春.共轭亚油酸对靖西大麻鸭生产性能和肉品质的影响[J].中国饲料,2013(15):14-18.[4]陈智辉，夏中生，陈林，廖玉英，何仁春.共轭亚油酸对樱桃谷鸭生产性能和肉品质的影响[J].饲料研究,2013(12)：49-53.[5]陈林，陈智辉，夏中生，廖玉英，何仁春，韦历华.共轭亚油酸对骡鸭生产性能和肌肉品质的影响[J].南方农业学报(已收稿，2014年5月至6月发表)[6]王金伟，姜亚，张兴，黄连莹，陈智辉，夏中生.金酵美对断奶仔猪生长性能的影响及其机理分析[J].广西畜牧兽医,2013,29(2):65-78.62