信阳南湾水库翘嘴红鲌和青梢红鲌遗传多样性研究

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1、THESTUDYOFGENETICDIVERSITYOFERYTHROCULTERILISHAEFORMISANDERYTHROCUl月ERDABRYIFROMNANWANRESERVoIRREVEALEDINXINYANGADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByMaYunxiaSupervis

2、or：Prof．YangTaiyouMay，2013摘要翘嘴红鱼自(Erythroculterilishaeformis)和青梢红鲐(Erythroculterdabryi)均属鲐亚科红鲐属鱼类，在我国广泛分布。因其肉质鲜美、营养丰富，被视为我国上等经济鱼类。充分认识翘嘴红鲐、青梢红鲐的遗传多样性水平，对其种质资源的评价、保护与持续利用具有重要意义。本实验采用ISSR分子标记技术对信阳南湾水库翘嘴红鲐、青梢红鲐两群体的遗传多样性进行研究，结果如下：(1)利用正交试验设计方法，对翘嘴红鲐、青梢红鲔的ISSR．PCR反

3、应体系中的DNA模板、M孑+、引物、dNTPs及TaqDNA聚合酶浓度进行正交优化。建立的25ul最优反应体系为：DNA量90ng、M92+1．60mmol／L、引物0．51amol／L、dNTPs0．4mmol／L、TaqDNA聚合酶1．25U。利用此体系，对反应中的循环次数和退火温度分别进行优化试验，确定反应程序为：94。C预变性5rain；94。C变性40S，47～58℃复性40S，72。C延伸1．5rain，循环次数38；72℃延伸10min。(2)从77个ISSR引物中筛选出15个，对南湾水库翘嘴红鱼自、

4、青梢红鱼自两群体(共60尾)的基因组DNA进行PCR扩增，其中对翘嘴红鲐共检测出108个位点，多态位点45个，对青梢红鲐共检测出112个位点，多态位点44个。利用POPGENE软件分析翘嘴红鲴、青梢红鲐2个群体的多态位点比例(PPB)分别为41．67％和39．29％，观测等位基因数(№)分别为1．4167和1．3929，有效等位基因数(肫)分别为1．2846和1．2716，Nei’S基因多样度(五)分别为0．1641和O．1545，Shannon’S信息指数(』)分别为0．2414和0．2263，遗传相似度(S)为

5、分别0．8302和O．8401，遗传距离(D)分别为0．1872和0．1762。各项指标综合显示，南湾水库翘嘴红鲴、青梢红鲐群体的遗传多样性处于中等水平，翘嘴红鲔遗传多样性略高于青梢红鲔。关键词：南湾水库，翘嘴红鲐，青梢红鲐，ISSR，遗传多样性IIABSTRACTErythroculterilishaeformisandErythroculterdabryi，belongedtoCultrinaeE珂throculter，WidelydistributedinChina．Theyareconsideredsupe

6、rioreconomiicspeciesfishbecauseoftheirsweet—meatedandnutritious．Understandingthelevelsofgeneticdiversityhasimportantmeaningfortheevaluation，protectionandsustainableutilizationofitsresources．Inthisstudy,theISSR(theSimpleSequenceRepeat)molecularmarkerwasappliedt

7、oinvestigatethegeneticdiversityofErythroculterilishaeformisandErythroculterdabryifromNanwanReservoir．Theresultsareasfollows：(1)ThoughtheorthogonalexperimentaldesignwasusedtooptimizeISSR-PCRsystemofErythroculterilishaeformisandErythroculterdabryiinfivefactors(M

8、92+，primer,dNTPs，DNAtemplateandTaqDNApolymerase)respectively．Theresultsindicatedthat90ngDNAtemplate、M92+1．60mmol／L、0．51xmol／Lprimer、dNTPs0．4mmol／L、1．25UTaqpolymerasewereasthebestIS