pmsg的纯化及其对幼鼠和幼蓝狐卵巢和子宫的影响

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1、万方数据UniversityCode：10225RegisterCode：080064DissertationfortheDegreeofMasterPURIFI(—蜩：1IONOFPMSGANDITSEFFECTONOVARYANDUTERUSOFIMM讼LTUREMICEANDPRE．PUBERALBLUEFOⅫSCandidate：Supervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：DateofOralExamination：University：WangB

2、oProf．AnTie．zhuMasterDevelopmentalBiologyJune，2008NortheastForestry万方数据摘要孕马血清促性腺激素(pregnantmareserumgonadotropin，PMSG)是由马属动物胎盘的尿囊绒毛膜细胞分泌的，具有促进卵泡发育、排卵和黄体形成功能的一种糖蛋白激素。本研究采用偏磷酸一乙醇逐级沉淀法，从孕马血清中提取PMSG粗蛋白。并利用小鼠检测粗提蛋白的生物活性及其对雌性生殖器官发育的影响；与此同时，利用粗提的PMSG结合E2、PGF2a和h

3、CG，处理6～7月龄的雌性蓝狐，探讨不同激素组合处理对雌性蓝狐诱发发情、卵巢发育和卵泡发育的影响。其结果与结论如下：(1)从来自不同孕马的血清(9000m1)中提取116．159(湿重)有活性的PMSG粗提蛋白，其比活在104．57"-'222．04IU／mg之间，平均为153IU／mg。结果表明偏磷酸．乙醇逐级沉淀法适用于从孕马血清中提取PMSG；(2)利用DEAE．SephadexA50批量层析和SP．SepharoseHP柱层析的方法纯化粗提蛋白，经1步和2步纯化分别获得比活为173．08IU／mg

4、和926．41IU／mg的PMSG精制蛋白，最终比活提高倍数为8．64倍。表明离子交换层析是有效精制纯化PMSG的方法；(3)用21U、4IU、8IU三种不同浓度的PMSG处理出生21d雌性小鼠，发现4IU即可有效促进卵巢正常发育。表明，PMSG对卵巢的正常发育存在有最适阈值浓度；(4)用PMSG处理不同日龄小鼠(5d、lOd、15d和21d)后，PMSG不仅促进15d和21d小鼠有腔卵泡的发育，而且对出生21d的小鼠卵巢中次级卵泡阶段的卵泡发育同样具有促进作用。同时PMSG对出生后15—21d小鼠子宫不

5、同结构的发育也具有明显的促进作用，但并不能影响出生不足10d的小鼠子宫的发育。(5)采用EPP和EPPh处理6～7月龄雌性蓝狐，其结果(20％和30％出现发情症状)表明蓝狐进入初情期存在个体间的差异，而且，EPP和EPPh处理法可能具有诱发雌性蓝狐发情的功效；(6)用EPP和EPPh法处理非发情季节雌性蓝狐(6。7月龄)，不仅能够提高蓝狐卵巢重量和增加有腔卵泡数量，而且能够促进其子宫不同结构的显著发育。但是激素处理后会引起卵巢内异常卵泡数目的增加。表明此方法可以显著促进未进入初情期蓝狐生殖器官的发育本研究

6、结果为进一步开展PMSG对毛皮动物发情或非发情时期生殖器官的作用机制、建立PMSG应用程序、开发PMSG精品及其PMSG抗血清制品等奠定基础。关键词PMSG；纯化；蓝狐；卵泡；子宫万方数据AbstractPregnantmareserumgonadotropin(PMSG)isaglycoproteinhormone，whichisproducedbytrophoblastcellsofendometrialcupsinpregnantmaresandplaysanimportantroleinfolli

7、cledevelopment，ovulationandcorpusluteumformation．Usingthemethodsofprecipitationwithmetaphosphoricacid(HP03)andfractionatedprecipitationwithalcohol，thecrudePMSGwasextractedfromthepregnantmareserum．Itsbioactivitywastestedthroughexaminingeffectoftheextracted

8、PMSGonfemalereproductiveorgandevelopmentofmiceandrats．Besidethat，theeffectofPMSGcombinedwithE2，PGF2aandhCGoninductionofestrus，ovarianandfolliculardevelopmentofthemonth6to7femalebluefoxwasalsotested．Mainresultsandcon