棕色脂肪源性干细胞向起搏样细胞的分化及其机制研究

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1、第二军医大学硕士学位论文棕色脂肪源性干细胞向起搏样细胞的分化及其机制研究AStudyfortheDifferentiationofBrownAdipose-·derivedStemCells(BASCs)intoPacemaker-likeCells硕士研究生：陈磊硕士生导师：杨向群教授李玉泉副教授张传森教授导师组：许家军张喜张炎刘芳张志英吴爱群专业名称：人体解剖与组织胚胎学培养单位：第二军医大学基础部本课题受国家自然科学基金(31170934，31271050，81271717)资助二。一四年五月独创性声明

2、本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名：慷磊签字日期：如J铲年r月如日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行

3、检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：健磊签字日期：2口件年9月九日导师签名：物签字日期：锄11年目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。-1-第一部分棕色脂肪源性千细胞的生物学特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一1-第二部分棕色脂肪源性干细胞向起搏样细胞的分化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一2-第三部分TBXl8在BASCs向起搏样细胞分化中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一3-ABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一4一PART1．THEBIOLOGICALPROPERTIESOFBASCs⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。-5-PART2．DIFFERENTIATIONOFBASCsINTOPACEMAKER-LIKECELLS⋯⋯⋯⋯⋯⋯-6-PART3．ROLEOFTBxl8INDIFFERENTIATIONOFBASCSINTOPACEMAKER-LIKECELLS⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．·7-缩

5、略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一8-前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一9一第一部分棕色脂肪源性干细胞的生物学特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．一、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．-11．二、材料和设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．一ll-(一)实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-11-(--)主要实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-11一(三)主要实

6、验设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-13-三、方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．一14一(一)BASCs的分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-14．(二)新鲜分离BASCs表面标志的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．14．(三)BASCs三向分化能力的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．14．(四)BASCs培养早期的细胞成分鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．15．(五)数据统计和分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16．四、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．16．(一)新鲜分离的BASCs的表面标志⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．16．(二)BASCs三向分化的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．J7．(三)培养早期BASCs的细胞组成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯．19．五、讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．20．第二部分棕色麝肪源性干细胞向起譬样细胞的分化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21．一、前

8、言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21．二、材料和设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21．(一)实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2l-(二)主要实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．22．(三)qPCR引物和蛋白电泳主要溶液的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．23．(四)主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯