水稻oslztf基因的克隆与功能分析

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1、万方数据Clon"ganda15"ofgene0SLZTF、nonlngandanalyslSote—R、ceSLZjij卜j、、ByWangCan—ring一(CropScience)DirectedbyProf．XuZhengjunAThesisSubmittedinPartialFulfillmentofRequirementsfortheDegreeofMasterInSichuanAgricultureUniversityChengduSichuan，China6130May,2014

2、万方数据论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。一戳：王州寺3．．oq-年‘月p日关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业犬学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送

3、交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：导师签名：．joff-年毛只lQEl20ff年舌月／o日万方数据摘要干旱胁迫是影响植物生长发育的一个重要因素，在植物的整个生育期，都可能受到干旱胁迫的侵害。干旱胁迫会降低种子发芽率，抑制根系生长，降低株高，减少叶片，抑制植物的光合作用，延迟抽穗和开花，降低产量和种子品质。但在不同生育阶段，植物对干旱胁迫的敏感

4、性不同。植物作为一个整体，在干旱胁迫发生时，所有的组织、器官都发生了一系列的生理生化变化。水稻是高温喜湿作物，干旱胁迫不仅会降低产量，而且严重影响稻米的品质。随着全球范围内淡水资源的缺乏加剧，如何提高水稻的抗旱性成为生物科学研究的一个重要方向。分子生物学的快速发展，使从分子水平研究植物的抗旱性取得了许多重要成果，为抗旱水稻的分子育种提供了理论依据。通过转基因方法，改变水稻生育期内干旱相关基因的表达量，可以在较短时间内获得抗旱性较高的植株，缩短育种时问。OsLZTF(Gramene：LOC—Os0

5、2943330)基因，位于水稻的第2号染色体长臂，长度为1423bp，含有两个外显子，一个内含子。其中，cDNA长1336bp，全编码框长度为786bp，编码一个长度为261个氨基酸残基的蛋白质，分子量约为29KD。通过荧光定量PCR反应，发现该基因在水稻品种日本晴的根、茎、叶组织中都有不同程度的表达，表达量随着干旱胁迫时间的延长而变化，因此推测该基因与水稻的抗旱性有关。利用生物信息学软件，设计特异性引物将该基因从日本晴叶片cDNA中扩增出来，构建超表达和抑制表达载体，然后利用根癌农杆菌介导体系

6、，将该基因导入野生型日本晴，成功获得阳性转基因植株和T0代种子。主要研究结果：1．从野生型日本晴的叶片cDNA

7、十1，成功克隆出OsLZ聪因，并对其进行了生物信息学分析。2．运用荧光定量PCR反应分析了OsLZ”瑾因在ri本晴各组织中的表达水平，发现在未经干甲处理时，该基囚在根、茎、叶中均有不同程度的表达，在干旱处理下，该基冈在各组织rfl的表达量随着处理时间的变化而改变。3．构建了OsLZ7琏因的超表达和抑制表达载体，以根癌农杆菌介导方式，建立了适合水稻的遗传转化操作体系，获得了阳性转基因植株

8、，通过温室培养和带往海南繁殖，收获T1、0代种子。万方数据关键词：水稻；干旱；荧光定量；转基因万方数据AbstractDroughtstressisanimportantfactorinaffectingplantsgrowthanddevelopment．Plantsarelikelytobeinfringedbydroughtstressthroughoutthegrowingperiod．Droughtstresswillreduceseedgermination，suppressingr

9、ootgrowth，reducingplantheight，reducingleaves，inhibitingphotosynthesis，delayingheadingandflowering，reducingyieldandseedquality．Butatdifferentgrowthstages，thesensitivityofplantstodroughtstressisdifferent．Plantasawhole，allthetissueshaveundergoneaserieso