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1、云南省不同地区滇重楼皂昔含量对比和影响因子研究［摘要］用HPLC对采自云南省不同地区的22份滇重楼样品进行6种皂昔I,II,VI,VH,PA,H含量测定，用SPSS17.0进行数据分析不同产区对皂昔含量的影响；结果表明滇重楼生长的海拔对皂昔含量的影响并不显著，而生长地区对皂昔含量影响较为显著，滇西的滇重楼明显高于其他各产区，具有明显的地区依赖性。［关键词］滇重楼；皂昔；含量；地理位置；海拔［收稿日期］2013-07-18［基金项目］中央公益性科研院所基本科研业务专项(YN-0902)［通信作者］*高微微，研究员，博士生导师，E-in
2、a订：wgao41l@sina・com［作者简介］李海涛，助理研究员，主要从事药用植物资源生态学研究，Tel:13988100862,E-mail:lhtxyl@126.com滇重楼Parispolyphyllavar.yunnanensis为延龄草科Trilliaceae重楼属Paris多年生草本植物，主要分布于我国云南、四川和贵州一带，常生长在海拔1400〜3100m的常绿阔叶林、云南松林、竹林、灌丛或草坡中，是我国西南地区的重要药材[1],具有极大的开发前景。滇重楼是《中国药典》(2010年版)重楼药材的主要的来源植物，具有抗
3、癌、清热解毒、消肿止痛和止血等作用，治疗跌打损伤有独特疗效，是“云南白药”、“季胜德蛇药片”、"热毒清”和“宫血宁”等多种中成药的主要原料之一[2]。重楼中的脩体皂昔是其主要的活性成分，现代药理学研究证明其具有良好的抗肿瘤活性[3-5]o近年来市场对滇重楼的需求量急剧上升，由于长期过度采挖，野生资源锐减，滇重楼的人工栽培技术研究逐渐展开，规模化种植成为制药企业的发展趋势。滇重楼的药用成分一一总皂昔含量受地理环境、土壤和气候的影响而存在差异，加之滇重楼生长缓慢,种子萌发到收获利用要10多年时间，从而导致重楼质量的不稳定。本研究通过对云
4、南省滇重楼主要分布区的样品中偏诺类皂昔(VI,vn,PA,H)和薯裁皂昔类皂昔(I,II)共6种皂昔的含量进行分析，以确定不同地区滇重楼的品质差异，并分析影响皂昔含量的主要地理因子，旨在为选育优良品种和选择合适人工种植地提理论供依据，以提高滇重楼的药材的产量和质量。1材料试验材料主要来自云南省滇重楼的主要产区，即以玉溪地区为代表的滇中高原区，大理、丽江、香格里拉及高黎贡山一线的滇西地区，普洱以南的滇南地区，靠近广西和越南的红河文山一带的滇东南地区。采集时间为滇重楼的花期，以准确鉴定物种，共采集到滇重楼样本25份，记录植株当地的地理、
5、土壤和气候特征的相关数据，采集地信息见表1。标本经中国科学院昆明植物研究所纪运恒副研究员和云南白药集团赵廷周工程师鉴定。高效液相色谱仪(Agilent1100),自动进样器，DAD检测器。乙睛为色谱纯，水为三蒸水。重楼皂昔I,II,VI,VII对照品购自中国食品药品检定研究院(批号111590-200402,111591-200402,111592-200402,111593-200402)；重楼皂昔PA,H(纯度99%)对照品购于中国科学院昆明植物研究所。2方法与结果2.1样品处理新鲜植株采集后除去泥沙，40C烘干,粉碎，备用。2
6、.2色谱条件AgilentSB-C18(4.6mmX250mm,5um)；流动相为乙月青(A)-水(B),梯度洗脱，0〜10min,5%〜20%A,10〜50min,20%〜42%A,50〜90min,42%〜80%A,90〜100min,80%〜95%A,洗脱时间为100min；检测波长203nm；体积流量1.0mL•min-1；柱温30°C,进样量10uLo2.3线性关系分别取在40°C下干燥的重楼皂昔1,11,VI,vn,PA,H对照品适量，精密称定，用甲醇制成0.4g-L-1的对照品溶液，分别进样4,12,14,16,20u
7、L,得到回归方程为：AI=561.18CI+16.2,r=0.9998；AII=39.73CII+14.4,r=0.9994；AVI=645.07CVI+13.2,r二0.9992；AVD二462.4,CVn+19.8,r二0.9995；APA=603.16CPA+20.1,r=0.9997；AH=617.69CH+14.6,r=0.9993O2.4精密度，稳定性，重复性，回收率试验重楼皂昔的精密度，稳定性，重复性的RSD范围分别为0.97%〜1.3%,1.3%〜1.7%,1.2%〜1.5%,表明精密度，稳定性，重复性良好；重楼皂昔
8、I,II,VI,Vn,PA,H加样回收率分别为98.73%,98.17%,9&86%,98.01%,9&92%,98.33%,加样回收率的RSD范围分别为1.0%〜1.4%,0.74%-1.2%,1.1%〜1.4%,1.2%〜1.7%
