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时间:2019-03-05
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1、试卷题型:⑴、名词解释:10×4'⑵、简答题:3×10'⑶、综合题:2×15'第一章绪论1、代谢控制发酵:就是利用遗传学的方法或其他生物化学方法,人为地在脱氧核糖核酸(DNA)的分子水平上,改变和控制微生物的代谢,使有用目的产物大量生成、积累的发酵。P22、代谢控制发酵的关键:取决于微生物代谢控制机制是否能够被解除,能否打破微生物正常的代谢调节,人为地控制微生物的代谢。P23、代谢工程的具体思路:P31、改变代谢流:(1)、加速速度限制反应;(2)、改变分支代谢途径的流向;(3)、构建代谢旁路;(4)、改变能量代谢途径。2、扩展代谢途径和构建新的代
2、谢途径:(1)、引入外源基因,延伸代谢途径;(2)、利用新的底物,构建新的生物合成途径。第二章代谢控制发酵的基本思想1、微生物细胞的调节机制:P7-9(1)、通过控制基因的酶生物合成的控制机制:①诱导——促进酶的合成;②阻遏——抑制酶的合成,包括:1)终产物阻遏,2)分解代谢物阻遏。(2)、酶活性的控制机制:①终产物抑制或激活,②通过辅酶水平的活性调节,③酶原的活化,④潜在酶的活化。(3)、通过细胞渗透性的控制:(根据酶在代谢调节中作用不同分类)①调节酶:变构酶、同功酶、多功能酶。②静态酶③潜在酶2、脱敏作用:变构酶经特定处理后,不丧失酶活性而失去
3、对变构效应物的敏感性。注:处理方法:①使变构酶解聚,②基因突变。P153、反馈抑制的调节类型可以分为以下几种:P18-21图略(1)、单功能途径中酶活性的调节类型:①前体激活,②补偿性激活。(2)、多功能途径中酶活性的调节类型:①协作反馈抑制或称多价反馈抑制,②合作反馈抑制,③积累反馈抑制,④顺序反馈抑制,⑤假反馈抑制:指结构类似物的反馈抑制,⑥同功酶4、分解代谢物阻遏:当细胞具有一优先利用的底物(通常是,但并不总是葡萄糖)时,很多其他分解反应途径受到阻遏。P27(注:根据葡萄糖效应理解)5、突破微生物的自我调节控制机制,使代谢产物大量积累的有效措
4、施:P31(1)、应用营养缺陷型菌株。(2)、选育抗反馈调节的突变株。(3)、选育细胞膜通透性突变株:使终产物在细胞内不能大量积累而引起反馈调节。(4)、利用营养缺陷型回复突变株或条件突变株的方法,解除终产物对关键酶的调节。(5)、应用遗传工程技术,创造理想的超微生物(构建目的工程菌株)。(6)、发酵的环境条件的优化。6、营养缺陷型:就是指原菌株由于发生基因突变,致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某些物质的能力,必须在培养中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。P32最典型例子:高丝氨酸营养缺陷型(Hom﹣)或苏氨酸营养缺陷型(Thr
5、﹣)菌株达到赖氨酸的积累。7、渗漏缺陷型:就是指遗传性障碍不完全的缺陷型。(注:这种突变只是其中某一种酶的活性降低,而不是完全丧失。不能合成过量的最终产物,故不会造成反馈抑制而影响中间代谢产物的积累。)P338抗代谢结构类似物突变株:所谓结构类似物抗性菌株,即是那些在含有类似物的环境中,其生长不被抑制的菌株,这种抗性菌株是由于变构酶结构基因或调节基因发生突变的结果,使结构类似物不能与结构发生了变化的阻遏蛋白或变构酶结合,细菌生长不受抑制,但合成终产物被抑制。9营养缺陷型回复突变株:原菌株发生基因突变,致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某
6、些物质的能力,必须在培养中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。10、代谢互锁:从生物合成途径来看,似乎是受一种完全无关的终产物的控制,它是在较高浓度下才发生,而且这种抑制(阻遏)作用是部分性的,不完全的。分支途径上游的某个酶G——H受到另一分支途径的终产物,甚至与本分支途径几乎不相关的代谢中间代谢物的抑制或激活,使酶的活力受到调节。11、优先合成:生物合成有分支途径时,在分支点后,其中一个终产物优先合成底物A经分支合成途径生成两种终产物E和G,由于a酶的活性远远大于b酶的活性,结果优先合成E。E合成达到一定浓度时,就会抑制a酶,使代谢转向合成G
7、。G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。平衡合成:经分支合成途径生成两种终产物EG,E和G取平衡合成。E为优先合成,当E过剩时,E反馈抑制与优先合成途径有关的C到D酶,转而合成G,当G过剩时,可逆转E的反馈抑制,即E的反馈抑制被G所逆转,又转化优先合成E。11、能荷:是细胞内能量状态的一个认为假设参数指细胞内含有的核苷酸中相当于ATP的数量百分比。能荷=[(ATP)+1/2(ADP)]/[(ATP)+(ADP)+(AMP)]12、代谢控制发酵的基本思想:⑴、切断支路代谢:①选育营养缺陷型突变株,②选育渗漏缺陷突变株。⑵、解除菌体自身的反馈调
8、节:①选育抗类似物突变株(代谢拮抗物抗性突变株)——形成途径:1)变构酶结构基因突变,2)调节基因突变。P35②酶活性的利
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