糖尿病大鼠视网膜中sdf-1和vegf分子生物学表达及amd3100对其干预

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1、目录缩写词⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前雪⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7刖吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7实验研究第一部分糖尿病大鼠动物模型的建立材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．：⋯⋯⋯．9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12第二部分RT．PCR、WB法检测视网膜SDF．1和VEGF舍量HE染色观察视网膜形态学改变材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯13结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34附录⋯⋯⋯⋯⋯．．．．．QeImllo⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．36致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46温州医学院硕上学位论文英文缩略词表英文缩写AGNCONCXCR4DMDREPCHS

3、CPBSRT—PCRSDF-lSDS-PAGESPFSTZVEGFWB英文全称AntagonistsgroupcontrolgroupCXCchemokinereceptor4diabetetsmellitus(group)diabeticretinopathyendothelialprogenitorceilhematopoieticstemcellphosphatebufferedsaline中文全称拮抗剂(组)对照(组)趋化因子受体CXcR4糖尿病(组)糖尿病视网膜病变内皮祖细胞造血干细胞磷酸盐缓冲液reVersetranseripti。nP。1ymeraSe逆转录聚

4、合酶链式反应ChainReactionstromalcellderivodfactor-1基质细胞衍生因子一1sodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠聚丙烯酰polyacrylamidegelelectropheresis胺凝胶电泳Specificpathogenfree无特定病原体streDtozotocin链脲佐菌素vascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子westernblot蛋白免疫印迹温州医学院硕士学位论文糖尿病大鼠视网膜中8DF-1和VEGF的分子生物学表达及AMD3100对其的干预中文摘要目的：本实验通过建立糖

5、尿病大鼠模型，测定不同时期视网膜中基质细胞衍生因子一1(SDF一1)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量，研究它们二者与糖尿病视网膜病变的相关性。并应用SDF-1拮抗剂AMD3100，探索AMD3100对该模型大鼠视网膜新生血管的抑制作用，以及抑制效果和AIdD3100剂量的关系，为探讨糖尿病视网膜病变的发病机理和治疗提供新的思路。方法：1．50只健康雄性成年SD大鼠随机分为正常组、糖尿病组、拮抗剂组。糖尿病组和拮抗剂组于禁食12／J、时后一次性腹腔注射链脲佐菌素65mg／kg。拮抗剂处理组为糖尿病建模成功后2周玻璃体及球后注射注射SDF一1拮抗剂AMD3100。成模后1月

6、、3月、5月分别提取各组视网膜总RNA，RT—PCR法检测SDF一1和VEGFmRNA的表达量变化，所得数据用SPSSl7．0软件进行分析。并对SDF一1和VEGF的mRNA水平进行双变量相关分析，HE染色观察各组视网膜形态学改变。2．18只SD大鼠随机分为正常对照组，糖尿病对照组，及4组不同剂量的拮抗剂组，成模后继续饲养3月。拮抗剂组在糖尿病建模成功后2周玻璃体腔及球后注射不同浓度的AMD3100(浓度分别为2．5ug／ul，5．g／ul，lOug／ul，15ug／u1)，到期后蛋白免疫印迹(westernblot)法检测各组大鼠视网膜SDF—l、VEGF蛋白的表达量变化

7、，测定其光密度值，所得数据用SPSSl7．0软件进行分析。结果：1．PeR1．1各组SDF-1mRNA含量的比较：正常组、拮抗剂组和糖尿病组视网膜上均有SDF-1mRNA的表达，且同龄组中糖尿病组的表达显著性增高，差异有统计学意义(P