小菜蛾肠道共生菌金态性及与bt协同作用研究

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1、分类号：华中农业大学硕士学位论文密级：小菜蛾肠道共生菌多态性及与Bt协同作用研究DIVERSITYANDSYNERGISTICEFFECTWITHBTOFTHEINTESTINEBACTERIAI。CoMMUNITYoFPLUTELLAXYLosTELLALA剁茂E研究生：戴楠晶学号：2011301110240指导教师：李建洪教授游红副教授专业：农药学研究方向：昆虫微生物与分子生态学获得学位名称：农学硕士获得学位时间：2014年6月华中农业大学植物科学技术学院二。一四年六月华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文是否保密否如需保密，解密时间年月日蛳㈣I燃6Illll3Ill111l

2、lHo本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农韭大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定．与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。研究生签名：书婚池时间：b一中年6月争日僦黼撕神沁铷叛毒踯注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间小菜蛾肠道内生苗多态性及与Bt协同作用研究目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．iAbstract⋯．⋯．⋯⋯．．⋯

3、⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯．⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯．⋯．⋯．⋯．．⋯⋯⋯⋯．．⋯．⋯iii第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11苏云金芽胞杆菌概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1苏云金芽胞杆菌简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ll-2苏云金芽胞杆菌杀虫机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21．3苏云金芽胞杆菌的增效途径⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31．3．1苏云金芽胞杆菌产生的活性物质间的增效作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．3．2苏云金芽胞杆菌与其他杀虫剂的混配增效⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41

4、．3．3化学物质对苏云金芽胞杆菌的增效作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．3．4植物代谢产物对苏云金芽胞杆菌的增效作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52昆虫与肠道微生物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一52．1昆虫肠道微生物种类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52．2肠道微生物对宿主的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．72，2．1为宿主提供营养物质⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．。72．2．2参与宿主的C、N代谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．2_3增强宿主的免疫机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一83昆虫肠道微生物对苏云金芽

5、胞杆菌致病性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯84研究目的意义及创新点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．104．1研究目的与意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。．104．2本研究创新点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．105技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第二章小菜蛾幼虫肠道细菌分子多态性研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12l，1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．121．1．1供试昆虫⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12华中农业大学2014届硕士研究生学位(毕业)论文1．1．2供试毒蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1．3培养基及常用试剂的配置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1．4常用仪器和设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．1．5引物序列⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．2，1小菜蛾幼虫的解剖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．2．2小菜蛾幼虫肠道共生菌总DNA提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．161．2．3肠道共生

7、菌16SrDNA基因片段的扩增⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一171．2．4PCR产物的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯181．2．5肠道共生菌总DNA的变性梯度凝胶电泳⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．181．2．6肠道共生菌16SrDNA片段的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．191．2．7数据统计分析与系统发育树的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯