胶原蛋白抗氧化与延缓皮肤衰老作用研究

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1、胶原蛋白抗氧化与延缓皮肤衰老作用研究(AntioxidantActivityandDelayingSkinAgingEffectofCollagen)2014年6月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的P,j容以外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：

2、霁砂磐≯口1厶年口蜩lf日学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生处办理。本学位论文属于不保密“

3、学位论文作者签名：淳砂髟弘冲年‘』c，月lJ日指导教师虢纱易0≯协年06月7J日江苏大学硕七学位论文摘要胶原蛋白是一类结构独特的蛋白质，在延缓皮肤衰老中的应用广泛，历史悠久，形式多样。但目前，人们对其研究仍主要集中在分离提取以及理化特性方面，而关于其抗氧化活性、延缓皮肤功效的的报道十分有限，结论有所差异。本文以尼罗罗非鱼胶原蛋白为原料，研究了胶原蛋白的抗氧化活性、延缓皮肤衰老功效及其生物利用率和利用形式，为胶原蛋白在延缓皮肤衰老中的应用提供一定的实验证据和理论依据。主要研究内容及结果如下：(1)利用体外模拟胃肠道消化模型，研究了胶

4、原蛋白的消化动态和抗氧化活性。胶原蛋白从胃进入小肠后，其水解度从1．15％增加到了16．74％；疏水性却从21．46％降低到了2．06％；DPPH自由基的清除率从18．22％增加到了31．79％；亚油酸自氧化抑制率在40min时达到了34．63％，而后趋于稳定。然后利用超滤技术，将胶原蛋白的消化产物分离得到了三个组分，其中平均分子量最小(436．80Da)的组分得率(86．70％)和抗氧化活性最高。该组分依次经过ToyopearlSP一650M、SephadexG10、EclipseXDBC18柱纯化得到了一种高抗氧化活性肽，经U

5、PLC-ESI-MS鉴定为Gly-Pro-Met(303．38Da)，其ICso值为25．64lag／mL。(2)利用D．半乳糖致亚急性衰老小鼠模型，研究了胶原蛋白灌胃延缓皮肤衰老的功效。胶原蛋白(2000mg／kg．d)灌胃8周后，小鼠(胸腺、脾脏、肝脏)脏器指数，皮肤和血清抗氧化酶(SOD、GSH．Px)活性均显著增加(p<0．05)；皮肤胶原蛋白含量显著提高，MDA含量显著降低(p

6、和利用形式。胶原蛋白(4000mg／kg)灌胃后，血浆中Hyp含量快速增加，在2．33h才达到峰值(59．47Ixg／mL)，在24h的保留量为14．65％，相对和绝对生物利用率分别为48．58％、65．57％；血浆中所有游离和结合氨基酸均明显增加，且血浆中各种氨基酸的增加量与胶原蛋白中的含量呈正比；最后利用UPLC-ESI．MS技术，从血浆中鉴定出了16种主要的胶原多肽，分别是：Glu．Asp、Glu—Met、Glu-Asn、Tyr-Met，Asp—Glu、Gly·Ser—Pro、Pro—Gly—Hyp、Ser-Ser、Ala-

7、Ala-His、Pro—Hyp、Ala-Asn、Ser—Gly—Met，Glu—Trp—Leu、Phe—Gly—AsnlLeu—Pro、胶原蛋白抗氧化与延缓皮肤衰老作用研究Hyp—Met。关键词：胶原蛋白，模拟消化，抗氧化，皮肤，延缓衰老，生物利用率，生物利用形式II江苏大学硕士学位论文ABSTRACTCollagenisaclassofproteinwithuniques虹ucnlre．widelyusedindelayingskinaging．Currently，muchattentionhasbeenfocusedonthe

8、researchofphy’sicochemicalcharacteristicsofcollagen，separationandextractionofcollagen．Fewstudiesontheantioxidantactivityandd