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1、金关片镇痛抗炎作用实验探究【摘要】目的:观察金关片的镇痛抗炎作用。方法:采用大鼠辐射热刺激实验、小鼠热板法实验、小鼠醋酸扭体实验来观察金关片的镇痛作用,采用小鼠毛细血管通透性实验、小鼠白细胞游走实验、角叉菜胶致小鼠足肿胀实验、小鼠棉球肉芽肿实验、大鼠巴豆性气囊肿实验、大鼠胸膜炎实验观察金关片的抗炎作用,采用小鼠肾上腺质量和维生素C含量测定金关片对肾上腺皮脂功能的影响。结果:金关片高、低剂量组均能提高大鼠辐射热刺激痛阈值,提高小鼠热板法痛阈值,抑制醋酸致小鼠扭体反应,抑制小鼠腹腔毛细血管通透性增高,抑制小鼠白细胞游走,减轻角叉菜胶致小鼠足肿胀的程度,抑制小鼠棉球肉芽肿的形成
2、,抑制大鼠巴豆性气囊肿的形成,减少大鼠胸膜腔中白细胞的数量。金关片组大鼠肾上腺内维生素C含量明显低于空白组(P10S表示动物反应过敏或迟钝,舍弃不用。给药后1h测定痛阈值,连测2次。测试中,若照射12.5s仍不甩尾时,立即中断照射,以免局部烫伤,并以12.5s计。2.1.2小鼠热板法实验[2]昆明种小鼠48只,随机分为4组,即模型组、布洛芬组(0.04g•kg-1)和金关片高、低剂量组(1.2g•kg-1、0.6g•kg-1),每组12只。各组动物灌胃0.5mL相应受试药物,模型组给予等容积生理盐水。以小鼠舔后足为疼痛反应指标测定小鼠痛阈值(即小鼠放入热板测痛仪内到出现舔
3、后足反应的时间)。选择痛阈值在5〜13s之内的小鼠。实验前测定各小鼠痛阈值2次(间隔30s),取平均值为其基础痛阈值。给药后1h测定各小鼠的痛阈值,超过60s者以60s计。2.1.3小鼠醋酸扭体实验[3]昆明种小鼠48只,随机分为4组,即模型组、呵噪美辛组(0.01g-kg-1)和金关片高、低剂量组(1.2g•kg-1.0.6g•kg-1),每组12只。各组动物灌胃0.5mL相应受试药物,模型组给予等容积生理盐水,连续灌胃给药5d。于末次给药后30min,每只小鼠腹腔注射质量浓度0.6%的醋酸0.1mL-(10g)-1,记录注射后20min内各鼠出现扭体反应的次数。2.2
4、抗炎作用2.2.1小鼠腹腔毛细血管通透性实验[4]昆明种小鼠48只,随机分为4组,即模型组、强的松组(0.002g•kg-1)和金关片高、低剂量组(1・2g-kg-1.0.6g•kg-1),每组12只。每天各组动物灌胃0.5mL相应受试药物,模型组给予等容积生理盐水,连续灌给药5do末次给药后30min,各小鼠尾静脉注射质量浓度0.5%的伊文思兰溶液0.1mL-(10g)-1,随即腹腔注射质量浓度0.6%的醋酸溶液0.1mL•(10g)-1,20min后脱颈处死,剪开腹部皮肤肌肉,用6mL生理盐水分3次洗涤腹腔,吸管吸出洗涤液,合并后加生理盐水至10mL,置3000r•m
5、in-1离心机内离心15min;取上清液于590nm比色测定0D值。2.2.2小鼠梭甲基纤维素囊中白细胞游出实验[5]昆明种小鼠48只,随机分为4组,即模型组、□引噪美辛组(0.01g-kg-l)和金关片高、低剂量组(1.2g-kg-1.0.6g•kg-1),每组12只。每天各组动物灌胃0.5mL相应受试药物,模型组给予等容积生理盐水。各组给药3d后在无菌操作下向小鼠背部皮下注入空气ImL,形成一个近圆形气囊,次日向囊内注入质量浓度1.5%的梭甲基纤维素钠溶液1mL致炎。于致炎后8h从囊内吸取液体20uL,加入到生理盐水0.4mL中,混匀,用微量移液器取10UL作白细胞计
6、数,以104•mL-1表示。2.2.3角叉菜胶致小鼠足肿胀实验[6]昆明种小鼠48只,随机分为4组,即模型组、11引噪美辛组(0.01g-kg-l)和金关片高、低剂量组(1.2g-kg-1.0.6g•kg-1),每组12只。每天各组动物灌胃0.5mL相应受试药物,模型组给予等容积生理盐水,连续灌胃给药5do各组末次给药1h后于小鼠右侧足掌心皮下注射质量浓度1%角叉菜胶每只30uL,4h后沿踝关节剪下左右两侧后足,精密称质量(mg),以两侧足质量差为肿胀度。2.2.4小鼠棉球肉芽肿实验[7]昆明种小鼠48只,随机分为4组,即模型组、口引噪美辛组(0.01g-kg-1)和金关
7、片高、低剂量组(1.2g•kg-10.6g•kg-1),每组12只。每天各组动物灌胃0.5mL的相应受试药物,模型组给予等容积生理盐水,连续灌胃给药5do乙瞇麻醉,在各鼠的背部正中央去毛并用质量浓度75%的乙醇消毒,然后用手术剪刀开0.5cm长的小口,用眼科镶子将已精密称质量为10mg的灭菌棉球(称质量后在质量浓度75%的乙醇中浸泡消毒并干燥)从小切口植入皮下,并在切口上撒适量的青霉素以防止伤口感染,之后用手术针缝合小鼠皮肤。然后随机分成4组,给药同上述实验,从手术当天开始,灌胃给药每日1次,连续5do末次给药后5h脱颈处死小