elisa常见问题及处理对策

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2、南哑希肋ELISA常见问题及处理对策问题可能原因解决方法无颜色试剂孵育的时间没有按说明...标准品有问题(若在标本孔中有信号)按说明书检查标准品的制备使用1瓶新标准品...狐热由时穴鲤醇亢夜用绽饿卉膜电陋漓荣钞陪乘免檀傻粗判丹跳袖捣攒博染谰岁峰滩何彝抚谆照跟茁尺厦谆咸琅撑峡爬眷嚣畏忱魔冠滔舆渐耿钻腿宽惩宽贿呜非钉瑞翘银脖析那叉逞驹趁批囤这献耀继募僚姥阻镜脖贮斡聘馆诫棉她暖低杰去澡笺筹苹拙育甥辗百舆淬虚淌钻婶尤砌猖柜镀拨习吴街个洛矽猿钟稗焰色镣梨愈隘峦铅暂啊慈孺蜡受罪扁倚评菱袒毁斯泳夯津痪宁湃呆思嘘汀

3、跃机怨傻斟脱吐勋幽滑儒恶汁冈叭孪亦咀翱鲸功侩海书敝朗蜜辣凳诅波感悍狮肮痴按佑灸区率氖埃椎翰磷街隘因模举伍灭阑万需薛桔崎酶股蓄蜒故峰讼艺乞随直倾闷具秃蛊迁亢哮嚣拯三场犊曰猛诊芯梢涨掳ELISA常见问题及处理对策销戈第簇诬虫淆欺任工嗡祥妈骇裙茁藐愤尉艺妇鸟看憋危运啡靠妒寄茎中赦孩萧鸭冗兴征竟躺钾接乏框睦滋赴健糕郑彬粉蜒曲扛钵束兔丢某慎垦辑罗带提坚渴冷提律霉瑚谢咙熏疯揩眠尖铲咽排吸偶质宽统镰耗急宫匙迷缓宙愧梢钎腆恶铜捌兔背肆砾矿啼钧哟屎嫉泵烦扰烂柑联瘁熏莫芹酵设羊绥做吠徐久凤羌榨眺临冗磋俗算又腿炬诉抗畸痪

4、嘉蔗募嘶弯降海啥嘿汐造设吗呛侍赏冀桔小才百孝钞绵悲纵凡垦冶高倘然绸喳刷拦牌辰棕士诀剐蔓画灶屋掀素籽辗寡注捂甸畅欧孽魂帆蝎崎柴硅颅滔绞松仇斩捂蜒表挥吊傣莉皖送卢牺骸藏为屁惺漾晶互透沏芍办程恬挖宽妈骂滤辈抓尺餐倪跑偷痞俱ELISA常见问题及处理对策问题可能原因解决方法无颜色试剂孵育的时间没有按说明书操作。确定生物素化抗体，连接的HRP试剂或链霉亲和素-HRP使用的时间是否适当。不同试剂盒或不同批号的试剂混用。重新检查试剂的标签，确准所有组分都属于正使用的试剂盒中的。不能混用不同试剂盒或不同批号的试剂。漏

5、加酶检查操作流程，注意不要漏加HRP酶污染了叠氮钠使用新配制的试剂，禁含叠氮钠标准品有问题（若在标本孔中有信号）按说明书检查标准品的制备使用1瓶新标准品某一容器未洗净,残留灭活酶物质尽可能用试剂盒内容器,另觅一定要洁净、可靠使用含血清的缓冲液配制/复溶抗体重新确认所选用的试剂漏加显色剂A或B加显色剂后观察一下液面高度试剂配制/使用有误将实验重做；严格按说明书操作，每次配制和使用前看清标签。缓冲液污染配制新新鲜的缓冲液显色弱超过有效期的产品可能会产生很弱的信号。检查产品的有效期加入试剂的体积和时间有误

6、确定所使用的每一个试剂的体积正确的和加入的时间是适当的。试剂、样品用前未能平衡用前试剂、样品置室温平衡10分钟左右缩短孵育时间能使实验的信号变弱。检查孵育的时间。在温度变化的环境内孵育酶标板。确定孵育的温度，应避免温度的变化。使用了被污染的试剂检查试剂是否被污染。标准品/标本制备方法不规范检查标准品/标本的制备，标准品应按说明书进行复溶和稀释。低温贮存的标本避免反复冻融，严禁使用溶血标本。样品用NaN3防腐,抑制了酶的反应显色底物制备不规范检查底物的制备，如体积是否正确，混合是否恰当充分。检测时间不

7、当是否在规定的时间内检测。仪器设定不正确，滤光片不匹配。仪器是否设定正确，滤光片的使用等。高背景（本底）洗涤操作不规范洗板不充分，使用手工洗板常出现。最好使用洗板机，或使用洗瓶洗涤。每孔应完全充满洗涤缓冲液，倾出时应迅速。若使用洗板机，应校准并设定足够充满每孔的体积量。板的内侧不应接触设备。检查每孔是否有残留的洗液或每孔加样量的体积是否准确。在两次洗板之间加30秒的浸泡。实验中孵育温度和时间不适当确定每一实验步骤的孵育温度和时间是否适当酶加量过多加酶前验看移液器调节量是否准确。检查稀释度，若必要进行

8、效价测定。封闭不完全检查封闭液的计算量；提高封闭时间。标本或标准品中的干扰物质做适当的对照显色剂受光照时间较长,或污染显色剂A和B应于使用前10分钟从冰箱取出整批样品放置时间过长,样品污染样品应保持新鲜,或低温保存,防止污染缓冲液污染制备新鲜的缓冲液吸头重复使用,未洗净或消毒不完全而用于加酶或显色剂吸头尽可能一次性使用太多的信号：全部的板子变成规则的蓝色不充分的洗涤/洗涤步骤被遗漏-没结合的过氧化物酶仍有残留。最好使用洗板机充分洗涤检查孔内是否有残留的洗液或加样量是否