代谢控制发酵复习.doc

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1、试卷题型:⑴、名词解释:10×4'⑵、简答题:3×10'⑶、综合题:2×15'第一章绪论1、代谢控制发酵:就是利用遗传学的方法或其他生物化学方法,人为地在脱氧核糖核酸(DNA)的分子水平上,改变和控制微生物的代谢,使有用目的产物大量生成、积累的发酵。P22、代谢控制发酵的关键:取决于微生物代谢控制机制是否能够被解除,能否打破微生物正常的代谢调节,人为地控制微生物的代谢。P23、代谢工程的具体思路:P31、改变代谢流:(1)、加速速度限制反应;(2)、改变分支代谢途径的流向;(3)、构建代谢旁路;(4)、改变能量代谢途径。2、扩展代谢途径和构建新的代

2、谢途径:(1)、引入外源基因,延伸代谢途径;(2)、利用新的底物,构建新的生物合成途径。第二章代谢控制发酵的基本思想1、微生物细胞的调节机制:P7-9(1)、通过控制基因的酶生物合成的控制机制:①诱导——促进酶的合成;②阻遏——抑制酶的合成,包括:1)终产物阻遏,2)分解代谢物阻遏。(2)、酶活性的控制机制:①终产物抑制或激活,②通过辅酶水平的活性调节,③酶原的活化,④潜在酶的活化。(3)、通过细胞渗透性的控制:(根据酶在代谢调节中作用不同分类)①调节酶:变构酶、同功酶、多功能酶。②静态酶③潜在酶2、脱敏作用:变构酶经特定处理后,不丧失酶活性而失去

3、对变构效应物的敏感性。注:处理方法:①使变构酶解聚,②基因突变。P153、反馈抑制的调节类型可以分为以下几种:P18-21图略(1)、单功能途径中酶活性的调节类型:①前体激活,②补偿性激活。(2)、多功能途径中酶活性的调节类型:①协作反馈抑制或称多价反馈抑制,②合作反馈抑制,③积累反馈抑制,④顺序反馈抑制,⑤假反馈抑制:指结构类似物的反馈抑制,⑥同功酶4、分解代谢物阻遏:当细胞具有一优先利用的底物(通常是,但并不总是葡萄糖)时,很多其他分解反应途径受到阻遏。P27(注:根据葡萄糖效应理解)5、突破微生物的自我调节控制机制,使代谢产物大量积累的有效措

4、施:P31(1)、应用营养缺陷型菌株。(2)、选育抗反馈调节的突变株。(3)、选育细胞膜通透性突变株:使终产物在细胞内不能大量积累而引起反馈调节。(4)、利用营养缺陷型回复突变株或条件突变株的方法,解除终产物对关键酶的调节。(5)、应用遗传工程技术,创造理想的超微生物(构建目的工程菌株)。(6)、发酵的环境条件的优化。6、营养缺陷型:就是指原菌株由于发生基因突变,致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某些物质的能力,必须在培养中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。P32最典型例子:高丝氨酸营养缺陷型(Hom﹣)或苏氨酸营养缺陷型(Thr

5、﹣)菌株达到赖氨酸的积累。7、渗漏缺陷型:就是指遗传性障碍不完全的缺陷型。(注:这种突变只是其中某一种酶的活性降低,而不是完全丧失。不能合成过量的最终产物,故不会造成反馈抑制而影响中间代谢产物的积累。)P338抗代谢结构类似物突变株:所谓结构类似物抗性菌株,即是那些在含有类似物的环境中,其生长不被抑制的菌株,这种抗性菌株是由于变构酶结构基因或调节基因发生突变的结果,使结构类似物不能与结构发生了变化的阻遏蛋白或变构酶结合,细菌生长不受抑制,但合成终产物被抑制。9营养缺陷型回复突变株:原菌株发生基因突变,致使合成途径中某一步骤发生缺陷,从而丧失了合成某

6、些物质的能力,必须在培养中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。10、代谢互锁:从生物合成途径来看,似乎是受一种完全无关的终产物的控制,它是在较高浓度下才发生,而且这种抑制(阻遏)作用是部分性的,不完全的。分支途径上游的某个酶G——H受到另一分支途径的终产物,甚至与本分支途径几乎不相关的代谢中间代谢物的抑制或激活,使酶的活力受到调节。11、优先合成:生物合成有分支途径时,在分支点后,其中一个终产物优先合成底物A经分支合成途径生成两种终产物E和G,由于a酶的活性远远大于b酶的活性,结果优先合成E。E合成达到一定浓度时,就会抑制a酶,使代谢转向合成G

7、。G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。平衡合成:经分支合成途径生成两种终产物EG,E和G取平衡合成。E为优先合成,当E过剩时,E反馈抑制与优先合成途径有关的C到D酶,转而合成G,当G过剩时,可逆转E的反馈抑制,即E的反馈抑制被G所逆转,又转化优先合成E。11、能荷:是细胞内能量状态的一个认为假设参数指细胞内含有的核苷酸中相当于ATP的数量百分比。能荷=[(ATP)+1/2(ADP)]/[(ATP)+(ADP)+(AMP)]12、代谢控制发酵的基本思想:⑴、切断支路代谢:①选育营养缺陷型突变株,②选育渗漏缺陷突变株。⑵、解除菌体自身的反馈调

8、节:①选育抗类似物突变株(代谢拮抗物抗性突变株)——形成途径:1)变构酶结构基因突变,2)调节基因突变。P35②酶活性的利

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