高效溶磷菌的筛选、溶磷特性及菌群协同作用的研究

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1、万方数据高效溶磷菌的筛选、溶磷特性及菌群协同作用的研究Researchonscreening，characterizationofhighefficientphosphorusdissolvingbacteriaandtheirsynergisticeffect姓2015年6月万方数据独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的

2、材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：煮绣加巧年6月7日万方数据学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子

3、杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论文的公布(包括刊登)授权江苏人学研究生院办理。本学位论文属于不保密回。学位论文作者签名：鹰倩沙ff年6月7日指导教师签名：∥‘f年．、＼帕r爱“万方数据江苏大学硕士学位论文摘要近几年来，随着生态环境的恶劣发展，复合微生物肥料已成为改善土壤改善农作物质量的发展方向。微生物肥料可以通过微生物自身的生命活动分泌活性物质促进植物生长发育；通过微生物的作用提高土壤氮磷钾肥的利用率；通过使用微生物肥料进一步减少农药和化学肥料的使用，从而改善土壤环境种植绿色食

4、品；对农作物产生防病致害作用，间接促进作物发育。活动的微生物是微生物肥料的关键，且其广泛分布于土壤中，品种和功效繁杂，有望研发成多功效的复合微牛物肥料。许多科学家已经对微生物肥料的各方面进行了探索研究，例如筛选分离出高效溶磷、解钾和固氮菌株，将不同菌属的微生物混合培养并通过菌株间相互关系研究其组合效应等，所以选育培养具有高效并具有特定功能的菌株是极其关键的。本文从土壤中筛选出一株溶磷细菌，并对其机理进行分析；将其与固氮、解钾菌混合培养，对其组合培养的溶磷和解钾作用进行了初步研究，主要结果如下：首先，本课题利用蒙金娜无机

5、溶磷培养基从桂花树根际粘附土壤中分离筛选出一株高效溶磷菌株P0417，并测得其溶磷量为503．53lag／mL。结合生理生化试验，并经基冈水平序列分析后，初步鉴定该菌属于伯克霍尔德氏菌(Bur砌olderia)类，为洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderiacepacia)。研究了该菌溶磷量和pH值随发酵过程的变化曲线，表明其溶磷能力与培养液pH呈显著相关性。以洋葱伯克霍尔德氏菌P0417为出发菌株，溶磷量为指标，利用单因素和正交对其培养基进行优化。结果表明：菌株P0417在培养基条件为葡萄糖10∥L、草酸铵O．5g

6、／L、NaCI1．0g／L时，具有较好的溶磷能力，测得其溶磷能力为791．84I．tg／mL，可为土壤中磷肥的高效利用提供理论依据。其次，探讨了洋葱伯克霍尔德氏菌P0417的溶磷机制，试验表明该菌在发酵过程中分泌了多种有机酸，并验证了发酵液pH与该菌的溶磷能力呈显著相关性。经高效液相分析表明：发酵过程中P0417的主要代谢产物为草酸、酒石酸、苹果酸、丙酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸，浓度总量达420．59mg／L，并人J：模拟P0417菌株产生的有机酸对Ca3(P04)2溶解情况的试验表明，有机酸的溶磷量达493．89gg／

7、mL。而发酵过程中也产生了磷酸酶，其活性可达2571umol／L·h，通过盐析超滤得出粗酶液，加入Ca3(P04)2测定其溶解度为18．37“g／mL，说明发酵液中产生的多种有机酸是溶磷细菌P0417菌株溶磷的主要机制，磷酸酶对溶解Ca3(P04)2起到辅助作用。最后，研究了溶磷菌P0417与实验室购买的两株溶磷菌、两株固氮菌和一株解钾菌混万方数据高效溶磷菌的筛选、溶磷特性及菌群协IJ作用的研究合培养情况。通过菌株之问的共同培养，发现一组菌株混合培养存在拮抗性，得到5组互不拮抗的包含3种彳i同功能菌的组合，分别测试其单

8、独培养和组合培养的溶磷、解钾能力。结果表明：溶磷能力：组合l、2和5复合培养具有1+1+1>3的溶磷效果，其中组合2和组合5的溶磷效果最佳。解钾能力：5组组合复合培养均具有1+1+1>3的解钾效果，其中组合3和组合5的解钾效果最佳。综合溶磷、解钾作用，得出组合5为最佳组合。以组合5为出发组合菌株，生长量为指标，对其培养条件进行单因