骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究

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1、第二军医大学硕士学位论文骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究姓名：李霆申请学位级别：硕士专业：生物物理学指导教师：江键;杨勇骥20040501硕士论文：矿骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究》缩略词表Abandbasementmembranecalciuminducedcalciumreleasedihydropyridinereceptorexcitation—contractioncouplingfreezesubstitutionH．bandI-bandkilodaltonlongitudinaltub

2、uleM．1ineMitochondrionmyofibrilphosphatebufferphosphatebuffersalineryanodinereceptorsarcomeresarcolemmasarcoplasmicreticulumterminalcisternatriaduansversetubuleZ．1ineA带基膜钙诱导的钙释放二氢吡啶受体兴奋收缩偶联冷冻置换H带明带千道尔顿纵小管M线线粒体肌原纤维磷酸缓冲液磷酸盐缓冲液雷尼丁受体肌节肌膜肌浆网终池三联体横小管Z线A肼吣哪嗽f2H。胁"MMⅢ盼l耋蓦I&吼跟Kn订

3、z硕士论文：扩骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究》CCcorecylindersCasparks环状体钙火花硕士论文：【f；骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究》骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究中文摘要骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中的实时超微结构形态变化以及肌浆网内Ca2+如何释放的问题是生物物理学及细胞生物学最感兴趣的研究课题之一。由于常规研究方法不能在毫秒级水平获得骨骼肌兴奋收缩偶联过程中的超微结构形态变化以及Caa+变化的相关信息，因此该课题也是目前国内外研究的难点课题之一。本课题以探索

4、解决上述难题为研究目标，采用计算机实时控制的电刺激(时间分辨率为lOus)一超低温快速冷冻实时固定技术，结合冷冻置换技术和透射电子显微镜对骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中各时间点的超微结构形态进行了实时分析研究，并对骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中的超微结构形态的时相变化以及钙离子释放的可能机制进行了分析讨论。结果发现：一、采用快速冷冻实时固定技术固定的骨骼肌内各种超微结构保存完好，清晰可见。二、骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中三联体的超微结构形态发生实时变化三、骨骼肌兴奋收缩偶联时，细胞膜上及细胞内发现大量小泡1．施加电刺激4．6ms后，细胞膜下出现大

5、量小泡，小泡间趋向融合，形成3．8个小泡组成的多聚体．2．电刺激24ms后小泡消失，仅残余少量有被小泡紧靠细胞膜下结果提示细胞内钙离子浓度升高有可能通过小泡转运方式将细胞外钙离子转入细胞内实现，激光共聚焦显微镜下观察到的Caz*：sparks现象也可能通过多个小泡聚合引起局部钙离子浓度升高。超低温快速冷冻实时固定技术及电镜技术是研究毫秒级生理活动的极为有效的手段，为今后研究生理活动的瞬时功能形态变化奠定了基础。硕士论文：形骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究》关键词实时处理超微结构骨骼肌冷冻固定冷冻置换6硕士论文：妒骨骼肌

6、在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究》Realtimeresearchesonmorphologicalchangesinskeletalmuscleduringexcitation-contractioncouplingAbstractTherealtimemorphologicalchangesandreleaseofcalciumionsfromsarcoplasmicreticuluminskeletalmuscleduringexcitation—contractioncouplingarethemostattract

7、iveresearchfieldandalsothemostdifficultyoue。Inthispaper，theultrastructuralchangesinskeletalmuscleatsomedefinedtimepointsduringexcitation—contractioncouplingwerestudiedbycomputercontrolledelectricalstimulation-realtimecryofixationfreezesubstitutionandelectronmicroscope．Be

8、sides，theultrastructuralchangesofskeletalmuscleandthepossiblemechanismofcalciumreleaseduringexcitation-